progen PRHYPE-XS说明书

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Hyperphage M13 K07ΔpIII

噬菌体M13 K07ΔpIII

在包装普通噬菌体展示噬菌体中提供辅助噬菌体功能。通过pIII感染细菌。

产品信息:

数量

5 x 2毫升(冻干)

Cat. No. Product Name Quantity Price
PRHYPE-XS

Hyperphage M13 K07ΔpIII (1x2mL)

2 mL (lyoph.)

$135.00

Purity PEG precipitation
Packing unit 5×2 mL (lyoph.)

从超噬菌体包装的图书馆中分离重组抗体,蛋白质或肽的有效工具。

优点

  • 提高平移效率
  • 允许以较少的淘选抗原淘选
  • 识别高亲和力和低亲和力的粘合剂

介绍

Rondot等人开发了一种辅助噬菌体技术(“超噬菌体系统”)。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系统可通过增加每个噬菌体颗粒展示的抗体数量(多5个对0.01个)来改善在噬菌体展示中的抗体展示,因此该系统在功能基因分析和蛋白质组学领域具有巨大优势。淘选噬菌体可以用少量抗原和更高的效率进行。例如,通过在二维凝胶电泳后在蛋白斑点的印迹上采用超噬菌体包装的文库淘选,可以改善通用库在抗体分离中的应用。

更多应用

可以通过针对合成的膜结合肽表位淘选来分析大量开放阅读框(ORF)。在癌症研究中,超噬菌体包装库可能是通过在细胞表面上淘洗来发现新肿瘤标志物的工具。

巨噬细胞系统

巨噬细胞在pIII基因中带有一个缺失。它们由产生功能性pIII的大肠杆菌包装细胞系产生,该功能性pIII用于包装具有pIII缺失的噬菌体基因组。产生的巨噬细胞在其表面上带有功能性pIII,但基因组中缺少pIII基因。然后,这些巨噬细胞可用于通过噬菌粒文库感染细菌。每个产生的展示噬菌体在其表面上携带抗体或肽的几个拷贝,从而显着提高淘选效率。

pSEX Phagemid抗体基因库的例子

通过使用巨噬细胞,抗原结合提高了两个数量级以上。此外,由于携带抗体的质粒(噬菌粒)编码pIII和scFv片段之间的蛋白酶切割位点,因此可以通过蛋白酶处理洗脱超噬菌体包装的文库,从而洗脱高亲和力的结合物,并恢复野生型感染性表型以优化目的抗体基因的回收。

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Hyperphage M13 KO7ΔpIII (1x 2 ml)

Cat. No. PRHYPE-XS

主要特征

噬菌体展示辅助噬菌体

用于分离重组抗体、蛋白质和肽的工具

提高平移效率

用减少的淘洗抗原淘洗

高亲和力和低亲和力粘合剂的鉴定

数量1×2 ml(lyoph)

净化PEG沉淀

储存2-8°C

预期用途仅研究用途

重构用2ml H2O溶液重构每个小瓶。

应用在包装普通噬菌体展示噬菌体粒(例如pSEX、pHen2)中提供辅助噬菌体功能

细菌通过pIII的特异性感染

工作稀释度标签上显示了重组后每毫升超噬颗粒的浓度。对于感染,使用20的MOI

稳定性重建后立即使用

同义词噬菌体

从噬菌体包装文库中分离重组抗体、蛋白质或肽的有效工具。

优势

提高平移效率

允许用减少的淘洗抗原量淘洗

识别高亲和力和低亲和力粘合剂

介绍

Rondot等人开发了辅助噬菌体技术(“噬菌体系统”)(Nature Biotechnology 19:75-812001)。噬菌体系统允许通过增加每个噬菌体颗粒显示的抗体数量(高达5对0.01)来改善噬菌体展示中的抗体呈现,因此该系统在功能基因分析和蛋白质组学领域提供了巨大优势。噬菌体的淘选可以用少量抗原和更高的效率进行。例如,通过在二维凝胶电泳后在蛋白质斑点的印迹上使用超噬菌体填充文库的淘选,可以改进用于抗体分离的通用文库的应用。

更多应用程序

大量开放阅读框(ORF)可以通过对合成的膜结合肽表位进行筛选来分析。在癌症研究中,超噬菌体堆积的文库可以通过对细胞表面进行筛选来发现新的肿瘤标记物。

噬菌体系统

噬菌体携带pIII基因缺失。它们由产生功能性pIII的大肠杆菌包装细胞系产生,用于包装具有pIII缺失的噬菌体基因组。由此产生的超噬菌体表面携带功能性pIII,但基因组中缺乏pIII基因。然后这些超噬菌体可以被用来用噬菌体文库感染细菌。每个产生的展示噬菌体在其表面携带抗体或肽的若干拷贝,从而显著提高了筛选效率。

pSEX噬菌体抗体基因文库示例

通过使用超噬菌体,抗原结合增强了两个数量级以上。此外,由于携带抗体的质粒(噬菌体粒)编码pIII和scFv片段之间的蛋白酶切割位点,因此可以通过蛋白酶处理洗脱超噬菌体填充的文库,从而洗脱最高亲和力的结合物,再加上恢复野生型感染性表型,以优化目标抗体基因的回收。

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