Cyber Safe染料 货号tj1703 Biolite批发-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Cyber Safe染料 货号tj1703 Biolite批发
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
500ul
品牌 :
Biolite
用途范围 :
用于观测DNA琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶新一
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cyber Safe凝胶电泳染料

货号                        TJ1703                 存储条件                           建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 450
Ex (nm) 280 Em (nm) 530
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Safe™DNA 凝胶电泳染料 是一种用于观测DNA琼脂糖或聚丙.烯.酰.胺凝胶新一代染料,其使用特殊的合成工艺,与传统的溴乙锭(EB) 染料相比具有更高的灵敏度,且几乎没有致突变性,是新的EB替代染。Cyber Safe凝胶电泳染料与DNA结合后,可使用紫外-可见分光光度计或激光光源的设备观测。此染料也可用于RNA 凝胶染色。Cyber Safe DNA凝胶电泳染料在280nm 和502nm有激发波长,与DNA结合后的发射波长是530nm。

产品说明书

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Safe DNA凝胶电泳染料用TAE或TBE 缓冲液按1:10000稀释成1X Cyber Safe DNA 凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Safe 用 TAE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Safe 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液足以满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,确保整块凝胶浸入液面下.

注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置30分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。

1.5在254 nm紫外照射下,与双链DNA结合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时使用绿色滤光片。

2.电泳中染色 (仅适于琼脂糖凝胶电泳)

2.1直接用1X Cyber Safe DNA凝胶电泳染料(见1.2)与适量琼脂糖粉末配制凝胶。例如, 要配制25ml熔融的琼脂糖凝胶,可直接在 25ml 1X Cyber Safe中加入适量琼脂糖粉末,摇匀加热。

注意:预制含 Cyber Safe 的凝胶,与配制EB凝胶一样需微波炉加热,结合了Cyber Safe的DNA片段电泳时会比未结合染料的DNA片段走的稍慢,这也与EB染料的情况一样。

2.2电泳: 按常规操作, 电泳后不需要染色或脱色.

2.3在254 nm紫外照射下,与双链DNA接合的Cyber Safe呈现绿色荧光。拍照时使用绿色滤光片。

Cyber Safe染料 货号tj1703 Biolite批发

Biolite Peko Green双链核酸染料 tj1701-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Biolite  Peko Green双链核酸染料 tj1701
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1ml
品牌 :
Biolite
用途范围 :
定量检测DNA已经广泛用于生物学检测。
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Peko Green双链核酸染料

货号 TJ1701 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 1 ml
Ex (nm) 502 Em (nm) 523
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍


简要概述

Peko Green 染料是一种新型的dDNA染料。其检测灵敏度高,可检测到pg级DNA。检测范围宽,可跨越4个数量级。特异性好,基本不受ssDNA和RNA的影响,并且可以耐受一定浓度的盐,尿素,已醇,氯仿,去垢剂,蛋白等干扰。对微量的双链DNA进行定量在各种生物学应用中都显得非常重要。例如cDNA文库的构建,亚隆的DNA片段的纯化,定量DNA扩增产物,在药中DNA分子残留的测定等。检测核酸浓度常用的方法就是检测核酸再260nm (A260)处的光吸收,此方法主要的缺点是单链核酸和单核苷酸会产生干扰信号,核酸样品中的杂质也会影向结果。光吸收不能区分DNA和RNA,灵敏度也相对较低(用1cm的比色杯在A260值为0.1时相对应的双链DNA浓度为5μg/mL)。目前使用Peko Green 染料定量检测DNA已经广泛用于生物学检测。

产品说明书

实验方法

1.试剂准备

Peko Green是以1毫升的浓缩液形式保存在无水DMSO(二甲基亚砜)中。实验当天,配制2x Peko Green试剂的工作溶液,用1xTE液(10mM的Tris-HCl,1mM EDTA中,pH值为7.5)按1:200的比例稀释浓缩液。如果要准备好足够的工作液检测20个样品,可在20毫升1xTE加入100μL Peko Green dsDNA定量试剂。由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在一个塑料容器中配制。Peko Green试剂容易光降解,所以应将配好的溶液用箔包主或放置暗处避光保存。溶液在配制数小时内使用,以保证结果。

 

2.DNA标准曲线

2.1 标准品工作液的配制:

Sigma小牛胸腺DNA干粉(货号:D4522-1MG)1mg (Tris, NaCL等浓度已成标准体系),加入1mL双蒸水,配制成1mg/mL的标准工作液。

 

2.2 标准品工作液的稀释:

母液稀释:取10mL(1mg/mL) 标准品工作液加入到990 μLTE溶液中,稀释成10μg/mL。再取10μL(10mg/mL)标准品工作液加入到990 μLTE溶液中,稀释成100ng/mL。

倍比稀释:取800μL(100ng/mL) 标准品工作液加入到200 μLTE溶液中,稀释成80ng/mL(药典规定:荧光染色方法DNA含量在。25-80ng/mL范围线性较好,此方法DNA检出限为0.3ng/mL)。再取500mL(80ng/mL)标准品工作液加入到500 mLTE溶液中,浓度稀释到40ng/mL。然后按倍比稀释成20ng/mL,10ng/mL,5ng/mL,2.5ng/mL,1.25ng/mL,0.625ng/mL的标准品溶液,见表1。

 

表 1标准品工作液及样品排续在一个实心的黑色96孔板*

DS0 DS0 样品 样品
DS1 DS1
DS2 DS2
DS3 DS3
DS4 DS4
DS5 DS5
DS6 DS6
DS7 DS7

*备注: DS= 标准品工作液从0到40ng/mL平行样品

 

3.双链DNA样品分析

3.1倍比稀释后的各梯度标准品溶液,样品,和染料工作液各取100μL混匀,避光室温放置5分钟见表1。

备注: 如果用 384孔板, 则倍比稀释后的各梯度标准品溶液,样品,和染料工作液各取25mL即可。

3.2用荧光酶标仪在激发/发射波长= 490/525 nm(截止波长为510 nm)检测荧光强度。

3.3样品DNA 含量可根据标准品曲线算出。

Biolite  Peko Green双链核酸染料 tj1701

Cyber Gold 货号 tj1702 Biolite-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Cyber Gold 货号 tj1702 Biolite
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
500ul
品牌 :
Biolite
用途范围 :
用于琼脂糖凝胶电泳等研究
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cyber Gold核酸凝胶电泳染料

货号 TJ1702 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存

规格 500 ul 价格 1050

Ex (nm) 300 Em (nm) 539

分子量

溶剂 DMSO

产品详细介绍

简要概述

Cyber Gold核酸凝胶染料远溴化乙锭或其它任何凝胶系统中使用的任何凝胶染料,包括琼脂凝胶和聚丙烯酰胺凝胶、天然凝胶、甲醛 凝胶、乙二醛凝胶和尿素凝胶等。它是灵敏的dsDNA、ssDNA和RNA染料,可以使用标准的300 nm紫外透射仪观察结果,因此,您不使用昂贵的激光扫描仪也能获得很高的灵敏度。Cyber Gold核酸凝胶染料一旦结合核酸,荧光会增强1000倍,量子产率约为0.6。而EB为30倍,量子产量大约在0.15。因此,利用300 nm紫外透射仪和黑白成像,Cyber Gold检测凝胶中DNA和RNA的灵敏度比EB高5 到10倍。色如其名,可以观察到金色的条带。Cyber Gold染料可用于检测包括双链DNA,单链DNA和RNA,适用于琼脂糖凝胶电泳、变性梯度凝胶电泳(DGGE)、单链构象多态性(SSCP)研究,以 及其他常规的分析。

产品说明书

实验方案

1.电泳后染色

1.1按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

1.2把保存于DMSO中的10000X  Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料用TE或TBE 缓冲液 (PH 7.5-8)按1:10000稀释成1X Cyber Gold 核酸凝胶电泳染料(比如把10 μL Cyber Gold 用 TE or TBE 缓冲液稀释到100mL).

1.3染色: 用塑料容器装适量 1X Cyber Gold 染色液,染色液淹没凝胶即可。一般情况下,50mL染色液满足常规的小块凝胶,对于较大的凝胶,适量增加染色液用量,整块凝胶浸入液面下.

注意:染色容器不要使用玻璃器皿,因为染料会吸附在玻璃器皿的内壁,影响色效果。

1.4浸泡的凝胶室温下放置10到40分钟 (染色时间因凝胶浓度和厚度而定),用铝箔盖住容器或置于暗室避光,轻微摇动染色容器(50rpm),不需脱色处理。

1.5拍照时使用绿色滤光片。也可使用300 nm紫外照射视仪或蓝光透射仪观察。通常爆光时间較其他的染料短。

 

2.Cyber Gold 脱色法

        Cyber Gold 脱色可以通過簡單的乙醇核酸沉淀法把Cyber Gold染料从DNA或RNA中分离出来。超过97%的Cyber Gold染料一次乙醇核酸沉淀即可被清除。

 

2.1在Cyber Gold核酸样品加入以下三种盐之一,样品的浓度为:200mM NaCl,300 mM乙酸鈉(pH值5.2)或2 M的乙酸銨。混合均匀。

2.2加入两个容量的冰镇无水乙醇,混合均勻。放置在0℃(冰浴)30分钟。

2.3離心至少15分鐘,转速为10,000-12,000g。

2.4除去上清液,用70%乙醇清洗核酸沉淀。

2.5再次离心沉淀核酸,让核酸沉淀在空气中自然干燥,並根据需要重新溶于所需溶济中。

Cyber Gold 货号 tj1702 Biolite

Gel Green 核酸染料 货号tj1704 Biolite-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Gel Green 核酸染料  货号tj1704 Biolite
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
500ul
品牌 :
Biolite
用途范围 :
JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

  

JJ Green核酸染料

货号                      TJ1704                       存储条件                     建议在低于-15℃温度下冷冻保存            
规格 500 ul 价格 500
Ex (nm) 497 Em (nm) 520
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述


JJ Green是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下,JJ Green发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,JJ Green的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。JJ Green的吸收波长约为497nm,发射波长约为520nm。


JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。JJ Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用JJ Green染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。

JJ Green 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。

JJ Green 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,JJ Green 与EB相比,诱变能力大大降低。

JJ Green 核酸凝胶染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,JJ Green 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经JJ Green 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比,没有背景荧光。为获得的结果,凝胶在跑胶后再进行染色。JJ Green 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。


产品说明书

实验方案

1.JJ Green预染方法

1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

1.2工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的JJ Green稀释10000倍,即为JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

1.3制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。

1.4样品染色:向分析样品中加入JJ Green工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使JJ Green与样品中DNA充分结合。JJ Green工作液加入量为总上样量的1/10。

1.5DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使JJ Green与DNA充分结合。

1.6上样、电泳:按常规操作。


2.JJ Green后染方法

2.1按照常规方法进行电泳。

2.2用PH 7.0 – 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀释JJ Green浓缩液,混匀,制成3X染色溶液。

2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚/丙/烯/酰/胺/凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。

2.4用蓝盾观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙./烯./.酰/.胺/.凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾内观测。


3.JJ Green使用注意事项

3.1在"JJ Green预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则JJ Green会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。

3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中,JJ Green 可以全部从双链核酸上去掉。

3.3如果想对用 JJ Green 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射下,与双链 DNA 接合的 JJ Green 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

3.4JJ Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚/丙/.烯/.类容器。

Gel Green 核酸染料  货号tj1704 Biolite

JJ Green核酸染料 货号TJ1704-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

JJ Green核酸染料

JJ Green核酸染料

货号 TJ1704 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 500
Ex (nm) 497 Em (nm) 520
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

JJ Green是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下,JJ Green发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,JJ Green的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。JJ Green的吸收波长约为497nm,发射波长约为520nm。

 

JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。JJ Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用JJ Green染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。

JJ Green 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。

JJ Green 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,JJ Green 与EB相比,诱变能力大大降低。

JJ Green 核酸凝胶染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,JJ Green 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经JJ Green 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比,没有背景荧光。为获得结果,凝胶在跑胶后再进行染色。JJ Green 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。

产品说明书

实验方案

1.JJ Green预染方法

1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

1.2工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的JJ Green稀释10000倍,即为JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

1.3制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。

1.4样品染色:向分析样品中加入JJ Green工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使JJ Green与样品中DNA充分结合。JJ Green工作液加入量为总上样量的1/10。

1.5DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使JJ Green与DNA充分结合。

1.6上样、电泳:按常规操作。

 

2.JJ Green后染方法

2.1按照常规方法进行电泳。

2.2用PH 7.0 – 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀释JJ Green浓缩液,混匀,制成3X染色溶液。

2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

2.4用蓝光透照仪观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝光透照仪内观测。

 

3.JJ Green使用注意事项

3.1在”JJ Green预染色方法”中,电泳时间不要超过2小时,否则JJ Green会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。

3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中,JJ Green 可以全部从双链核酸上去掉。

3.3如果想对用 JJ Green 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 JJ Green 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

3.4JJ Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

Cyber Green核酸凝胶染料 货号TJ1700-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cyber Green核酸凝胶染料

Cyber Green核酸凝胶染料

货号 TJ1700 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 2950
Ex (nm) 497 Em (nm) 521
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Cyber Green 染料是一种绿色荧光核酸染料,可用于qPCR,解链曲线分析,嗜热解旋酶依赖性扩增(tHDA)的实时监测,常规溶液DNA定量和各种凝胶电泳。 DNA结合的Cyber Green 染料的激发和发射光谱非常接近荧光素(FAM)或SYBR®Green,使染料与配备488 nm氩激光的仪器或任何波长区域的可见光激发兼容。 Cyber Green 染料在热和水解方面都非常稳定,在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的,但在与dsDNA结合后变得高度荧光。荧光强度至少比溴化乙锭高一个数量级。此外,DNA / Cyber Green 复合物的荧光量子产率比DNA /溴化乙锭的荧光量子产率高5倍以上。它可以在电泳(预染色)之前,以及在电泳(后染色)之后使用,并且通过毛细管电泳分离染色DNA。它也常用于分子生物学,不含酶(例如:Taq酶,逆转录酶,内切核酸酶,T4连接酶)抑制,并且不干扰Southern blot(Southern印迹杂交)。

 

染料特点

高灵敏: 至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍

信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低

操作简单:无须脱色或冲洗

适用范围广:可适用于多种电泳分析

使用方便:不影响其它修饰酶作用

经济:价格便宜

产品说明书

染色方案

我们发现通过后染色实现了灵敏度的提升,这也消除了染料干扰DNA迁移的可能性。虽然预制方案更方便,但一些DNA样本可能会出现迁移,强烈建议凝胶运行时间不超过2小时。建议使用以下方案。 可能需要进行一些比较以确定哪一个更符合您的需求。

 

1.染色方案

1.1根据您的标准方案运行凝胶。

1.2通过将10,000X储备试剂稀释到PH 7.5  –  8缓冲液中制备1X Cyber Green 工作溶液(例如,TAE,TBE或TE优选pH8.0)。

注意:在水中制备的染色溶液不如在缓冲液中制备的染色溶液稳定,必须在24小时内使用,以确保染色灵敏度。另外,在pH低于约7.5或高于8.0的缓冲液中制备的染色溶液不太稳定并且显示出降低的染色效力。

1.3将凝胶放入合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的1X染色溶液浸没凝胶。

注意:不要使用玻璃容器,因为它会吸附染色溶液中的大部分染料。

1.4在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟,避光。

注意:染色溶液可以冷藏一周,避免反复冻融。

1.5使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片(如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片)的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

 

2.预染色方案

2.1使用标准方案制备琼脂糖凝胶溶液。

2.2在浇注凝胶前将10,000X Cyber Green™原液试剂以1:10,000稀释到凝胶溶液中并充分混合。

2.3根据您的标准方案运行凝胶。

2.4使用254 nm透射仪或使用长路径绿色滤光片(如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片)的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

 

3.电泳前的DNA染色

3.1在电泳前,用1:10,000稀释的染料(TE,TBE或TAE)孵育DNA至少15分钟。

3.2根据您的标准方案运行凝胶。

3.3使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片(如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片)的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

Peko Green双链核酸染料 货号TJ1701-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Peko Green双链核酸染料

Peko Green双链核酸染料

货号 TJ1701 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 1 ml 价格 1750
Ex (nm) 502 Em (nm) 523
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Peko Green 染料是一种新型的dDNA染料。其检测灵敏度高,可检测到pg级DNA。检测范围宽,可跨越4个数量级。特异性好,基本不受ssDNA和RNA的影响,并且可以耐受一定浓度的盐,尿素,已醇,氯仿,去垢剂,蛋白等干扰。对微量的双链DNA进行定量在各种生物学应用中都显得非常重要。例如cDNA文库的构建,亚克隆的DNA片段的纯化,定量DNA扩增产物,在药物中DNA分子残留的测定等。检测核酸浓度常用的方法就是检测核酸在260nm (A260)处的光吸收,此方法主要的缺点是单链核酸和单核苷酸会产生干扰信号,核酸样品中的杂质也会影向结果。光吸收不能区分DNA和RNA,灵敏度也相对较低(用1cm的比色杯在A260值为0.1时相对应的双链DNA浓度为5μg/mL)。目前使用Peko Green 染料定量检测DNA已经广泛用于生物学检测。

产品说明书

实验方法

1.试剂准备

Peko Green是以1毫升的浓缩液形式保存在无水DMSO(二甲基亚砜)中。实验当天,配制2x Peko Green试剂的工作溶液,用1xTE液(10mM的Tris-HCl,1mM EDTA中,pH值为7.5)按1:200的比例稀释浓缩液。如果要准备好足够的工作液检测20个样品,可在20毫升1xTE加入100μL Peko Green dsDNA定量试剂。由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在一个塑料容器中配制。Peko Green试剂容易光降解,所以应将配好的溶液用箔包主或放置暗处避光保存。溶液最好在配制数小时内使用,以保证最佳结果。

 

2.DNA标准曲线

2.1 标准品工作液的配制:

Sigma小牛胸腺DNA干粉(货号:D4522-1MG)1mg (Tris, NaCL等浓度已成标准体系),加入1mL双蒸水,配制成1mg/mL的标准工作液。

 

2.2 标准品工作液的稀释:

母液稀释:取10mL(1mg/mL) 标准品工作液加入到990 μLTE溶液中,稀释成10μg/mL。再取10μL(10mg/mL)标准品工作液加入到990 μLTE溶液中,稀释成100ng/mL。

倍比稀释:取800μL(100ng/mL) 标准品工作液加入到200 μLTE溶液中,稀释成80ng/mL(药典规定:荧光染色方法DNA含量在。25-80ng/mL范围线性较好,此方法DNA检出限为0.3ng/mL)。再取500mL(80ng/mL)标准品工作液加入到500 mLTE溶液中,浓度稀释到40ng/mL。然后按倍比稀释成20ng/mL,10ng/mL,5ng/mL,2.5ng/mL,1.25ng/mL,0.625ng/mL的标准品溶液,见表1。

 

表 1标准品工作液及样品排续在一个实心的黑色96孔板*

DS0 DS0 样品 样品
DS1 DS1
DS2 DS2    
DS3 DS3    
DS4 DS4    
DS5 DS5    
DS6 DS6    
DS7 DS7    

*备注: DS= 标准品工作液从0到40ng/mL平行样品

 

3.双链DNA样品分析

3.1倍比稀释后的各梯度标准品溶液,样品,和染料工作液各取100μL混匀,避光室温放置5分钟见表1。

备注: 如果用 384孔板, 则倍比稀释后的各梯度标准品溶液,样品,和染料工作液各取25mL即可。

3.2用荧光酶标仪在激发/发射波长= 490/525 nm(截止波长为510 nm)检测荧光强度。

3.3样品DNA 含量可根据标准品曲线算出。

Ru Red核酸染料 货号TJ1710-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Ru Red核酸染料

Ru Red核酸染料

货号 TJ1710 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 500
Ex (nm) 300 Em (nm) 605
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Ru Red是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有独特涉及的荧光染料。在游离状态下,Ru Red发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,Ru Red的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。Ru Red与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置。标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300 nm 紫外光附近可得到激发。Ru Red的吸收波长约为518 nm,发射波长约为605 nm。Ru Red 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,Ru Red 与EB相比,诱变能力大大降低。

 

Ru Red是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。Ru Red 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用Ru Red染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。

 

Ru Red 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。Ru Red 核酸凝胶染液(Ru Red Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,Ru Red 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经Ru Red 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比,没有背景荧光。为获得结果,凝胶在跑胶后再进行染色。Ru Red 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。

产品说明书

实验方案

1.Ru Red预染方法

1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳

1.2按照实验要求配制一定浓度的琼脂糖凝胶溶液并用微波炉或其他工具加热熔解。

1.3待加热后的琼脂糖凝胶溶液稍凉(约50-70℃),按1:10000比例加入Ru Red 原液摇匀(使Ru Red工作浓度为1 x)。

1.4倒胶固定,使自然凝固。

1.5加样、电泳,电泳程序根据实验要求。

1.6凝胶观测,成像分析。观测波长与EB相同,也可用SYBR or GelStar等滤光片成像,效果相同。

 

2.Ru Red后染方法

2.1按照常规方法进行电泳。

2.2用PH 7.0 – 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀释Ru Red浓缩液,混匀,制成3X染色溶液。

2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

2.4使用蓝光透照仪观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝光透照仪内观测。可使用EB, SYBR 或GelStar记录成像系统。

 

3.Ru Red使用注意事项

3.1在”Ru Red预染色方法”中,电泳时间不要超过2小时,否则Ru Red会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。

3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中,Ru Red 可以全部从双链核酸上去掉。

3.3如果想对用 Ru Red 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 Ru Red 呈现红色荧光。

3.5Ru Red对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。