Sigma去糖基化试剂盒 使用心得

Sigma去糖基化试剂盒 使用心得

Sigma去糖基化试剂盒

Sigma-Aldrich 的天然蛋白去糖基化试剂盒(Native Protein Deglycosylation Kit,货号NDEGLY)可在天然条件下去除糖蛋白上的N连接寡糖。糖基化蛋白修饰通常位于折叠蛋白中不容易接近的位置,因此在未变性的情况下,不大可 能通过标准的肽N- 糖苷酶 F(PNGase F)处理来去除。如果您的下游分析需要折叠蛋白(如酶学分析或蛋白相互作用分析),那么这个试剂盒也许适合您。

此试剂盒包含了内糖苷酶F1、F2和F3,以及相应的反应缓冲液。与PNGase F相比,这些内糖苷酶对蛋白构象没那么敏感,更适合在蛋白未变性的情况下去除各种N连接寡糖。这三种内糖苷酶有着不同的连接特异性。F1能够去除低聚甘露 糖和混合寡糖结构,而F2和F3则分别能去除两个分支和三个分支的结构。

此试剂盒在去糖基化上的效果如何呢?美国西北大学的博士生A. Caulfield介绍了他的使用心得。

据Caulfield介绍,他们想要确定目的蛋白在去糖基化之后的生物学活性。糖基化的 去除可通过Western blot来评估,即蛋白条带的分子量减少。他们的目的蛋白包含N连接糖基化。此蛋白在HEK 293细胞中产生,并利用其N端的FLAG标签来纯化。之前他们试过PNGase,但无法让目的蛋白去糖基化。

在这一实验中,他们将2 ug目的蛋白与0.02个单位的内糖苷酶F1、F2或F3及其相应的缓冲液混合,在37°C孵育4小时。之后通过标准的SDS-PAGE和Western blot来评估去糖基化的程度。

正如他们预计的那样,蛋白被去糖基化,且各个样品之间的结果相当一致。有趣的是,内糖苷酶F1对他们的蛋白起作用,而F2和F3则*没效果。Caulfield认为,了解哪种酶能使蛋白去糖基化,将带来一些有关寡糖链性质的信息。

Caulfield认为这一试剂盒简单易用,适用于所有研究蛋白糖基化的研究人员。当然,随着蛋白底物不同,反应条件可能也需要调整。

Sigma-Aldrich提供了多种去糖基化试剂盒,包括GlycoProfile I In-Gel Deglycosylation Kit、GlycoProfile II Enzymatic In-Solution Deglycosylation Kit、GlycoProfile IV Chemical Deglycosylation Kit等,适用于溶液或PAGE胶中的糖蛋白,与下游多个分析(如质谱分析或功能研究)兼容。

sigma封板膜产品

sigma封板膜产品

 

sigma封板膜产品

 

货号 品名 品牌
Z722537 AbsorbMax™ film non-sterile sigma
Z707430 AeraSeal™ 膜 non-sterile sigma
A9224 AeraSeal™ 膜 sterile sigma
Z721557 AlumaSeal® 384 film size 38 μm, thick aluminum foil sealing film for use with 384 well plates, non-sterile sigma
Z721549 AlumaSeal® 96膜 size 38 μm, thick aluminum foil sealing film for use with 96 well plates, non-sterile sigma
A2350 AlumaSeal® II film non-sterile sigma
Z742420 eXTReme™ Universal fit PCR Plate Seal polyester film sigma
Z721581 EZ-Pierce™ films non-sterile, Excel Scientific, EZP-100 sigma
Z721603 EZ-Pierce™ films sterile sigma
Z722715 Film sealing Paddle non-sterile sigma
Z722502 X-Pierce™ film non-sterile sigma
Z722529 X-Pierce™ film sterile sigma
R1275 Plate roller secures sealing film onto plate, pkg of 1 ea sigma
Z722723 Plate roller secures sealing film onto plate, pkg of 1 ea sigma
Z721417 SealPlate® ColorTab™ films green sigma
Z721425 SealPlate® ColorTab™ films lavender sigma
Z721433 SealPlate® ColorTab™ films orange sigma
Z721441 SealPlate® ColorTab™ films red sigma
Z721468 SealPlate® ColorTab™ films blue sigma
Z721476 SealPlate® ColorTab™ films assorted colors sigma
Z707384 SealPlate® MiniStrips™ film non-sterile sigma
Z707392 SealPlate® MiniStrips™ film sterile sigma
Z369675 ThermalSeal® Film ThermalSeal® films, classic non-sterile, ThermalSeal® film, non-sterile, polypropylene, 100 pack sigma
Z369683 ThermalSeal® Film ThermalSeal® films, classic sterile, ThermalSeal® Film, Sterile, polypropylene, 100 pack sigma
Z721492 ThermalSeal® MiniStrips™ pkg of 200 ea sigma
Z722553 ThermalSeal RT2RR™ film non-sterile, sealing films for real-time qPCR sigma
Z707465 ThermalSeal RT™ film thickness 2 mil sigma
Z707406 ThinSeal™ film non-sterile sigma
Z707414 ThinSeal™ film sterile sigma
Z721646 Zone-Free™ Sealing Films non-sterile sigma
Z369659 密封板 ® 薄膜 non-sterile sigma
Z369667 密封板 ® 薄膜 sterile sigma

 

AeraSeal封板膜     AeraSeal Film      ELISA用板密封膜  (ThinSeal)    聚酯封板膜    

 

 

SIGMA胎牛血清F8687- 500ml使用方法

SIGMA胎牛血清F8687- 500ml使用方法

SIGMA胎牛血清F8687- 500ml使用方法

产品型号:

所属分类: SIGMA胎牛血清

简要描述: SIGMA胎牛血清|F8687- 500ml

SIGMA胎牛血清| F8687- -500ml

名称:胎牛血清

货号: F8687-500ML

品牌: SIGMA

干细胞是在所有多细胞生物中发现的原始细胞。

它们保留了通过有丝分裂细胞分裂来更新自身的能力,并且可以分化成多种专门细胞类型。

哺乳动物干细胞的三大类是:源自胚泡的胚胎干细胞,在成人组织中发现的成年干细胞和在脐带中发现的脐带血干细胞。

在发育中的胚胎中,干细胞可以分化为所有专门的胚胎组织。

在成年生物中,干细胞和祖细胞可作为人体的修复系统,补充专门的细胞。

由于干细胞可以通过细胞培养而生长并转化为具有与诸如肌肉或神经等各种组织的细胞一致的特性的特化细胞,因此提出了将其用于医学治疗中。

特别是,胚胎细胞系,通过治疗性克隆产生的自体胚胎干细胞以及来自脐带血或骨髓的高可塑性成年干细胞被吹捧为有前途的候选者。

医学研究人员认为,干细胞疗法有可能从根本.上改变人类疾病的治疗方法。

已经存在许多成人干细胞疗法,尤其是用于治疗白血病的骨髓移植。

在干细胞研究中,有时需要体外培养和分析细胞。细胞要养好,就要用好血清,如Ausbian品 牌特级进口胎牛血清,它的内毒素小于3Eu/ml,使细胞更健康,客户做实验更加顺利。.

Gibco胎牛血清产品

根据您的特定细胞培养需求(从基础研究到专业检测)选择适合的胎牛血清。无论您是需要具

有低病毒风险、低内毒素水平的胎牛血清,还是需要适用于特殊应用和分析的血清, Gibco 产品都能提供越的价值。

特级FBS

BSE风险最小且病毒风险较低的血清

符合USP/EP 指南

多达90项质量测试,包括EMA病毒检测; USP/EP 支原体,内毒素,性能;生化/激素分析; Oritain 指纹识别

三次0.1 微米过滤

1、使用胰蛋白酶加入EDTA是为什么?

EDTA用来整合游离的镁离子和钙离子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前,用EDTA清洗细胞,以消除来自培养基中所有的二价离子。

2、可否使用与原先不同的培养基?

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,易造成细胞状态不好,最终造成细胞无法存活。

3、可否使用与原先不同的血清种类?

不能。血清是细胞培养.上- -个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。

4、细胞为何生长不均匀?,

细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致16、购买的细胞死亡或细胞存活率不佳研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于- -80°C太久。

5、细胞抱团怎么处理?

一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15 ml离心管中,静置20 min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只

能去除部分较大的细胞团)。

6、细胞内有空泡,是否是正常现象?

部分细胞本:身存在-一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及 – – 些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较高,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。

7、细胞传两代后开始逐渐死亡的原因

很可能是培养体系不适合细胞(未使用推荐的培养体系):或者消化过度,对细胞有严重影响;或者是传代比例不合适(具有密度依赖性的细胞,传代太稀;或者生长较快的细胞,传代较密,细胞严重堆叠生长)。

8、细胞生长逐渐变慢是什么原因?

细胞增殖变慢有以下原因: 1. 消化过度2. 传代过密3.细胞营养不良4.细胞频繁传代5.细胞状态不佳或老化6.细胞存在污染。

9、培养细胞时应使用5%或10%CO2?

一般培 养基中大都使用HC03-/C032-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7 g时,细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时,则应使用5% CO2培养细胞。

10、Co2培养箱之水盘如何保持清洁?

定期(每周一-次)更换水盘里面的水,水盘的水必须使用无菌蒸馏水或无菌去离子,水盘中可添加1%硫酸铜以预防霉菌污染。

11、细胞接种密度多少合适?

依照细胞株基本数据上的接种密度或稀释分盘的比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长的一个重要原因。按照我们的经验:一 般倍增时间24 h内的细胞,传代比率1:6 1:12为宜,倍增时间24- 48 h的细胞,传代比率1:3-1:8为宜,倍增时间超过48h的细胞,传代比率1:2-1:4为宜。

SIGMA胎牛血清| F8687- -500ml

人胰腺癌细胞PATU8988S

人前列腺癌PC-3

人肺癌细胞pc-9

人胰腺导管腺癌细胞PL45

人肝癌细胞PLC/PRF/5

人胚肾细胞ProPakA.6

人正常肝细胞QSG-7701

人淋巴瘤细胞Raji .

人B淋巴瘤细胞RAMOSRA1

人肝胆管癌细胞RBE

人横纹肌肉瘤细胞RD

人急性非B非T淋巴细胞白血病细胞REH

人子宫内膜癌细胞RL95-2

人多发性骨髓瘤细胞RPM18226

人结肠腺癌细胞RKO

人膀胱移行细胞乳头瘤RT4

人前列腺正常细胞RWPE-1

人前列腺正常细胞RWPE-2

人小细胞肺癌SBC-2

人膀胱鳞癌细胞SCaBER

人神经母细胞瘤细胞sh. sy5y

人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y转 染突变型

人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y转 染野生型

人子宫颈鳞癌细胞SIHa

人乳腺癌细胞SK-BR-3

人乳腺癌细胞SK-BR-3+IUC

人肝腹水腺癌细胞SK-HEP-1

人低分化肺腺癌细胞SK-LU-1

人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-2

人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记SK-MEL-2+LUC

人肺鳞癌细胞SK-MES-1

人神经上皮瘤细胞SK-N-MC

人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1

人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH

人卵巢癌细胞SK-OV-3

SIGMA F8687- 500ml

Sigma-Aldrich G8168 说明书

Sigma-Aldrich G8168 说明书

世界*实验材料供应商 Sigmaaldrich 上海金畔生物为其中国代理, Sigmaaldrich 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Sigmaaldrich 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

 Sigmaaldrich 中国代理, Sigmaaldrich 上海代理, Sigmaaldrich 北京代理,Sigmaaldrich 广东代理, Sigmaaldrich 江苏代理Sigmaaldrich 湖北代理,Sigmaaldrich 天津,Sigmaaldrich 黑龙江代理,Sigmaaldrich内蒙古代理,Sigmaaldrich 吉林代理,Sigmaaldrich 福建代理, Sigmaaldrich 江苏代理, Sigmaaldrich 浙江代理, Sigmaaldrich 四川代理,

 

Sigma-Aldrich 是*的生命科学与高科技集团公司。我们的产品被广泛地应用于生命科学、有机化学、材料科学、分析化学与其他高科技的研发及生产。我们的用户遍及生命科学公司、大学与政府研究机构与企业,超过130万科学家与科研人员使用到我们的产品。Sigma-Aldrich 在35个国家与地区设有营运机构,雇员超过9000人,为*的用户提供的服务。Sigma-Aldrich 承诺通过在生命科学、高科技与服务上的优势帮助用户在其领域更快地取得成功。

 

Sigma-Aldrich 根据研发与实验室用户的实际用途,将旗下产品分为 Sigma®、Aldrich®和 Supelco® 品牌,分别对应于生命科学、化学、分析色谱领域的产品。SAFC 则是*精细化工公司之一,专注于为广大工业客户提供灵活的精细化工产品。Vetec™ 为Sigma-Aldrich 旗下新成员,以亲和力的本地价格为用户提供质量可靠的常用生化和化学产品。

产品编号 G8168 | CAS号 108321-42-2 | SIGMA

G 418 disulfate salt solution

G 418二硫酸盐溶液

50 mg/mL in H2O, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture

别名: 抗生素G418

经验分子式(希尔表示法) C20H40N4O10 · 2H2SO4

分子量 692.71

MDL编号 MFCD00058314

产品名称

应用

G418二硫酸盐是与用于选择和维持原核和真核细胞的庆大霉素结构相似的氨基糖苷类抗生素。选择和维持的*浓度因细胞系而异。细菌和藻类需要5μg/ mL以下,而动物细胞可能需要300-500μg/ mL。

生化/生理行动

作用方式:G418通过抑制70S和80S核糖体的合成来阻断多肽的合成和蛋白质的延伸。

抗菌谱:G418选择用iNOS启动子构建体和新霉素抗性基因稳定转染的细胞,显示出对原生动物和睾丸激素的活性。

警告

该产品在2-8°C下保存2年。

性质

相关关键词 A-K, 氨基糖苷类, 抗菌药, 抗生素, 抗生素A至Z,
生物来源   来自小单孢属(Micromonospora echinospora)
InChI键   UHEPSJJJMTWUCP-NKCAIAFTSA -N
不育症   无菌过滤
生产线   生物试剂
效力   50-60mg / mL
浓度   在H 2 O中为 50mg / mL
杂质   内毒素,测试
颜色   无色
可溶性   2 O:50毫克/毫升
适应性   适合细胞培养
行动方式   蛋白质合成| 干涉
储存温度   2-8℃

 

货号 产品名称 规格 品牌
G8168 G 418 disulfate salt solution 50 mg/mL in H2O, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture (Sigma 10ML SIGMA

SIGMA G8168  G 418 disulfate salt solution 现货供应

 

 

Sigma-Aldrich PZ0001说明书

Sigma-Aldrich PZ0001说明书

 

 

 

Sigma-Aldrich PZ0001说明书

阿托伐他汀 钙盐 三水合物

Atorvastatin calcium salt trihydrate

≥98% (HPLC)

  • CAS号 134523-03-8 (anhydrous)

  • 经验分子式(希尔表示法) C33H34FN2O5 · 0.5 Ca · 1.5 H2O

  • 分子量 604.69

  •  PubChem Substance ID 329823670

 

 

货号与规格 包装规格 价格 (CNY)

PZ0001-5MG

5 MG

1,059.22

PZ0001-25MG

25 MG

4,224.49

 

性质

相关类别AN-AZ,批准的治疗药物/候选药物,花生四烯酸级联,生物活性小分子字母索引,酶抑制剂,

更多…

英奇键SHZPNDRIDUBNMH-NIJVSVLQSA-L

含量≥98%(液相色谱法)

形成白色粉末

储存条件避光

二甲基亚砜溶解度≥10mg/mL

发起人Pfizer

储存温度室温

产品描述

General description

阿托伐他汀钙盐三水合物是一种抗高脂蛋白血症药物和合成的胆固醇降低剂。它是一种结晶粉末。[1][2][3][4]

Application

阿托伐他汀钙盐三水合物已用于酶法测定血清中的甲羟戊酸。[5]

包装

5, 25 mg in glass bottle

Biochem/physiol Actions

阿托伐他汀钙盐三水合物是一种HMG-CoA还原酶的特异性抑制剂。HMG-CoA还原酶是催化HMG-CoA转化为甲羟戊酸的酶,其是胆固醇生物合成的早期步骤。阿托伐他汀可用于治疗高胆固醇血症。

Features and Benefits

该化合物也作为Sigma的药理活性化合物库(LOPAC®1280)的一部分提供,该化合物库是一个高品质即时筛选化合物的经生物学注释的集合。

该化合物也可作为Sigma的药理活性化合物库(LOPAC®辉瑞)的一部分提供,该化合物库汇集了辉瑞公司开发的90种药物和研究工具。

Other Notes

该化合物由辉瑞公司开发,用于 脂质信号研究。欲了解有关Sigma与辉瑞公司合作的更多信息,
 

Legal Information

根据Pfizer 的协议出售,用于研究目的。

法律信息

LOPAC 为以下机构的注册商标: Sigma-Aldrich Co. LLC

 

 

 

 

sigma Diffinity RapidTip移液器产品

sigma Diffinity RapidTip移液器产品

sigma Diffinity RapidTip移液器产品

 Diffinity RapidTip ®

用于PCR纯化

 

货号与规格 包装规格 价格(CNY)

D1947-8RXN

8个反应

345.68

D1947-96RXN

96反应

2,085.86

 

一般说明

Diffinity RapidTip可有效去除dNTP,引物和引物二聚体,同时从100 bp至10 kb的纯DNA片段回收率超过90%。功能性移液器吸头包含PCR纯化所需的一切。装有专有的吸附技术,对PCR组分具有不同的亲和力。分配的溶液可产生纯化的高质量DNA,可用于下游应用,例如DNA测序,SNP分析和微阵列打印。

相关类别 DNA和RNA纯化, 反应后净化, 分子生物学 更多…
储存温度   室温

应用

Diffinity RapidTip ®已PCR产物纯化被使用。[1]

特点和优点

•一步
•回收90%的高质量dsDNA 
•针对25μLRXN优化

法律信息

RapidTip是Diffinity Genomics,Inc.的注册商标。

 

 

D1947L Sigma-Aldrich

Diffinity RapidTip ®

用于PCR法纯化,用的Rainin LTS兼容®移液器

 

 

安全技术说明书

 

公告(PDF)
规格表(PDF)
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货号与规格 包装规格

D1947L-8RXN

8个反应

D1947L-48RXN

48个反应

D1947L-96RXN

96反应

 

 

相关类别 DNA和RNA纯化, 反应后净化, 分子生物学 更多…
储存温度   室温

产品描述

一般说明

Diffinity RapidTip可有效去除dNTP,引物和引物二聚体,同时从100 bp至10 kb的纯DNA片段回收率超过90%。功能性移液器吸头包含PCR纯化所需的一切。装有专有的吸附技术,对PCR组分具有不同的亲和力。分配的溶液可产生纯化的高质量DNA,可用于下游应用,例如DNA测序,SNP分析和微阵列打印。

特点和优点

•一步
•回收90%的高质量dsDNA 
•针对25μLRXN优化

Diffinity RapidTip ® 2

 

 

与聚合酶去除,用的Rainin LTS兼容PCR纯化®移液器

货号与规格 包装规格

D2947L-8RXN

8个反应

 

 

相关类别 DNA和RNA纯化, 反应后净化, 分子生物学 更多…
储存温度   室温

产品描述

一般说明

Diffinity RapidTip2有效去除dNTP,引物和引物二聚体,同时从100 bp到10 kb的纯DNA片段回收率超过90%。功能性移液器吸头包含去除聚合酶进行PCR纯化所需的一切。装有专有的吸附技术,对PCR组分具有不同的亲和力。当溶液进入时,会从溶液中除去杂质(聚合酶,单链引物和核苷酸)。RapidTip2针对50μLPCR反应样品进行了优化,分配的溶液可产生纯化的高质量DNA,可用于下游应用,例如DNA测序,SNP分析,微阵列打印和TA克隆。

Diffinity RapidTip2有效去除dNTP,引物,引物二聚体和DNA聚合酶,同时从100 bp到10 kb的纯DNA片段回收率超过90%。功能性移液器吸头包含去除聚合酶进行PCR纯化所需的一切。装有专有的吸附技术,对PCR组分具有不同的亲和力。分配的溶液可产生纯化的高质量DNA,可用于下游应用,例如DNA测序,SNP分析,微阵列打印和TA克隆。

特点和优点

•一步
•回收90%的高质量dsDNA 
•从PCR反应和克隆中去除聚合酶
•针对50μL反应进行了优化

 

 

 

 

 

安全技术说明书

 

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需要从国外调货,预计到货时间2020年1月23日- 详情

48个反应

1,303.07

D1947L-96RXN

 

需要从国外调货,预计到货时间2020年1月23日- 详情

96反应

2,281.85

 

Sigma-Aldrich品牌代理

Sigma-Aldrich 品牌介绍

简要描述:

Sigma-Aldrich 是生命科学与高科技集团公司。我们的产品被广泛地应用于生命科学、有机化学、材料科学、分析化学与其他高科技的研发及生产。我们的用户遍及生命科学公司、大学与政府研究机构与企业,超过130万科学家与科研人员使用到我们的产品。Sigma-Aldrich在35个国家与地区设有营运机构,雇员超过9000人,为*的用户提供优质的服务。

Sigma-Aldrich

 

Sigma-Aldrich 是生命科学与高科技集团公司。我们的产品被广泛地应用于生命科学、有机化学、材料科学、分析化学与其他高科技的研发及生产。我们的用户遍及生命科学公司、大学与政府研究机构与企业,超过130万科学家与科研人员使用到我们的产品。Sigma-Aldrich在35个国家与地区设有营运机构,雇员超过9000人,为*的用户提供优质的服务。Sigma-Aldrich承诺通过在生命科学、高科技与服务上的优势帮助用户在其领域更快地取得成功。Sigma-Aldrich 根据研发与实验室用户的实际用途,将旗下产品分为 Sigma、Aldrich、Supelco和Fluka