应用范围:细胞成像、细胞增殖和功能、细胞示踪、细胞计数
产品参数
外观:可溶于 DMSO 的白色或浅黄色固体
CAS 号:150347-59-4
Ex/Em: 494/521 nm(pH=7)
分子式:C29H19NO11
分子量:557.47
细胞标记机制:
贮存条件 -20℃ 避光保存,保质期 12 个月。
产品介绍
5(6)-CFDA, SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。
5(6)-CFDA, SE 是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate, FDA)的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的 5(6)-CFDA, SE 通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经 5(6)-CFDA, SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞的荧光非常均一,优于以前使 用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代 细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE 可检测分裂次数多达八次 甚至更多。经 5(6)-CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
5(6)-CFDA, SE 标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
注意事项
1. 5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用含胺的缓冲液。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。