钙离子荧光探针RatioWorks Cal520L Cy5葡聚糖偶联物 货号20603-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针RatioWorks Cal520L Cy5葡聚糖偶联物 货号20603
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

钙离子荧光探针RatioWorks Cal-520L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*

简要概述

产品基本信息

货号:20603

产品名称:钙离子荧光探针RatioWorks Cal-520L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:〜 12000

溶剂:水

产品介绍

钙测量对于许多生物学研究至关重要。利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光光谱仪和荧光酶标仪,研究人员可以利用荧光探针研究细胞内游离钙浓度的变化。细胞可以通过贴片移液管或微量注射物理性地将不渗透的葡聚糖结合钙指示剂装载到细胞上,然后使用荧光显微镜测量来自这些细胞的荧光信号。与AM酯形式相比,我们的钙指示剂的右旋糖酐形式在泄漏和区室化方面均明显降低。在荧光钙指示剂葡聚糖缀合物中,Cal-520葡聚糖偶联物可能是很好选择,因为它们具有高的荧光量子产率和钙的大量荧光增强作用。与Cal-520葡聚糖相比,此Cal-520L葡聚糖对钙离子的亲和力低,并且经过优化可监测高水平的钙离子。RatioWorks Cal-520L®/ Cy5-Dextran共轭物带有不依赖钙的Cy5荧光粉,作为 测量的参考色。Cal-520L荧光团可以被488 nm的氩激光很好地激发,其中Cy5的激发 小。参比Cy5荧光团可以被633 nm的He-Ne激光充分激发,其中Cal-520L荧光团的激发 小。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙离子荧光探针RatioWorks Cal-520L®/Cy5-葡聚糖偶联物

钙离子荧光探针RatioWorks Cal520L Cy5葡聚糖偶联物 货号20603

RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料 货号21210-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料 货号21210
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料

RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料 货号21210

简要概述

产品基本信息

货号:21210

产品名称:RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:506.52

溶剂:DMSO

激发波长(nm):405

发射波长(nm):550

产品介绍

        RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料是美国AAT Bioquest生产的PH荧光探针,现有的pH探针不适用于研究酸性细胞器,例如溶酶体,内体,吞噬体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低的pH值下会大大降低。尽管在过去的几十年中比例成像受到了广泛的关注,但是由于缺乏合适的酸性细胞器荧光探针,比例成像的增长潜力受到了极大的限制。RatioWorks PDMPO的特点是向酸性双重激发和双重发射pH探针。在较低的pH值下会发出强烈的黄色荧光,而在较高的pH值下会发出强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使RatioWorks PDMPO成为pKa = 4.47的酸性细胞器的理想pH探针。另外,RatioWorks PDMPO的超大斯托克斯位移和出色的光稳定性使其成为用于荧光成像和流式细胞仪应用的出色的荧光酸性试剂。RatioWorks PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供一种研究活细胞的内吞作用,吞噬作用和酸性细胞器的新工具。在流式细胞仪应用中,RatioWorks PDMPO可以被405 nm的紫激光很好地激发。RatioWorks PDMPO SE可以轻松用于制造各种生物共轭物,用于成像或血流应用,从而能够以减少的信号变异性和更高的准确性对吞噬作用和内吞作用进行特异性检测。这些结合物还可用于与绿色染料(例如GFP,Fluo-8,钙黄绿素或FITC标记的抗体)进行细胞功能多路复用分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料。 

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的代替品* 货号21189-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,酸*BCECF的代替品*  货号21189
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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RatioWorks BCFL,酸*BCECF的代替品*

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的代替品*  货号21189

货号 21189 存储条件                   f/l                   
规格                       1 mg                       价格
Ex (nm) 503 Em (nm) 528
分子量 ~500 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21189

产品名称:RatioWorks BCFL,酸*BCECF的 代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:~500

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

产品介绍

        RatioWorks BCFL,酸*BCECF的 代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks BCFL,酸*BCECF的 代替品*。 

操作方法

 1.用pH 3到10(3、4、5、6、7、7.5、8、10)制备一系列50 mM磷酸盐缓冲液

 2.制成1 mM DMSO储备溶液。如果在-20°C下储存,则DMSO储备液可保存6个月。

 3.制作 1:将1000稀释液放入不同的pH缓冲液中以得到1uM。

 4.在Ex / Em = 500/535和430/535 nm下测量荧光比。

RatioWorks PDMPO, SE 货号21210-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PDMPO, SE 货号21210
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料

RatioWorks PDMPO, SE 货号21210

简要概述

产品基本信息

货号:21210

产品名称:RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:506.52

溶剂:DMSO

激发波长(nm):405

发射波长(nm):550

产品介绍

        RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料是美国AAT Bioquest生产的PH荧光探针,现有的pH探针不适用于研究酸性细胞器,例如溶酶体,内体,吞噬体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低的pH值下会大大降低。尽管在过去的几十年中比例成像受到了广泛的关注,但是由于缺乏合适的酸性细胞器荧光探针,比例成像的增长潜力受到了极大的限制。RatioWorks PDMPO的特点是向酸性双重激发和双重发射pH探针。在较低的pH值下会发出强烈的黄色荧光,而在较高的pH值下会发出强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使RatioWorks PDMPO成为pKa = 4.47的酸性细胞器的理想pH探针。另外,RatioWorks PDMPO的超大斯托克斯位移和出色的光稳定性使其成为用于荧光成像和流式细胞仪应用的出色的荧光酸性试剂。RatioWorks PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供一种研究活细胞的内吞作用,吞噬作用和酸性细胞器的新工具。在流式细胞仪应用中,RatioWorks PDMPO可以被405 nm的紫激光很好地激发。RatioWorks PDMPO SE可以轻松用于制造各种生物共轭物,用于成像或血流应用,从而能够以减少的信号变异性和更高的准确性对吞噬作用和内吞作用进行特异性检测。这些结合物还可用于与绿色染料(例如GFP,Fluo-8,钙黄绿素或FITC标记的抗体)进行细胞功能多路复用分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料。 

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品* 货号21190-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品* 货号21190
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品*

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品* 货号21190

简要概述

产品基本信息

货号:21190

产品名称:RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:~600

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

产品介绍

        RatioWorks BCFL,AM*BCECF的越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2',7'-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks BCFL,AM*BCECF的代替品*。 

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针 货号21212-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PH165, AM pH荧光探针  货号21212
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
10*50ug
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针  货号21212

简要概述

产品基本信息

货号:21212

产品名称:RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

规格:10×50 ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:612.56

溶剂:DMSO

激发波长(nm):463

发射波长(nm):641

产品介绍

RatioWorks PH165 AM是一种新型荧光探针,可用于测量活细胞中的细胞内pH。 它的双重激发和双重发射使其成为用于分析活细胞的独特比例式pH探针。 在低pH值下,RatioWorks PH165在远红光谱区域的荧光很弱,而在红光谱区域的荧光很强。 随着pH的增加,它在远红光谱中显示出较高的荧光,而在红光谱中显示出较低的荧光。该探针可分别在497/594 nm和578/654 nm双重激发/发射下定量测定4至9范围内的胞质pH。 PH165的pKa为〜7.1。 RatioWorks PH165的红色荧光光谱使其适用于绿色荧光团(例如GFP)的多重检测。 RatioWorks PH165 AM具有细胞渗透性,并与各种平台兼容,例如荧光显微镜和酶标仪。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks PH165, AM pH荧光探针。 

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图示

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针  货号21212

图1.使用RatioWorks PH165,AM和荧光显微镜对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165,AM染色90分钟,然后转移到不同pH的溶液中。 使用Cy3 / TRITC和Cy5滤波器组(红色)获取图像。

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针  货号21212

图2.使用RatioWorks PH165,AM和酶标仪对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165,AM染色30

RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品* 货号21191-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*  货号21191
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*

RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*  货号21191

简要概述

产品基本信息

货号:21191

产品名称:RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

分子量:~700

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

产品介绍

        RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2',7'-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的RatioWorks BCFL,SE*BCECF的代替品*。 

RatioWorks pH荧光探针PDMPO 货号21204-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks pH荧光探针PDMPO

RatioWorks pH荧光探针PDMPO

RatioWorks pH荧光探针PDMPO    货号21204 货号 21204 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 333 Em (nm) 531
分子量 366.41 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21204

产品名称:RatioWorks pH荧光探针PDMPO

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:366.41

溶剂:DMSO

激发波长(nm):333

发射波长(nm):531

 

产品介绍

RatioWorks pH荧光探针PDMPO是美国AAT Bioquest生产的pH荧光探针,现有的pH探针不适合研究酸性细胞器,如溶酶体,内体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低pH下会显着降低。此外,大多数现有的pH探针(例如BCECF和SNARF)不选择性地定位于酸性细胞器中。虽然比率成像在过去几十年中受到了密切关注,但比率成像的增长潜力受到缺乏适合酸性细胞器的荧光探针的限制。PDMPO [2-(4-吡啶基)-5 – ((4-(2-二甲基氨基乙基氨基氨基甲酰基)甲氧基)苯基)恶唑]与LysoSensor黄/蓝相同分子,表征为酸性双激发和双发射pH探针。它在较低的pH下发出强烈的黄色荧光,并在较高的pH下产生强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使PDMPO成为酸性细胞器的理想pH探针,pKa = 4.47。PDMPO选择性地标记活细胞的酸性细胞器(例如溶酶体),并且两个不同的发射峰可用于在比率测量中监测活细胞的pH波动。此外,非常大的斯托克斯位移和PDMPO的优异光稳定性使PDMPO成为荧光成像的优异荧光酸性试剂。PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供了一种研究活细胞酸性细胞器的新工具。对于流式细胞术应用,紫外激光在405nm处可以很好地激发PDMPO。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks pH荧光探针PDMPO。

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参考文献

iTRAQ-based proteomic analysis of the metabolism mechanism associated with silicon response in the marine diatom Thalassiosira pseudonana
Authors: Chao Du, Jun-Rong Liang, Dan-Dan Chen, Bin Xu, Wen-Hao Zhuo, Ya-Hui Gao, Chang-Ping Chen, Chris Bowler, Wen Zhang
Journal: Journal of proteome research (2014): 720–734

说明书
RatioWorks pH荧光探针PDMPO.pdf

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针 货号21214-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针    货号21214 货号 21214 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2472
Ex (nm) 463 Em (nm) 641
分子量 581.51 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21214

产品名称:RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:595.53

溶剂:DMSO

激发波长(nm):463

发射波长(nm):641

 

产品介绍

RatioWorks PH165 NHS酯是一种新型荧光探针,可用于测量活细胞中的细胞内pH。它的双重激发和双重发射使其成为用于分析活细胞的独特比例式pH探针。在低pH值下,RatioWorks PH165在远红光谱区域的荧光很弱,而在红光谱区域的荧光很强。随着pH的增加,它在远红光谱中显示出较高的荧光,而在红光谱中显示出较低的荧光。该探针可分别在497/594 nm和578/654 nm双重激发/发射下定量测定4至9范围内的胞质pH,PH165的pKa为〜7.1。RatioWorks PH165的红色荧光光谱使其适用于与绿色荧光团(例如GFP)的多重测试。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针。 

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图示

 

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针    货号21214

图1.RatioWorks PH165的pH依赖性吸收光谱。

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针    货号21214

图2.RatioWorks PH165的pH依赖性发射光谱。

RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针    货号21214

图3.RatioWorks PH165的pH依赖性激发光谱。

 

 

参考文献

Intracellular pH Measurements in Glioblastoma Cells Using the pH-Sensitive Dye BCECF
Authors: Galifianakis, N. V., Placantonakis, D. G., Chesler, M.
Journal: Methods Mol Biol (2018): 103-109

Evaluation of BCECF fluorescence ratio imaging to properly measure gastric intramucosal pH variations in vivo
Authors: Rochon, P., Jourdain, M., Mangalaboyi, J., Fourrier, F., Soulie-Begu, S., Buys, B., Dehlin, G., Lesage, J. C., Chambrin, M. C., Mordon, S.
Journal: J Biomed Opt (2007): 064014

Calibration methods and avoidance of errors in measurement of intracellular pH (pHcyt) using the indicator bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein (BCECF) in human platelets
Authors: Valant, P. A., Haynes, D. H.
Journal: J Fluoresc (1992): 191-206

Estimation of intramitochondrial pca and ph by fura-2 and 2,7 biscarboxyethyl-5(6)-carboxyfluorescein (bcecf) fluorescence
Authors: Davis MH, Altschuld RA, Jung DW, Brierley GP.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (1987): 40

说明书
RatioWorks PH165, NHS ester pH荧光探针.pdf

RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 * 货号20604-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 *

RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 *

RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 *    货号20604 货号 20604 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 6060
Ex (nm) Em (nm)
分子量 ~12000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:20604

产品名称:RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 *

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~12000

溶剂:水

 

产品介绍

钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合钙后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够通过使用荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。可以使用patch pipette或显微注射将细胞不渗透葡聚糖的钙指示剂物理加载到细胞上。使用荧光显微镜检测来自这些细胞的荧光信号。与AM酯形式相比,我们的钙指示剂的右旋糖酐形式很少出现在外漏和区室化的问题。在荧光钙指示剂右旋糖酐结合物中,Cal-520右旋糖酐结合物可能是最佳选择,因为它们的高荧光量子产率和钙的大量荧光增强作用。 RatioWorks Cal-520®/ zFluor 647 -右旋糖酐缀合物带有不依赖钙的iFluor 647荧光探针作为放射测量的参考色。 Cal-520荧光团可以被488 nm的氩激光很好地激发,其中iFluor 647的激发极少。参比iFluor 647荧光团可以被633 nm的He-Ne激光或647 nm的红色激光很好地激发,其中Cal-520荧光团具有最小的激发。与Cal-520L葡聚糖(#20603)相比,此Cal-520葡聚糖对钙离子具有更高的亲和力,并且经过优化可监测低水平的钙离子。

说明书
RatioWorks Cal-520/ zFluor 647 -葡聚糖缀合物* MW 10,000 *.pdf

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针 货号21212-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针    货号21212 货号 21212 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2472
Ex (nm) 463 Em (nm) 641
分子量 583.53 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21212

产品名称:RatioWorks PH165, AM pH荧光探针

规格:10×50 ug

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:612.56

溶剂:DMSO

激发波长(nm):463

发射波长(nm):641

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3-Cy5滤波片组
发射: Cy3-Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3-Cy5滤波片组

 

产品介绍

RatioWorks PH165 AM是一种新型荧光探针,可用于测量活细胞中的细胞内pH。 它的双重激发和双重发射使其成为用于分析活细胞的独特比例式pH探针。 在低pH值下,RatioWorks PH165在远红光谱区域的荧光很弱,而在红光谱区域的荧光很强。 随着pH的增加,它在远红光谱中显示出较高的荧光,而在红光谱中显示出较低的荧光。该探针可分别在497/594 nm和578/654 nm双重激发/发射下定量测定4至9范围内的胞质pH。 PH165的pKa为〜7.1。 RatioWorks PH165的红色荧光光谱使其适用于绿色荧光团(例如GFP)的多重检测。 RatioWorks PH165 AM具有细胞渗透性,并与各种平台兼容,例如荧光显微镜和酶标仪。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks PH165, AM pH荧光探针。 

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图示

 

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针    货号21212

图1.使用RatioWorks PH165,AM和荧光显微镜对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165,AM染色90分钟,然后转移到不同pH的溶液中。 使用Cy3 / TRITC和Cy5滤波器组(红色)获取图像。

RatioWorks PH165, AM pH荧光探针    货号21212

图2.使用RatioWorks PH165,AM和酶标仪对HeLa细胞进行比例分析。 将HeLa细胞在37°C下用RatioWorks PH165,AM染色30分钟,然后转移到不同pH的溶液中。 使用Ex / Em = 497/594 nm和578/654 nm使用荧光酶标仪测量RFU,计算并绘制594/654 nm的比值。

 

 

参考文献

Intracellular pH Measurements in Glioblastoma Cells Using the pH-Sensitive Dye BCECF
Authors: Galifianakis, N. V., Placantonakis, D. G., Chesler, M.
Journal: Methods Mol Biol (2018): 103-109

Evaluation of BCECF fluorescence ratio imaging to properly measure gastric intramucosal pH variations in vivo
Authors: Rochon, P., Jourdain, M., Mangalaboyi, J., Fourrier, F., Soulie-Begu, S., Buys, B., Dehlin, G., Lesage, J. C., Chambrin, M. C., Mordon, S.
Journal: J Biomed Opt (2007): 064014

Calibration methods and avoidance of errors in measurement of intracellular pH (pHcyt) using the indicator bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein (BCECF) in human platelets
Authors: Valant, P. A., Haynes, D. H.
Journal: J Fluoresc (1992): 191-206

Estimation of intramitochondrial pca and ph by fura-2 and 2,7 biscarboxyethyl-5(6)-carboxyfluorescein (bcecf) fluorescence
Authors: Davis MH, Altschuld RA, Jung DW, Brierley GP.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (1987): 40

说明书
RatioWorks PH165, AM pH荧光探针.pdf

RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*(停产) 货号20527-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*(停产)

RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*(停产)

RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*(停产)    货号20527 货号 20527 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 0
Ex (nm) Em (nm)
分子量 N/A 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:20527

产品名称:RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

外观:固体

溶剂:水

 

产品介绍

钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合钙时显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够通过使用荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。可以使用显微注射等方式,用这些葡聚糖缀合的钙指示剂的不透细胞盐形式对细胞进行物理加载。使用荧光显微镜检测来自这些细胞的荧光信号。与AM 酯形式相比,我们的钙指示剂的葡聚糖形式表现出更少的渗漏。 RatioWorks Cal-590L/Cy5-Dextran Conjugate 携带不依赖钙的 Cy5 荧光团作为参考颜色。Cal-590L 荧光团可以被氪激光在 568 nm 处很好地激发,其中 Cy5 的激发最小。参考 Cy5 荧光团可以被 633 nm 的 He-Ne 激光或 647 nm 的红色激光很好地激发,其中 Cal-590L 荧光团的激发最小。

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参考文献

In vivo nuclear Ca2+-ATPase phosphorylation triggers intermediate size molecular transport to the nucleus.
AuthorsGensburger, Claire and Freyermuth, Solange and Klein, Christian and Malviya, Anant N
JournalBiochemical and biophysical research communications (2003): 1225-8
Real time, confocal imaging of Ca(2+) waves in arterially perfused rat hearts.
AuthorsBaader, Andreas P and Büchler, Lorenz and Bircher-Lehmann, Lilly and Kléber, André G
JournalCardiovascular research (2002): 105-15
Assessment and validation of a microinjection method for kinetic analysis of [Ca2+]i in individual cells undergoing apoptosis.
AuthorsTombal, B and Denmeade, S R and Isaacs, J T
JournalCell calcium (1999): 19-28
Effects of adenosine on Ca2+ entry in the nerve terminal of the frog neuromuscular junction.
AuthorsRobitaille, R and Thomas, S and Charlton, M P
JournalCanadian journal of physiology and pharmacology (1999): 707-14
The nucleus of HeLa cell contains tubular structures for Ca2+ signalling.
AuthorsLui, P P and Kong, S K and Kwok, T T and Lee, C Y
JournalBiochemical and biophysical research communications (1998): 88-93
The rise of nuclear and cytosolic Ca2+ can be uncoupled in HeLa cells.
AuthorsLui, P P and Kong, S K and Fung, K P and Lee, C Y
JournalPflugers Archiv : European journal of physiology (1998): 371-6
Porcine aortic endothelial gap junctions: identification and permeation by caged InsP3.
AuthorsCarter, T D and Chen, X Y and Carlile, G and Kalapothakis, E and Ogden, D and Evans, W H
JournalJournal of cell science (1996): 1765-73
Calcium signals in and around the nucleus in sea urchin eggs.
AuthorsGillot, I and Whitaker, M
JournalCell calcium (1994): 269-78
Spontaneous and propagated calcium release in isolated cardiac myocytes viewed by confocal microscopy.
AuthorsWilliams, D A and Delbridge, L M and Cody, S H and Harris, P J and Morgan, T O
JournalThe American journal of physiology (1992): C731-42

说明书
RatioWorks Cal-590L®/Cy5-葡聚糖偶联物 *MW 10,000*(停产).pdf

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品* 货号21189-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*    货号21189 货号 21189 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
分子量 ~500 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21189

产品名称:RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~500

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

 

产品介绍

RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*。 

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操作方法

 1.用pH 3到10(3、4、5、6、7、7.5、8、10)制备一系列50 mM磷酸盐缓冲液

 2.制成1 mM DMSO储备溶液。如果在-20°C下储存,则DMSO储备液可保存6个月。

 3.制作 1:将1000稀释液放入不同的pH缓冲液中以得到1uM。

 4.在Ex / Em = 500/535和430/535 nm下测量荧光比。

 

参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219–226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
Journal: Yonsei Medical Journal (2016): 1252–1259

说明书
RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*.pdf

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品* 货号21190-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*    货号21190 货号 21190 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1944
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
分子量 ~600 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21190

产品名称:RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~600

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

 

产品介绍

RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*。 

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参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219–226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
Journal: Yonsei Medical Journal (2016): 1252–1259

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品* 货号21191-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*

RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*    货号21191 货号 21191 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
分子量 ~700 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21191

产品名称:RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~700

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

 

产品介绍

RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*。 

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参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219–226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
Journal: Yonsei Medical Journal (2016): 1252–1259

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RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料 货号21210-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料

RatioWorks PDMPO, SE 标记反应染料

RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料    货号21210 货号 21210 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 333 Em (nm) 531
分子量 506.52 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:21210

产品名称:RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:506.52

溶剂:DMSO

激发波长(nm):333

发射波长(nm):531

 

产品介绍

RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料是美国AAT Bioquest生产的PH荧光探针,现有的pH探针不适用于研究酸性细胞器,例如溶酶体,内体,吞噬体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低的pH值下会大大降低。尽管在过去的几十年中比例成像受到了广泛的关注,但是由于缺乏合适的酸性细胞器荧光探针,比例成像的增长潜力受到了极大的限制。RatioWorks PDMPO的特点是向酸性双重激发和双重发射pH探针。在较低的pH值下会发出强烈的黄色荧光,而在较高的pH值下会发出强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使RatioWorks PDMPO成为pKa = 4.47的酸性细胞器的理想pH探针。另外,RatioWorks PDMPO的超大斯托克斯位移和出色的光稳定性使其成为用于荧光成像和流式细胞仪应用的出色的荧光酸性试剂。RatioWorks PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供一种研究活细胞的内吞作用,吞噬作用和酸性细胞器的新工具。在流式细胞仪应用中,RatioWorks PDMPO可以被405 nm的紫激光很好地激发。RatioWorks PDMPO SE可以轻松用于制造各种生物共轭物,用于成像或血流应用,从而能够以减少的信号变异性和更高的准确性对吞噬作用和内吞作用进行特异性检测。这些结合物还可用于与绿色染料(例如GFP,Fluo-8,钙黄绿素或FITC标记的抗体)进行细胞功能多路复用分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks  PDMPO, SE 标记反应染料。 

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参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

说明书
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RatioWorks PDMPO,右旋糖酐 货号21211-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐    货号21211 货号 21211 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 333 Em (nm) 531
分子量 ~10000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

RatioWorks PDMPO,右旋糖酐是美国AAT Bioquest生产的用于溶酶体pH检测的荧光探针,现有的pH探针不适合研究酸性细胞器,如溶酶体,内体,吞噬体,精子和顶体,因为它们的荧光在较低的pH下会显着降低。虽然比率成像在过去几十年中受到了密切关注,但比率成像的增长潜力受到缺乏适合酸性细胞器的荧光探针的限制。RatioWorks PDMPO的特点是酸性双激发和双发射pH探头。它在较低的pH下发出强烈的黄色荧光,并在较高的pH下产生强烈的蓝色荧光。这种独特的pH依赖性荧光使RatioWorks PDMPO成为酸性细胞器的理想pH探针,pKa = 4.47。另外,RatioWorks PDMPO具有极大的斯托克斯位移和出色的光稳定性,使其成为荧光成像和流式细胞仪应用的优异荧光酸性试剂。RatioWorks PDMPO独特的荧光特性可能为研究人员提供了一种新工具,可用于研究细胞内吞作用,吞噬作用和活细胞的酸性细胞器。用于流式细胞仪应用的紫外激光在405 nm处可以很好地激发RatioWorks PDMPO。这种RatioWorks PDMPO SE可以很容易地用于制造用于成像或流动应用的各种生物共轭物,从而能够通过降低信号变异性和提高准确度来特异性检测吞噬作用和胞吞作用。这些缀合物还可用于与绿色染料如GFP,Fluo-8,钙黄绿素或FITC标记的抗体多重化细胞功能分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks PDMPO,右旋糖酐。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 360nm
发射: 450,540nm
cutoff: 420,475nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如,将贴壁细胞在生长培养基中以40,000至80,000细胞/孔/100μL过夜  

对于384孔板,96孔或10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定最佳细胞密度。

 

2.准备RatioWorks PDMPO葡聚糖

2.1在1 mL 无菌水或Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)中制备1mg / mL RatioWorks PDMPO葡聚糖原液。应立即使用原液。任何未使用的溶液需要等分并在< -20 o C重新冷冻。

注意:避免反复冻融循环,避免光照。

2.2在HHBS中制备20-100ug / mL RatioWorks PDMPO葡聚糖加载溶液。

 

3.运行内吞作用测定

3.1取出培养基,将100μL/孔(96孔板)或25μL /孔(384孔板) RatioWorks PDMPO葡聚糖加样溶液加入细胞板(步骤2.2)。

注1:如果您的化合物干扰血清,重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基(96孔板100μL/孔或染料加载前384孔板25μL/ 孔)。

注2:可以发生RatioWorks PDMPO葡聚糖从早期内体到晚期内体的快速运输以及随后与溶酶体的融合。为了帮助在内体中显示RatioWorks PDMPO葡聚糖,我们建议增加标记浓度并减少加载时间,并立即成像。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育5至20分钟。

3.3用HHBS或生长培养基清洗并更换染料加载溶液

3.4通过监测Ex = 360nm处的荧光和Em = 450和540nm 的比率测量来进行胞吞作用测定。

 

参考文献

iTRAQ-based proteomic analysis of the metabolism mechanism associated with silicon response in the marine diatom Thalassiosira pseudonana
Authors: Chao Du, Jun-Rong Liang, Dan-Dan Chen, Bin Xu, Wen-Hao Zhuo, Ya-Hui Gao, Chang-Ping Chen, Chris Bowler, Wen Zhang
Journal: Journal of proteome research (2014): 720–734

说明书
RatioWorks PDMPO,右旋糖酐.pdf