Panagene F1002说明书

Panagene F1002说明书

 

韩国Panagene是一家专业从事PNA合成服务的公司。公司经过多年的发展,现已成为PNA合成服务的先进者。Panagene公司*的的PNA合成技术具有简单 、费用低 、产量高 、纯度高的优势。除了RNA的服务,Panagene还为顾客提供先进的多肽聚合服务,Panagene致力为客户提供更多的产品与服务。

Panagene F1002说明书

PNA

PNAPNA FISH probe

PNAPNA鱼探针

 

电中性骨架是PNAS的一个重要特征,它也为FISH(荧光原位杂交)提供了优势。电中性主干对PNA的高特异性使其具有快速性。 与少量的PNA探针杂交,没有明显的背景信号,导致高信噪比和温和条件下的洗涤。端粒/着丝粒PNA鱼脯 用于端粒长度分析的ES具有多种荧光。

 

DETAILS

PNA FISH probe

Cat. No.

Product Name

Size

C-rich probe
(repeats of CCCTAA)

F1001

TelC-FAM

5 nmole

F1002

TelC-Cy3

5 nmole

F1003

TelC-Cy5

5 nmole

F1004

TelC-Alexa488

5 nmole

F1009

TelC-FITC

5 nmole

F2003

TelC-Alexa647

5 nmole

F2005

TelC-Biotin

5 nmole

F2001

TelC-TAMRA

5 nmole

G-rich probe
(repeats of TTAGGG)

F1005

TelG-FAM

5 nmole

F1006

TelG-Cy3

5 nmole

F1007

TelG-Cy5

5 nmole

F1008

TelG-Alexa488

5 nmole

F1010

TelG-FITC

5 nmole

F2002

TelG-TAMRA

5 nmole

F2004

TelG-Alexa647

5 nmole

F2006

TelG-Biotin

5 nmole

Pan-centromere probe

F3003

Cent-Cy3

5 nmole

F3006

Cent-FAM

5 nmole

F3011

Cent-Cy5

5 nmole

F3012

Cent-Alexa488

5 nmole

F3013

Cent-FITC

5 nmole

F3014

Cent-TAMRA

5 nmole

F3015

Cent-Alexa647

5 nmole

F3016

Cent-Biotin

5 nmole

CENPB probe

F3001

CENPB-FAM

5 nmole

F3002

CENPB-Cy3

5 nmole

F3004

CENPB-Cy5

5 nmole

F3005

CENPB-Alexa488

5 nmole

F3007

CENPB-FITC

5 nmole

F3008

CENPB-TAMRA

5 nmole

F3009

CENPB-Alexa647

5 nmole

F3010

CENPB-Biotin

5 nmole

 

 

Panagene中国代理,Panagene上海代理,Panagene北京代理,Panagene广东代理,Panagene江苏代理Panagene湖北代理,Panagene天津代理,Panagene黑龙江代理,Panagene湖南代理Panagene内蒙古代理,Panagene吉林代理,Panagene福建代理,Panagene江苏代理,Panagene浙江代理,Panagene四川代理,Panagene代理

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

panagene PANAMutyper说明书

panagene PANAMutyper说明书

panagene PANAMutyper说明书

描述

PANAMutyper™ 是一种集成了 PNAClamp™ 和 PANA RealTyper™ 的新技术。PNAClamp™ 是一种 PCR 技术,使用 PNA(肽核酸)探针与野生型 DNA 互补结合。这些 PNA 探针抑制野生型 DNA 的扩增,因此选择性扩增少量突变型 DNA。它使检测体细胞突变成为可能。PANA RealTyper ™ 是使用荧光标记的 PNA 探针的多重熔解曲线分析。PANAMutyper™ 充分利用了这两种技术的优势。它不仅能够高灵敏度地检测到少量的突变,而且能够利用对目标基因的序列变化具有自身熔解温度(Tm)值的现象,同时对多个突变进行基因分型。

PNAClamp™ + PANA RealTyper™

特点和优势

更高的灵敏度(LOD < 0.1%)

PNAClamp™ 选择性扩增突变型 DNA。PANAMutyper™ 适用于需要高灵敏度的液体活检。

*PNAClamp™:该技术基于 PNA 的强结合亲和力以及 PNA 不能用作 PCR 引物的事实。PNA 钳位探针与野生型 DNA 结合并抑制野生型 DNA 的扩增。然后,只有突变型 DNA 被选择性扩增。

多重基因分型

选择性扩增的目标突变型DNA通过PANA RealTyper™(熔解曲线分析)进行基因分型。

*

PANA RealTyper™:荧光标记的 PNA 探针仅在与目标序列结合时才会发出荧光。根据核苷酸序列具有*解链温度 (Tm) 的 PNA 探针在 Tm 处从目标 DNA 变性,随着温度升高和荧光信号降低。通过分析信号降低的温度(熔解温度),可以对目标 DNA 进行基因分型。


应用

使用这项技术可以只用微量的血液样本检测ctDNA(循环肿瘤DNA),而以前的癌症诊断方法是通过手术和侵入性方式取出肿瘤组织。该产品是分子诊断的突破性成果,使用方便,3小时内检测ctDNA中的突变基因。该方法有望应用于各种癌症的早期诊断。此外,它将有助于疾病的诊断和治疗以及预测预后。

  • PNAR-3001

    PANAMutyper™ R EGFR
    突变检测试剂盒

  • PNAR-1001

    PANAMutyper™ R KRAS
    突变检测试剂盒

  • PNAR-2001

    PANAMutyper™ R NRAS
    突变检测试剂盒

PANAGENE2021价格表

上海金畔生物PANAGENE2021价格表

 

PANAGENE自2006年以来一直在全球供应肽核酸(PNA),这是基于我们高效合成高纯度PNA的*发明,如今我们拥有PNA知识和最多数量的PNA及其世界上的应用。

PNA 是 1990 年代早期发明的一种人工遗传材料(DNA 模拟物),由于其先进的物理化学特性,例如与互补核酸的强结合亲和力,作为一种有前途的材料候选物引起了研究人员的广泛关注,特别是用于诊断和治疗用途和优越的生物/化学稳定性。

基于PNA材料的优势和积累的知识,我们开发了多种创新的分子诊断平台技术,涵盖多重、突变基因特异性扩增、SNP鉴别等。为了满足快速变化的诊断市场需求,我们将继续努力创新。

PANAGENE 拥有专业知识,尤其是在癌症相关分子诊断方面,包括使用组织或液体活检标本进行伴随诊断。我们先进的技术不仅提供了高水平的检测,而且程序简单方便,可以在一线医院和临床实验室中轻松使用。

上海金畔生物PANAGENE2021价格表

货号 品名 规格 价格 品牌
F1001 TelC-FAM 5 nmole 4080 panagene2021
F1002 TelC-Cy3 5 nmole 4080 panagene2021
F1003 TelC-Cy5 5 nmole 4080 panagene2021
F1004 TelC-Alexa488 5 nmole 5780 panagene2021
F1009 TelC-FITC 5 nmole 4080 panagene2021
F2001 TelC-TAMRA 5 nmole 4080 panagene2021
F2003 TelC-Alexa647 5 nmole 5780 panagene2021
F2005 TelC-Biotin 5 nmole 3570 panagene2021
F1005 TelG-FAM 5 nmole 4080 panagene2021
F1006 TelG-Cy3 5 nmole 4080 panagene2021
F1007 TelG-Cy5 5 nmole 4080 panagene2021
F1008 TelG-Alexa488 5 nmole 5780 panagene2021
F1010 TelG-FITC 5 nmole 4080 panagene2021
F2002 TelG-TAMRA 5 nmole 4080 panagene2021
F2004 TelG-Alexa647 5 nmole 5780 panagene2021
F2006 TelG-Biotin 5 nmole 3570 panagene2021
F3003 Cent-Cy3 5 nmole 4080 panagene2021
F3006 Cent-FAM 5 nmole 4080 panagene2021
F3011 Cent-Cy5 5 nmole 4080 panagene2021
F3012 Cent-Alexa488 5 nmole 5780 panagene2021
F3013 Cent-FITC 5 nmole 4080 panagene2021
F3014 Cent-TAMRA 5 nmole 4080 panagene2021
F3015 Cent-Alexa647 5 nmole 5780 panagene2021
F3016 Cent-Biotin 5 nmole 3570 panagene2021
F3001 CENPB-FAM 5 nmole 4080 panagene2021
F3002 CENPB-Cy3 5 nmole 4080 panagene2021
F3004 CENPB-Cy5 5 nmole 4080 panagene2021
F3005 CENPB-Alexa488 5 nmole 5780 panagene2021
F3007 CENPB-FITC 5 nmole 4080 panagene2021
F3008 CENPB-TAMRA 5 nmole 4080 panagene2021
F3009 CENPB-Alexa647 5 nmole 5780 panagene2021
F3010 CENPB-Biotin 5 nmole 3570 panagene2021

 

Panagene现货产品列表

Panagene现货产品列表

2006年成立的PANAGENE公司,以*的肽核酸技术,为客户提供高纯度的肽核酸产品。PNA(peptide nucleic acids,PNA)肽核酸技术,是90年代丹麦科学家发明的一类以多肽骨架取代糖磷酸主链的DNA类似物,即以中性的肽链酰胺2-氨基乙基甘氨酸键取代了DNA中的戊糖磷酸二酯键骨架,其余的与DNA相同,PNA可以通过Watson-Crick碱基配对的形式识别并结合DNA或RNA序列,形成稳定的双螺旋结构。


Panagene现货产品列表:

货号 品名 规格 品牌
F1002 TelC-Cy3 端粒探针 5nmole Panagene
F1001 TelC-FAM FAM 5nmole Panagene
F1004 C-rich telomere probe,Alexa Fluor 488 labeled 5nmole panagene
F1006 TelG-Cy3 5 nmole panagene
F1008 TelG-Alexa488 5 nmole panagene
F1010 TelG-FITC 5 nmole panagene
F1009 TelC-FITC 5 nmole panagene
F2002 TelG-TAMRA 5 nmole panagene
F1003 TelC-Cy5 5 nmole panagene

Panagene F1002

PNAPNA FISH probe

PNAPNA鱼探针

电中性骨架是PNAS的一个重要特征,它也为FISH(荧光原位杂交)提供了优势。电中性主干对PNA的高特异性使其具有快速性。 与少量的PNA探针杂交,没有明显的背景信号,导致高信噪比和温和条件下的洗涤。端粒/着丝粒PNA鱼脯 用于端粒长度分析的ES具有多种荧光。

panagene2023年价格表

panagene2023年价格表-上海金畔生物

   PANAGENE位于韩国,是一家专门从事分子诊断的公司,同时是世界上首先研发出甲状腺癌相关基因诊断试剂盒的公司。

   PANAGENE开发平台技术,为肺癌、结直肠癌、甲状腺癌和皮肤癌患者识别个性化药物,并检测传染病。它还提供液体活检检测试剂盒。此外,该公司还提供应用于诊断产品的PNA(DNA类似物)。

   特别告知:为保证产品质量与良好性能,所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用!!!本次报价有效时间为2023年7月12日—2023年12月31日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
F3016 Cent-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3001 CENPB-FAM, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3002 CENPB-Cy3, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3004 CENPB-Cy5, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3005 CENPB-Alexa488, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3007 CENPB-FITC, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3008 CENPB-TAMRA, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3009 CENPB-Alexa647, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3010 CENPB-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-1g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-2g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-5g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-10g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-1g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-2g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-5g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-10g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物

关键词:F1002、panagene、Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH、Cent-FAM、TelC-Cy3



panagene2024年价格表

panagene2024年价格表

PANAGENE公司成立于2006年,以D有的肽核酸技术,为Q世界范围内的客户提供高纯度的肽核酸产品。PNA(peptide nucleic acids,PNA)肽核酸技术,是90年代丹麦科学家发明的一类以多肽骨架取代糖磷酸主链的DNA类似物,即以中性的肽链酰胺2-氨基乙基甘氨酸键取代了DNA中的戊糖磷酸二酯键骨架,其余的与DNA相同,PNA可以通过Watson-Crick碱基配对的形式识别并结合DNA或RNA序列,形成稳定的双螺旋结构。

PANAGENE的主要产品包括:

Custom PNA synthesis

Gamma PNA

PNA FISH probe

PNAs™ miRNA inhibit0r

Globin Reduction PNA

Fmoc PNA monomer

Panagene追求客户满意度,并以透明的管理为目标。

特别告知:为保证产品质量与良好性能,所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用!!!本次报价有效时间为2024年1月1日—2024年12月14日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
F1001 TelC-FAM, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1002 TelC-Cy3, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1003 TelC-Cy5, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1004 TelC-Alexa488, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1009 TelC-FITC, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2001 TelC-TAMRA, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2003 TelC-Alexa647, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2005 TelC-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1005 TelG-FAM, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1006 TelG-Cy3, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1007 TelG-Cy5, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1008 TelG-Alexa488, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F1010 TelG-FITC, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2002 TelG-TAMRA, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2004 TelG-Alexa647, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F2006 TelG-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3003 Cent-Cy3, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3006 Cent-FAM, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3011 Cent-Cy5, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3012 Cent-Alexa488, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3013 Cent-FITC, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3014 Cent-TAMRA, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3015 Cent-Alexa647, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3016 Cent-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3001 CENPB-FAM, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3002 CENPB-Cy3, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3004 CENPB-Cy5, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3005 CENPB-Alexa488, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3007 CENPB-FITC, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3008 CENPB-TAMRA, 5 nmole 5nmole 4320 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3009 CENPB-Alexa647, 5 nmole 5nmole 6120 panagene 4-6周 上海金畔生物
F3010 CENPB-Biotin, 5 nmole 5nmole 3780 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-1g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-2g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-5g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMA-1001-10g Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-1g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-2g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-5g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMC-1001-10g Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMG-1001-1g Fmoc-G(Bhoc)-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMG-1001-2g Fmoc-G(Bhoc)-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMG-1001-5g Fmoc-G(Bhoc)-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMG-1001-10g Fmoc-G(Bhoc)-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMT-1001-1g Fmoc-T-aeg-OH, 1g 1g 1440 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMT-1001-2g Fmoc-T-aeg-OH, 2g 2g 2610 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMT-1001-5g Fmoc-T-aeg-OH, 5g 5g 6534 panagene 4-6周 上海金畔生物
FMT-1001-10g Fmoc-T-aeg-OH, 10g 10g 13050 panagene 4-6周 上海金畔生物
BMA-1001 Boc-PNA-A(Z)-OH, 1g 1g 3600 panagene 4-6周 上海金畔生物
BMC-1001 Boc-PNA-C(Z)-OH, 1g 1g 3600 panagene 4-6周 上海金畔生物


关键词:panagene、miRNA抑制剂、FISH探针、球蛋白抑制剂、试剂盒

PANAGENE F1009-5 说明书

PANAGENE F1009-5 说明书

 

Panagene公司成立于2001年,总部位于韩国。Panagene是一家专业从事PNA合成服务的公司。公司经过多年的发展,现已成为PNA合成服务的。Panagene公司*的的PNA合成技术具有简单 、费用低 、产量高 、纯度高的优势。除了RNA的服务,Panagene还为顾客提供的多肽聚合服务,Panagene致力为客户提供更多的产品与服务。

Panagene公司主要产品包括:

miRNA抑制剂         FISH探针

球蛋白抑制剂         HBV治疗耐药鉴定芯片

miRNA表达谱芯片       HPV 基因分型芯片

基因突变检测试剂盒系列:EGFR 基因突变检测试剂盒、 B-raf基因突变检测试剂盒、K-ras基因突变检测试剂盒。

Panagene专业代理,具体产品信息欢迎电询:021-50837765

 

产品编号 产品名称 规格型号 品牌
F1009-5 C-FITC, C-rich omere probe, FITC labeled 5 nmole panagene

 

应用(Applications) Fluorescencein situhybridization (FISH)
产品分类(Product Category) 端粒PNA探针(肽核酸标记)(omere PNA Probes ( Peptide Nucleic Acid Probes )

Human omere PNA probe
Fluorescencein situhybridization (FISH) provides information on the omere length and centromere location in individual chromosomes. Although FISH has proved to be a useful technique, it is a fairly time-consuming procedure with limitations in sensitivity. However, PNA probes show very strong signal, lower background, short hybridization time (30 min), and make it possible to hybridization reaction at the room temperature. The hybridization time of PNA probes is considerably shortened in comparison with FISH reaction using DNA probes, which requires an overnight hybridization in order to be efficiently completed on preparations.
When used with PNA probes for FISH, hybridization is fast with significantly reduced background noise that results in high signal to background noise ratio.

上海金畔生物能够提供Panagene, Inc.品牌的 F1009, C-FITC 5nmole or 10nmole/ea行货渠道信息、*信息等。

 

 

Panagene品牌代理

Panagene

简要描述:

PANAGENE自2006年以来一直在全球范围内供应肽核酸(PNA),其基础是我们高效合成高纯度PNA的发明,目前我们对PNA拥有知识,拥有最多的PNA及其在世界范围内的应用。

PANAGENE自2006年以来一直在全球范围内供应肽核酸(PNA),其基础是我们高效合成高纯度PNA的发明,目前我们对PNA拥有知识,拥有最多的PNA及其在世界范围内的应用。


PANAGENE have been supplying Peptide Nucleic Acid (PNA) worldwide and exclusively since 2006 based on our unique invention of efficient synthesis of PNA with high purity, and nowadays we are possessing the best knowledge on PNA and the largest number of patents on the PNA and its applications in the world.


品牌

货号

名称

规格

Panagene

PNAR-3001

Oncology – Liquid biopsy

24 tests

Panagene

PNAR-1001

Oncology – Liquid biopsy

24 test

Panagene

PNAR-6001

PANAMutyper™ Screening Kit

1 kit

Panagene

PNAR-6001

PANAMutyper™ Screening Kit

1 kit

PANAGENE FISH(荧光原位杂交)PNA 端粒探针方案

 

PANAGENE FISH(荧光原位杂交)PNA 端粒探针方案

PANAGENE F1001

原则上,荧光原位杂交 (FISH) 应该能够提供单个染色体端粒长度的信息。直接标记的寡核苷酸探针由于其体积小(良好的穿透特性)、单链性质(探针无变性)和受控的合成,是此类分析的有吸引力的探针。然而,端粒重复序列的寡核苷酸杂交的效率还不足以将这种方法扩展到各种物种染色体中 TTAGGG 重复序列的定性研究之外。近研究表明,肽核酸 (PNA) 寡核苷酸探针将与互补的寡核苷酸序列杂交,产生的双链比 DNA/DNA 或 DNA/RNA 双链更稳定。在 PNA 中,传统 DNA 和 RNA 寡核苷酸的带电磷酸-(脱氧)核糖骨架被通过肽键连接的重复 N-(2-氨基乙基)-甘氨酸单元的不带电骨架取代。与 DNA 寡核苷酸相比,PNA 寡聚体表现出更高的序列特异性、改善的稳定性、重现性和更低的背景。由于 PNA/DNA 双链的 Tm 较高,短(18 聚体)端粒 PNA (CCCTAA)3 应用广泛。

 

 

开始前要做的事情二、杂交

1. 将载玻片置于 80 °C 预热培养箱中 5 min。

 

I. 端粒 PNA 探针的制备

1. 打开试管前离心试管,以便在试管底部收集冻干 PNA 探针。

2. 向管中加入甲酰胺,得到 PNA 探针的储备液。

3. 在 PNA 杂交缓冲液中将贮备液稀释至终浓度 200 nM。

ü :将 PNA 探针溶液在 4 ℃ 下避光储存。

 

II. 溶液制备

1. 杂交缓冲液

20 mM 钠2HPO4, pH 7.4

20 mM Tris,pH 7.4

60% 甲酰胺 2X SSC

0.1µg/ml 鲑鱼精子 DNA

 

2. RNase A 溶液

100µg/ml RNase A(2X SSC 中)

3. 胃蛋白酶 0.005% 溶液

50µl 5% 胃蛋白酶贮备液溶于 50 mL 0.01 MHCl 中。

ü :新鲜!使用前加热至 45 ℃。

4. 洗涤液

2X SSC/0.1% 吐温-20

 

杂交和洗涤

I. 预处理

1. 按照特定细胞系推荐的程序制备载玻片,并风干。

2. 将载玻片在 PBS 中浸泡 15 min。

3. 将载玻片在 4% 甲醛的 PBS 中 37 °C 固定 4 min。

4. 37 °C PBS 洗 5 min (X2)。

5. 向一个干净的平板中加入 500µl RNase A 溶液,并将每个载玻片面朝下置于 RNase A 溶液上,在 37 ℃ 下孵育 1 h。

ü :注意不要干燥。

6. 在 2X SSC(X3 重复)中清洗,并在 DW 中清洗。

7. 在 37 °C 下,将载玻片在 0.005% 胃蛋白酶中浸泡 4 min。

8. 37 °C PBS 洗 3 min (X2)。

9. 重复步骤 3-4。

10. 室温下在 PBS 中清洗 5 min。

11. 在冷乙醇系列中脱水载玻片(在 70%、85%、100% 中脱水 1 min)。

12. 晾干载玻片。

2. 向每张载玻片的标记区域加入 20µl PNA 探针的杂交缓冲液。

ü :使用前 90 °C 加热杂交缓冲液 5 min。

3. 用 18 x 18 mm 盖玻片覆盖载玻片上的标记区域。

ü :注意不要干燥。

4. 将载玻片在 85 °C 下变性 10 min。

ü 注:变性应在低 80 ℃ 和高 90 ℃ 之间进行。

仔细检查培养箱的温度。75 °C 以下的变性温度严重损害结果。

5. 将载玻片在室温下避光放置 1 h。

 

III. 洗涤

1. 在室温下将载玻片浸入洗涤液中,以取出盖玻片。

2. 在 55‐60 °C 下用清洗液清洗载玻片 10 min (X2)。

ü 注:应在 55-60 ℃ 下进行清洗。

3. 将载玻片在清洗液中清洗 1 min

室温。

 

IV. 复染

1. 将载玻片在 DAPI/2X SSC 中染色 10 min。

2. 在 2X SSC 中清洗载玻片 2 min。

3. 在 1X SSC 中清洗载玻片 2 min。

4. 在 DW 中清洗载玻片 2 min。

5. 用离心机干燥载玻片。

6. 在载玻片的目标区域滴一滴封片剂。

7. 盖上盖玻片,使溶液均匀分布在盖玻片下。避免产生气泡。

8. 使用带有适当滤光片的荧光显微镜观察染色载玻片。

 

V. 参考文献

1. Kentaro Taemura等人2005,Developmental Biology 281,196‐207.

2. Won‐Woo Lee等人2002,Immunology 105,458‐465.

3. Heather Perry.等人。2001,Journal of Microbiological Methods 47,281‐292.

4. 陈彩福等人。1999,哺乳动物基因组 10,13‐18。

5. M. Hultdin等人。1998,Nucleic Acids Research 26 (16) ,3651‐3656.

6. Peter M. Landsdorp等人。1996,Human Molecular Genetics 5 (5) ,685‐691.