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mypols Taq DNA聚合酶说明书

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mypols Taq DNA聚合酶说明书

mypols Taq DNA聚合酶说明书

Taq Hotstart DNA聚合酶

€900,00

Taq Hotstart DNA聚合酶

  • 通过使用Taq DNA聚合酶变体可以防止非特异性扩增，因为DNA聚合酶是热启动的。与DNA聚合酶一起提供的10x反应缓冲液经过专门设计，可实现宜PCR性能和DNA聚合酶活性。这使得这种DNA聚合酶可以在广泛的PCR应用中使用。  
    根据要求，该物品当然可以定制

 

DNA聚合酶由适体热启动配制。高于50-55°C的温度会导致适体的二级结构融化，并在几秒钟内释放出DNA聚合酶。无需额外的激活时间。DNA聚合酶可与10x反应缓冲液一起提供。当添加合适的实时染料（例如GreenDye（＃2000））或荧光探针时，它也可以用于实时循环

该产品以凉爽包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

Taq DNA聚合酶经过成功的PCR性能测试。从人基因组DNA扩增出92 bp的片段（β-肌动蛋白基因），并通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。使用人造DNA模板和DNA引物监测Taq DNA聚合酶的活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。酶浓度通过蛋白质特异性染色确定。

 

 

 

 

 

 

 

广泛的放大范围

从3 ng的DNA质粒扩增出大小不同的扩增子。Taq DNA聚合酶的使用可产生清洁且高收率的产物，如在0.8％琼脂糖凝胶上进行PCR后分析的那样。

更快的检测速度和更高的灵敏度

从20 ng，2 ng，200 pg和20 pg人基因组DNA提取物中扩增了人凝血因子IIa（F2）的片段（64 bp）。使用另一家厂商的Taq DNA聚合酶混合物并行进行相同的实验。随后在2.5％琼脂糖凝胶上分析PCR产物。

mypols2020年价格表

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mypols2020年价格表

 

mypols2020年价格表

货号 品名 规格 价格 品牌
#1101 Taq hotstart DNA polymerase 4000 U, 5U/µl, 2x 400 µl 10400 mypols2020
#2000 GreenDye 20x 200 reactions à 25 µl, 1 x 250 µl 1050 mypols2020
#2000 GreenDye 20x 800 reactions à 25 µl, 1 x 1000 µl 3100 mypols2020
#2001 Taq 2x PCR Master Mix 500 reactions á 50 µl, 10 x 1.25 ml 4200 mypols2020
#2201-8 qPCR Probe LyoBeads 96 reactions à 20 µl, pre-dispensed in 8x well PCR strips 1980 mypols2020
#2201-96 qPCR Probe LyoBeads 96 reactions à 20 µl, pre-dispensed in breakable 96x well PCR plate 1980 mypols2020
#2201-8 qPCR Probe LyoBeads, pre-dispensed in 8x well PCR strips 480 reactions à 20 µl, pre-dispensed in 8x well PCR strips 8980 mypols2020
#2201-96 qPCR Probe LyoBeads, pre-dispensed in breakable 96x well PCR plates 480 reactions à 20 µl, pre-dispensed in breakable 96x well PCR plate 8980 mypols2020
#5000 DirectBlood Genotyping PCR Kit 100 reactions à 20 µl, 4x LyoCakes 3980 mypols2020
#5000 DirectBlood Genotyping PCR Kit 500 reactions à 20 µl, 20x LyoCakes 17980 mypols2020
#6101 Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6101 Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#6201Hi Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+high ROX) 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6201Lo Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+low ROX) 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6301S Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye) 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6401Hi Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +high ROX) 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6401Lo Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +low ROX) 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 2000 mypols2020
#6201Hi Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+high ROX) 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#6201Lo Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+low ROX) 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#6301S Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye) 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#6401Hi Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +high ROX) 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#6401Lo Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +low ROX) 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 9000 mypols2020
#7101 VolcanoCell2G 2x RT-PCR Master Mix 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 3600 mypols2020
#7101 VolcanoCell2G 2x RT-PCR Master Mix 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 15600 mypols2020
#8100 Volcano2G DNA polymerase 250 U, 5U/µl, 50 µl  1900 mypols2020
#8100 Volcano2G DNA polymerase 1000 U, 5U/µl, 200 µl 6000 mypols2020
#9001  HiDi DNA polymerase 250 U, 5U/µl, 50 µl 1580 mypols2020
#9001  HiDi DNA polymerase 1000 U, 5U/µl, 200 µl 5600 mypols2020
#9201  HiDi Taq polymerase 250 U, 5U/µl, 50 µl 1580 mypols2020
#9201  HiDi Taq polymerase 1000 U, 5U/µl, 200 µl 5600 mypols2020
#9101  HiDi 2x PCR Master Mix 100 reactions á 25 µl, 1 x 1.25 ml 1600 mypols2020
#9101  HiDi 2x PCR Master Mix 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 7200 mypols2020
#9501 Direct Oral Swab 2xPCR Master Mix 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 7800 mypols2020
#9801 qPCR Probe 2x Master Mix 500 reactions á 50 µl, 10x 1.25 ml 4200 mypols2020
#9801lyo qPCR Probe LyoCakes 2x Master Mix (freeze-dried) 80 reactions á 25 µl, 4x LyoCakes 1980 mypols2020
#9801lyo qPCR Probe LyoCakes 2x Master Mix (freeze-dried) 400 reactions á 25 µl, 20x LyoCakes 7980 mypols2020
#9999 2'-O-Me sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 5 µM, 20 µl 4000 mypols2020
#9999 2'-O-Me sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 5 µM, 100 µl 17980 mypols2020
#8801 Isotherm2G DNA polymerase 8000 U, 8U/µl, 1000 µl 6980 mypols2020
#9998 RT-KTQ2 DNA polymerase 5 µM, 20 µl 4000 mypols2020
#9998 RT-KTQ2 DNA polymerase 5 µM, 100 µl 17980 mypols2020
#9997 m6A sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 5 µM, 20 µl 4000 mypols2020
#9997 m6A sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 5 µM, 100 µl 17980 mypols2020
#9601 qPCR GreenDye 2x Master Mix 500 reactions á 25 µl, 5 x 1.25 ml 6000 mypols2020

 

mypols 2201S说明书

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mypols 2201S说明书

mypols 2201S说明书

qPCR Probe LyoBeads pre-dispensed

qPCR探针LyoBeads已预先分配

€99,00

2201S

qPCR探针LyoBeads已预先分配

LyoBeads是即用型，冻干的预混料，呈小球或小球状。

LyoBeads包含：DNA聚合酶，反应缓冲液，dNTP，引物和探针。它们可以在几秒钟内在任何水溶液中复水，这使得反应设置非常简单。仅需添加生物样品。

储存：LyoBeads可以在室温下运输和储存。与其他预混料相比，这提供了更具成本效益的生态分布。

LyoBeads可以预先分配在PCR条，PCR板，试剂盒等中。

LyoBead中已经包含了PCR所需的所有必需成分：一种工程化的DNA聚合酶，一种优化的反应缓冲液和超纯的dNTP。只需要添加引物和探针。包含的DNA聚合酶的热启动配方可防止反应建立过程中的错误扩增。

 

 

工程DNA聚合酶-mypols

发表于由

工程DNA聚合酶-mypols

 

工程DNA聚合酶-mypols

mypols是一家生物技术公司，起源于康斯坦茨大学（University of Konstanz），Andreas Marx教授的研究小组。
自2014年成立以来，我们就提供DNA聚合酶方面的专业知识：我们为您的biotec应用设计，定制，生产和冻干酶。我们专注于开发新一代的DNA聚合酶，用于先进且可靠的应用，例如个性化医学，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医等等。

mypols Isotherm2G说明书

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

€349,00

Isotherm2G是一种嗜温性DNA聚合酶，非常适合等温扩增。它可以从具有高链置换活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突变，以提高反转录活性。在55-70°C之间活跃。Isotherm2G DNA聚合酶是等温扩增反应的优先选择，如环介导的等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），分枝扩增（RAM），基因组扩增等。

 

Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它与足够量的10x反应缓冲液一起使用，该缓冲液已针对等温扩增进行了优化。缓冲液中含3.25 mM镁离子，终浓度为1x。镁，引物和dNTPs的宜浓度在很大程度上取决于所应用的应用，应该对其进行优化。

该产品以冰袋包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

 

mypols Volcano2G说明书

 

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

火山2G DNA聚合酶

Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高级版本，具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种经过工程改造的，极耐热的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，可通过定向的人工进化获得。Volcano2G DNA聚合酶可直接从RNA模板（无需等温逆转录步骤）直接促进“零步骤” RT-PCR，因为逆转录与循环PCR延伸步骤中的DNA扩增同时进行。这也允许在高温下进行逆转录反应，从而将在高温下融化的RNA中强大的二级结构所遇到的问题降至低。

 

Volcano2G DNA聚合酶包含热启动剂配制的，具有逆转录酶活性的工程稳定的热稳定DNA聚合酶和稳健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于适体的热启动剂设计用于在低温下（例如，在移取反应混合物时）阻断非特异性DNA聚合酶活性，但会在高于50-55°C的温度下分解，从而释放出现已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚酶作为5 U / µl甘油库存与适当的5x Volcano反应缓冲液一起运输，该缓冲液针对60-300 bp的扩增子进行了优化。

Volcano2G逆转录酶可以可靠地从≥1 ng的总RNA输入中检测RNA靶标。它不需要Mn 2+即可  获得宜活性。但是，可以通过向反应中添加Mn 2+来进一步优化某些检测方法（建议范围是0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。

 

该产品以凉爽包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

RT-PCR活性：已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可视化为单个扩增产物。

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度由蛋白质特异性染色确定。

 

 

带有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步协议节省时间

跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。 

Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶，非常稳定，在95°C下的半衰期> 40分钟。

灵敏的RNA检测

当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。

来自细胞的直接RT-PCR

对于细胞RNA的可靠RT-PCR，样品制备步骤*。然而，这些步骤费力，费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液，您可以用快速便捷的“零步长”方案代替费力的RNA制备。

节省时间和金钱

VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤”工作流程，使您可以规避费力的纯化和提取步骤，从而节省了时间和金钱。

出色的灵敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA。

 

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

（目前缺货直至另行通知，请提出要求）

 

是一种嗜温DNA聚合酶，它从DNA和RNA模板合成DNA，具有高链置换活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代，具有进一步改善的逆转录活性。宜温度（55-70°C）使Isotherm2G DNA聚合酶成为等温扩增反应的优先选择，如环介导等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），衍生物扩增（RAM），基因组扩增等。

＃8801S

Isotherm2G DNA聚合酶

1600 U，8U /μl，200μl

＃8801M

Isotherm2G DNA聚合酶

8000 U，8U /μl，1000μl

 

等温扩增  

 

就是这么简单：只需在59°C温育30分钟，就可以使用LAMP方法扩增DNA目标（红色曲线）和RNA目标（蓝色曲线）。Isotherm可用于RCA，SDA，RAM，LAMP和许多其他放大技术。

 

 

 

 

 

Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆转录活性。扩增后，可以进行熔解曲线测量以确认特定产物的产生。因此可以进行DNA和RNA检测，从而实现简单的反应设置，快速的反应时间和闭管系统。

 

 

 

应用

  • 快速，等温检测和鉴定DNA和RNA靶标
  • 逆转录
  • 实时等温检测
  • LAMP，SDA，RCA，RAMP
  • 入门扩展

反应设置

零件

卷

终浓度

底漆混合物（各种浓度）

各种μl

各个

dNTPs（10 mM）

1μl

400μM

10 x Isotherm2G反应缓冲液

2.5μl

1X

等温线DNA聚合酶8 U /μl

1μl

8 U /反应

模板/样品提取物

各种μl

 各个

不含核酸酶的水

总反应体积高达25μl

 

将所有组件保存在冰上。
在使用前仔细旋转并混合所有溶液。 

引物混合物和浓度很大程度上取决于所采用的等温反应方法。

Isotherm2G和Isotherm2G反应缓冲液不含荧光染料。对于实时测量，请添加适量的合适染料。

详细的产品说明

 

内容

Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有针对等温扩增优化的10倍反应缓冲液。

 

质量控制

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监测等温线活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

法律信息

某些等温扩增方法可能受到保护。购买此产品不会向购买者传达使用所购产品进行任何商业目的的任何等温扩增方法的合法权利。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。

 

货号

品名

规格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

mypols

7101M 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

mypols

8801S

Isotherm2G DNA polymerase

1600 U, 8U/µl, 200 µl

mypols

8801M

Isotherm2G DNA polymerase

8000 U, 8U/µl, 1000 µl

mypols

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

mypols Volcano3G说明书

发表于由

mypols Volcano3G说明书

mypols Volcano3G说明书

 

  •  

Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

Volcano3G RT-PCR 2x预混液（+ GreenDye，+ ROX）

  • “ myPOLS认为，RT-qPCR应该与qPCR一样简单。要定量DNA还是RNA模板都没有关系。考虑到这一点，我们开发了Volcano3G RT-PCR主混合物。” 

    Volcano3G RT-PCR预混液可通过快速简便的PCR方案扩增RNA或DNA靶序列，甚至包括0步扩增。
    此外，浅蓝色提高了移液步骤中混合物的可见度，尤其是在使用白色或透明孔板时。
    该混合物适用于DNA和RNA模板的qPCR，适用于GreenDye或基于探针的测定。
    所有这些都以可与标准qPCR混合物媲美的高度兼容的价格提供。

    Volcano3G RT-PCR 2x预混液（+ GreenDye，+ ROX）是现成的预混液，可用于所有标准PCR循环仪中的可靠qPCR和RT-PCR。该混合物包含一种稳健的Taq DNA聚合酶和一种具有逆转录酶活性的经过工程改造的热稳定DNA聚合酶的酶混合物。它补充了GreenDye（＃2000），这是一种具有低聚合酶抑制作用的高敏感性DNA结合染料，也可以是高浓度或低浓度的ROX参考染料。这种混合物适用于高分辨率熔解实验。

    也可提供不含ROX参考染料（＃6301）的Volcano3G RT-PCR 2x预混液（+ GreenDye ）。对于基于探针的PCR检测，我们建议使用Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix，该混合物已针对（多重）探针测定进行了优化。也可以在有或没有ROX参考（＃6201，＃6101）的情况下使用。

 

  • Volcano3G RT-PCR 2x预混液包含热启动酶配制的酶混合物，该酶混合物具有逆转录酶活性和稳定的Taq DNA聚合酶，是一种经过工程改造的热稳定DNA聚合酶。将混合物与超纯dNTP，GreenDye（DNA结合染料）和缓冲液成分预混合，以创建可立即使用的2x主混合物，以可靠地检测RNA和DNA靶标。

 

  • 该产品以凉爽包装出售。建议在抵达时将产品存放在-20°C下。

  • RT-PCR活性：已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可视化为单个扩增产物。

    DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。

    RT-PCR再次变得更加容易

    使用Volcano3G RT-PCR预混液，RT-PCR变得更加容易。Volcano3G RT-PCR预混液可通过快速简便的PCR方案扩增RNA靶序列，甚至包括0步扩增。

    出众的表演

    Volcano3G是性能改进的下一代Volcano2G。它为精确，快速的qPCR提供了多种应用。它适用于常见的热循环方案和直接来自RNA的“零步长” RT-PCR方案。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和常见的热RT-PCR方案，可以在10倍稀释系列中检测到人工HPRT1 mRNA。

    灵敏度更高

    Volcano3G显示了对多达500个总拷贝的mRNA检测的改进，这与无模板对照（NTC）明显不同。Volcano 3G Master Mix提供的更明亮的荧光信号使定量分析变得简单而精确。Volcano3G RT-PCR混合物比我们的Volcano2G RT-PCR混合物灵敏度高10倍。在这里，Volcano3G RT-PCR 2x Master混合物检测到人为HPRT1 mRNA低至500拷贝，其中含有敏感的DNA结合染料，聚合酶抑制作用可忽略不计。

    融化您的DNA，而不是您的大脑

    具有GreenDye的Volcano3G RT-PCR 2x预混液适用于高分辨率熔解（HRM）实验，可让您快速识别非特异性扩增子，从而在优化PCR时节省时间和精力。

 

 

 

 

 

mypols 7101说明书

发表于由

myPOLS Biotec是一家来自康斯坦茨大学的生物技术公司，来自Andreas Marx教授的研究小组。凭借我们在高通量DNA聚合酶设计方面的专业知识，我们为您的应用定制酶。

myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的应用，例如个性化医疗，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医学等等。

 

我们的研发活动包括：

  • 改进的DNA聚合酶用于SNP检测和甲基化特异性PCR。
  • 病原体检测分析，例如用于流感和诺如病毒诊断。
  • 具有逆转录酶活性的热稳定DNA聚合酶。
  • 抑制剂抗性聚合酶，用于从样品中直接PCR，如全血，唾液，细菌，细胞 – 颗粒，植物等。 

后但并非不重要：我们所有的酶和混合物都是在康斯坦茨内部生产的，并经过常规测试，符合高质量标准。

 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix

Article

Product

Size

#7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

#7101M

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

 

该混合物专门针对直接从电池应用进行了优化。

省略耗时且昂贵的RNA纯化。VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix使您能够直接从细胞悬液或细胞裂解液中定量和检测RNA，无需纯化步骤。只需将细胞分离，将细胞悬浮液直接添加到RT-PCR反应混合物中，放入实时仪器中，然后启动。

任选地，使用裂解缓冲液直接在孔或烧瓶中裂解细胞，简单地旋转并将上清液直接加入到RT-PCR混合物中。 – 准备好了。

裂解物也可以冷冻并储存在-20℃。

 

应用

  • 使用引物/探针或实时PCR染料直接从细胞RNA检测和定量
  • 每个样品100-10.000个细胞的基因表达分析。
  • 适用于多种细胞类型

VolcanoCell2G可以直接从细胞中进行灵敏的RNA检测：  

一个）

 

b）

 

图1. 直接来自细胞RT-qPCR的0步骤

a）直接来自细胞RT-qPCR的0步骤的工作流程比2步骤标准RT-qPCR更容易和更快。b）从Lund人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA，其根据VolcanoCell2G方案（包括单独的裂解缓冲液）重悬浮。

反应设置

零件

卷

终浓度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix

12.5μl

1X

引物前移（10μM）*

1μl

0.4μM（0.05-1μM）

引物反向（10μM）*

1μl

0.4μM（0.05-1μM）

探针（10μM）

1μl

0.4μM（0.05-1μM）

模板**：

细胞悬浮液（无核酸酶水）***

要么

细胞裂解液（在1x裂解缓冲液中）***

1 – 

9.5μl2.5μl

<10.000个细胞/反应

<10.000个细胞/反应

不含核酸酶的水

总反应体积高达25μl

 

将所有组件保存在冰上。
在使用前仔细旋转并混合所有溶液。

*请注意，Volcano RT-PCR混合物是从DNA和RNA模板扩增的，因此必须使用仅与外显子 – 外显子连接结合的RNA选择性引物。

**建议的细胞数是悬浮在无核酸酶水或1x VolcanoCell2G裂解缓冲液中的10-10,000个细胞。细胞悬浮液应按照随附手册的“方法”部分的建议进行新鲜制备。

***细胞培养的模板可直接通过在无核酸酶水中稀释细胞沉淀（产品手册的METHODS部分中的方案1）或通过用1x VolcanoCell2G裂解缓冲液裂解孔或管中的细胞来制备（方案2）在产品手册的METHODS部分中，当需要从不同的孔（例如：在微量滴定板上）制备RT-PCR反应时，这对于高通量测定可能更有用。

 

 

典型的0步RT-PCR方案（不需要等温逆转录步骤）

步

温度

时间

初始变性

95℃

3分钟

变性

95℃

15秒

退火/延伸*

55-75℃下

60秒（25-40周期）

保持

<10℃

保持

*通常，退火温度比所用引物的计算熔融温度低约3-5℃。通过运行温度梯度理想地建立新的PCR，以便找到每个引物对的宜退火/延伸温度。还可以应用三步协议，具有单独的退火和延伸步骤。

详细的产品说明

该试剂盒包含一种工程化，极热稳定的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，包括一个特别优化的缓冲系统，只需要少量细胞（100到10,000个细胞）。套件中还包含单独的裂解缓冲液。

所包含的Volcano2G DNA聚合酶通过多代定向人工进化而设计，并且在95℃下的半衰期> 40分钟。它直接从细胞悬浮液或裂解物中促进“零步”RT-PCR，无需等温逆转录步骤。

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix包含所有标准实时循环仪器中成功可靠的RT-PCR所需的所有组分，并且与常见的RT-PCR检测方法兼容，如荧光实时PCR染料或荧光探针。

推荐的扩增子大小应在60-300 bp之间。


请注意，必须使用跨越外显子 – 外显子连接的引物，以限制仅对mRNA靶标的扩增。

通过避免昂贵，耗时的细胞裂解或RNA纯化，VolcanoCell试剂盒是高通量应用，RNAi敲除或基因表达实验的理想选择。预先准备好的2x混合物可确保可重复的RT-PCR结果，显着缩短设置时间和移液错误的风险。只需添加引物和模板。用包含的裂解缓冲液可以容易地制备细胞裂解物。但是，扩增子的大小宜在60-300 bp之间！

 

产品的成分/含量

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix含有工程DNA聚合酶，在具有dNTP的应用优化缓冲系统中具有逆转录活性。还包括单独的裂解缓冲液。

 

质量控制

RT-PCR活性：测试VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix的成功RT-PCR性能。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物扩增151bp片段（HPRT1 mRNA），并将其显示为单一扩增产物。

DNA聚合酶活性：已经使用人工DNA模板和DNA引物监测Volcano2G聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。通过以等分试样存储来小化冻融循环的次数。对于日常使用，我们建议将等分试样保持在4°C。

 

参考

Chovancova，P.，Merk，V.，Marx，A.，Leist，M.，Kranaster，R。（2017）反向转录定量PCR直接来自没有RNA提取且没有等温逆转录的细胞：'零步'RT-qPCR协议。Biol Methods Protoc（2017）2（1）：bpx008。doi：https：//doi.org/10.1093/biomethods/bpx008

 

Blatter，N.，Bergen，K.，Nolte，O.，Welte，W.，Diederichs，K.，Mayer，J.，Wieland，M。和Marx，A。（2013），RNA的结构和功能 – 阅读耐热DNA聚合酶。Angew。化学。诠释。Ed。，52：11935-11939。DOI：10.1002 / anie.20130665。

 

Kranaster，R.，Drum，M.，Engel，N.，Weidmann，M.，Hufert，FT和Marx，A。（2010），一步RNA病原体检测，具有逆转录酶活性的突变热稳定Thermus aquaticus DNA聚合酶。Biotechnology Journal，5：224-231。DOI：10.1002 / biot.200900200。

货号

品名

规格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

mypols

7101M 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

mypols

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

myPOLS 6101S说明书

发表于由

myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的应用，例如个性化医疗，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医学等等。

 

我们的研发活动包括：

  • 改进的DNA聚合酶用于SNP检测和甲基化特异性PCR。
  • 病原体检测分析，例如用于流感和诺如病毒诊断。
  • 具有逆转录酶活性的热稳定DNA聚合酶。
  • 抑制剂抗性聚合酶，用于从样品中直接PCR，如全血，唾液，细菌，细胞 – 颗粒，植物等。 

 

 

后但并非不重要：我们所有的酶和混合物都是在康斯坦茨内部生产的，并经过常规测试，符合高质量标准。

 

myPOLS Biotec是一家来自康斯坦茨大学的生物技术公司，来自Andreas Marx教授的研究小组。凭借我们在高通量DNA聚合酶设计方面的专业知识，我们为您的应用定制酶。

 

Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100次反应á25μl

1 x 1.25毫升

＃6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500次反应á25μl

5 x 1.25毫升

＃6201S

Volcano3G RT-PCR探针2x Master Mix（+ ROX）

100次反应á25μl

1 x 1.25毫升

＃6301S

Volcano3G RT-PCR探针2x Master Mix（+ GreenDye）

100次反应á25μl

1 x 1.25毫升

 ＃6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix（+ GreenDye，+ ROX）

100次反应á25μl

1 x 1.25毫升

包含所有必需的组分，包括dNTP和优化的反应缓冲液，可在所有标准PCR循环仪中实现成功可靠的实时qPCR和RT-qPCR。包含的酶由我们的*表现，热启动配方，工程Taq DNA聚合酶和Volcano3G DNA聚合酶的混合物组成。该混合物被设计成适合多重PCR，病原体检测qPCR和各种基于探针的DNA和RNA靶标的qPCR。 

包含的Volcano3G DNA聚合酶是一种工程化的，极其热稳定的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，通过定向的人工进化获得。基于适体的DNA聚合酶的热启动制剂防止错误扩增。高于50°-55°C的温度会使适体的二级结构熔化并使聚合酶释放。 

 

 应用

  • 快速检测和鉴定RNA和DNA靶标
  • 逆转录qPCRs（RT-qPCRs）
  • qPCRs（DNA或RNA目标）
  • 多重PCR
  • 实时PCR
  • 基于探针的PCR
  • 病原体检测
  • 入门扩展 
  • 终点PCR
  • 筛选/高通量PCR
  • SELEX

典型的RT-PCR方案

步

温度

时间

初始变性步骤

80℃下

60秒

逆转录步骤*

50℃下

600秒

PCR循环：

 

 

变性

95℃

10秒

退火/延伸**

各种*

50秒（35-50周期）

可以使用两步法和三步法PCR方案。

* = Volcano3G DNA聚合酶允许直接来自RNA模板的“零步”RT-PCR（没有等温逆转录步骤），因为逆转录也在循环PCR延伸步骤期间与DNA扩增同时发生。因此，逆转录步骤是任选的，并且在某些情况下可以省略。

** =通过运行温度梯度理想地建立新的RT-PCR，以便找到每个引物对的*逆转录/退火/延伸温度。引物的退火温度受其核酸序列和反应缓冲液组成（盐和pH）的强烈影响。

通常，Volcano3G DNA聚合酶是*热稳定的，并且在55-95°C之间活跃。

反应设置

使用的实验建议：

在退火/延伸步骤中使用温度梯度进行PCR，以找到测定的宜温度。

大多数RT-PCR分析在短时间80℃（1分钟）变性步骤和50-55℃（10分钟）的逆转录步骤以及标准PCR循环条件下都能很好地起作用。

 

建议的反应设置 

零件

卷

终浓度

引物前移（10μM）

1.0μl

500 nM（50-1000 nM）

引物反向（10μM）

1.0μl

500 nM（50-1000 nM）

探针（10μM）

 xμl

50 – 1000 nM

Volcano3G RT-PCR 2x Master Mix

10μl

1X

模板/样品提取物*

 yμl

 

 不含核酸酶的水

 总反应体积高达20μl

 

* =推荐的模板浓度在0.004ng /μl-0.1μg/μl（总RNA或基因组DNA）之间。

 

在使用前仔细旋转并混合所有溶液。

质量控制

RT-PCR活性：测试Volcano3G RT-PCR Mix的成功RT-PCR性能。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物扩增151bp片段（HPRT1 mRNA），并将其显示为单个扩增产物。
DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监测Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度通过蛋白质特异性染色确定。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。
通过以等分试样存储来小化冻融循环的次数。对于日常使用，我们建议将等分试样保持在4°C。

 

 

Volcano3G是否具有RNAse-H样活性？

Volcano3G来自Taq DNA聚合酶，因此它没有任何RNase-H活性。在循环PCR延伸步骤期间，逆转录与DNA扩增同时发生。

然而，Volcano3G具有核酸酶结构域作为Taq野生型酶，可用于基于水解的实时PCR。 

 

我怎样才能将扩增限制在mRNA靶标上？

我只获得引物二聚体。如何建立我的RT-PCR？

我可以用Volcano逆转录长RNA链（> 500 bp）吗？

我在琼脂糖凝胶上看到一个低分子带 – 这是Volcano3G RT PCR Mix的污染吗？

 

 

货号

品名

规格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

 

＃

    

 

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

mypols Isotherm2G说明书

发表于由

mypols Isotherm2G说明书

 

 

mypols Isotherm2G说明书

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

€349,00

Isotherm2G是一种嗜温性DNA聚合酶，非常适合等温扩增。它可以从具有高链置换活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突变，以提高反转录活性。在55-70°C之间活跃。Isotherm2G DNA聚合酶是等温扩增反应的优先选择，如环介导的等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），分枝扩增（RAM），基因组扩增等。

 

Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它与足够量的10x反应缓冲液一起使用，该缓冲液已针对等温扩增进行了优化。缓冲液中含3.25 mM镁离子，终浓度为1x。镁，引物和dNTPs的宜浓度在很大程度上取决于所应用的应用，应该对其进行优化。

 

该产品以冰袋包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

mypols Volcano2G说明书

发表于由

mypols Volcano2G说明书

工程DNA聚合酶-来自博登湖 

mypols是一家生物技术公司，起源于康斯坦茨大学（University of Konstanz），Andreas Marx教授的研究小组。
自2014年成立以来，我们就提供DNA聚合酶方面的专业知识：我们为您的biotec应用设计，定制，生产和冻干酶。我们专注于开发新一代的DNA聚合酶，用于先进且可靠的应用，例如个性化医学，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医等等。

mypols Volcano2G说明书

 

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

火山2G DNA聚合酶

Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高级版本，具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种经过工程改造的，极耐热的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，可通过定向的人工进化获得。Volcano2G DNA聚合酶可直接从RNA模板（无需等温逆转录步骤）直接促进“零步骤” RT-PCR，因为逆转录与循环PCR延伸步骤中的DNA扩增同时进行。这也允许在高温下进行逆转录反应，从而将在高温下融化的RNA中强大的二级结构所遇到的问题降至低。

 

Volcano2G DNA聚合酶包含热启动剂配制的，具有逆转录酶活性的工程稳定的热稳定DNA聚合酶和稳健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于适体的热启动剂设计用于在低温下（例如，在移取反应混合物时）阻断非特异性DNA聚合酶活性，但会在高于50-55°C的温度下分解，从而释放出现已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚酶作为5 U / µl甘油库存与适当的5x Volcano反应缓冲液一起运输，该缓冲液针对60-300 bp的扩增子进行了优化。

Volcano2G逆转录酶可以可靠地从≥1 ng的总RNA输入中检测RNA靶标。它不需要Mn 2+即可  获得宜活性。但是，可以通过向反应中添加Mn 2+来进一步优化某些检测方法（建议范围是0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。

 

该产品以凉爽包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

RT-PCR活性：已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可视化为单个扩增产物。

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度由蛋白质特异性染色确定。

 

 

带有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步协议节省时间

跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。 

Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶，非常稳定，在95°C下的半衰期> 40分钟。

灵敏的RNA检测

当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。

来自细胞的直接RT-PCR

对于细胞RNA的可靠RT-PCR，样品制备步骤*。然而，这些步骤费力，费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液，您可以用快速便捷的“零步长”方案代替费力的RNA制备。

节省时间和金钱

VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤”工作流程，使您可以规避费力的纯化和提取步骤，从而节省了时间和金钱。

出色的灵敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA。

 

 

 

 

 

myPOLS Biotec Isotherm2G DNA聚合酶说明书

发表于由

myPOLS Biotec Isotherm2G DNA聚合酶说明书

myPOLS Biotec是一家来自康斯坦茨大学的生物技术公司，来自Andreas Marx教授的研究小组。凭借我们在高通量DNA聚合酶设计方面的专业知识，我们为您的应用定制酶。

myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的应用，例如个性化医疗，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医学等等。

 

我们的研发活动包括：

  • 改进的DNA聚合酶用于SNP检测和甲基化特异性PCR。
  • 病原体检测分析，例如用于流感和诺如病毒诊断。
  • 具有逆转录酶活性的热稳定DNA聚合酶。
  • 抑制剂抗性聚合酶，用于从样品中直接PCR，如全血，唾液，细菌，细胞 – 颗粒，植物等。 

后但并非不重要：我们所有的酶和混合物都是在康斯坦茨内部生产的，并经过常规测试，符合高质量标准。

 

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

（目前缺货直至另行通知，请提出要求）

 

是一种嗜温DNA聚合酶，它从DNA和RNA模板合成DNA，具有高链置换活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代，具有进一步改善的逆转录活性。宜温度（55-70°C）使Isotherm2G DNA聚合酶成为等温扩增反应的优先选择，如环介导等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），衍生物扩增（RAM），基因组扩增等。

＃8801S

Isotherm2G DNA聚合酶

1600 U，8U /μl，200μl

＃8801M

Isotherm2G DNA聚合酶

8000 U，8U /μl，1000μl

 

等温扩增  

 

就是这么简单：只需在59°C温育30分钟，就可以使用LAMP方法扩增DNA目标（红色曲线）和RNA目标（蓝色曲线）。Isotherm可用于RCA，SDA，RAM，LAMP和许多其他放大技术。

 

 

 

 

 

Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆转录活性。扩增后，可以进行熔解曲线测量以确认特定产物的产生。因此可以进行DNA和RNA检测，从而实现简单的反应设置，快速的反应时间和闭管系统。

 

 

 

应用

  • 快速，等温检测和鉴定DNA和RNA靶标
  • 逆转录
  • 实时等温检测
  • LAMP，SDA，RCA，RAMP
  • 入门扩展

反应设置

零件

卷

终浓度

底漆混合物（各种浓度）

各种μl

各个

dNTPs（10 mM）

1μl

400μM

10 x Isotherm2G反应缓冲液

2.5μl

1X

等温线DNA聚合酶8 U /μl

1μl

8 U /反应

模板/样品提取物

各种μl

 各个

不含核酸酶的水

总反应体积高达25μl

 

将所有组件保存在冰上。
在使用前仔细旋转并混合所有溶液。 

引物混合物和浓度很大程度上取决于所采用的等温反应方法。

Isotherm2G和Isotherm2G反应缓冲液不含荧光染料。对于实时测量，请添加适量的合适染料。

详细的产品说明

 

内容

Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有针对等温扩增优化的10倍反应缓冲液。

 

质量控制

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监测等温线活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

法律信息

某些等温扩增方法可能受到保护。购买此产品不会向购买者传达使用所购产品进行任何商业目的的任何等温扩增方法的合法权利。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。

 

货号

品名

规格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

mypols

7101M 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

mypols

8801S

Isotherm2G DNA polymerase

1600 U, 8U/µl, 200 µl

mypols

8801M

Isotherm2G DNA polymerase

8000 U, 8U/µl, 1000 µl

mypols

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

myPOLS Volcano2G DNA聚合酶说明书

发表于由

myPOLS Volcano2G DNA聚合酶说明书

myPOLS Biotec正在开发新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的应用，例如个性化医疗，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医学等等。

 

我们的研发活动包括：

  • 改进的DNA聚合酶用于SNP检测和甲基化特异性PCR。
  • 病原体检测分析，例如用于流感和诺如病毒诊断。
  • 具有逆转录酶活性的热稳定DNA聚合酶。
  • 抑制剂抗性聚合酶，用于从样品中直接PCR，如全血，唾液，细菌，细胞 – 颗粒，植物等。 

 

 

后但并非不重要：我们所有的酶和混合物都是在康斯坦茨内部生产的，并经过常规测试，符合高质量标准。

 

myPOLS Biotec是一家来自康斯坦茨大学的生物技术公司，来自Andreas Marx教授的研究小组。凭借我们在高通量DNA聚合酶设计方面的专业知识，我们为您的应用定制酶。

RRNA / RT-PCR

Volcano2G DNA聚合酶

 

是原始Volcano DNA聚合酶的下一代，具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种工程化的，极其热稳定的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，通过定向的人工进化获得。
Volcano2G DNA聚合酶直接从RNA模板促进“零步骤”RT-PCR（没有等温逆转录步骤），因为在循环PCR延伸步骤期间逆转录与DNA扩增同时发生。这也允许在高温下进行逆转录反应，从而小化在高温下熔化的RNA中的强二级结构遇到的问题。

 

文章

产品

尺寸

＃8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

＃8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

 

更简单，更快捷：0步RT-PCR协议：

 

 

跳过逆转录步骤。不需要等温反转录步骤。 

Volcano2G是一种PCR活性逆转录酶，具有*的热稳定性，在95°C的半衰期> 40 min。

当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，因此也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR测定和零步骤RT-PCR方案，使用10倍稀释系列的总RNA检测NONO mRNA：

 

 

 

详细的产品说明

Volcano2G 5x反应缓冲液针对扩增子大小在60-300bp之间进行了优化。

当添加合适的实时PCR染料或荧光探针时，Volcano2G逆转录酶也可用于实时PCR。
这种*的酶能够进行基于PCR的RNA检测，无需单独的逆转录步骤。
Volcano2G逆转录酶可以可靠地检测≥1ng总RNA输入的RNA靶标。

Volcano2G DNA聚合酶不需要Mn 2+  以获得宜活性。然而，通过向反应中添加Mn 2+可以进一步优化一些测定（建议的范围是0.5-1mM，未提供Mn 2+）。

 

质量控制

RT-PCR活性：测试Volcano2G DNA聚合酶活性的成功RT-PCR性能。在PCR循环仪中从人总RNA提取物扩增151bp片段（HPRT1 mRNA），并将其显示为单一扩增产物。
DNA聚合酶活性：已经使用人工DNA模板和DNA引物监测Volcano2G聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。

应用

  • 快速检测和鉴定RNA靶标
  • 逆转录PCR（RT-PCR）
  • 实时RT-PCR
  • SELEX
  • 入门扩展

 

反应设置

零件

卷

终浓度

引物前移（10μM）

1μl

500 nM（50-1000 nM）

引物反向（10μM）

1μl

500 nM（50-1000 nM）

dNTPs（10 mM）

2μl

400μM

5 x Volcano缓冲区

10μl

1X

Volcano2G DNA聚合酶5 U /μl

1μl

5-10 U /反应

模板/样品提取物*

各种μl

 >（1-1000）

不含核酸酶的水

总反应体积高达50μl

 

将所有组件保存在冰上。
在使用前仔细旋转并混合所有溶液。

*推荐的终模板浓度在5-50 ng /μl之间。 

典型的0步RT-PCR方案（不需要等温逆转录步骤）

步

温度

时间

初始变性

95℃

2分钟

变性

95℃

15秒

退火/延伸*

各种*

45秒（25-40周期）

可选的熔化步骤

 

 

可以使用两步法和三步法PCR方案。
*通过运行温度梯度来理想地建立新的PCR，以便找到每个引物对的宜退火/延伸温度。引物的退火温度受其核酸序列和反应缓冲液组成（盐和pH）的强烈影响。Volcano2G DNA聚合酶在50-95°C之间活跃。

 

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

mypols2022年价格表

发表于由

上海金畔生物mypols2022年价格表

mypols是一家生物技术公司，起源于康斯坦茨大学（University of Konstanz），Andreas Marx教授的研究小组。
自2014年成立以来，我们就提供DNA聚合酶方面的专业知识：我们为您的biotec应用设计，定制，生产和冻干酶。我们专注于开发新一代的DNA聚合酶，用于先进且可靠的应用，例如个性化医学，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医等等。

mypols #2000说明书

2'-O-Me sensitive RT-KTQ DNA Polymerase Mutant

2'-O-Me 敏感的 RT-KTQ DNA 聚合酶突变体

对分析 DNA 或 RNA 修饰感兴趣？然后，这种 DNA 聚合酶可以简化您对此类修饰的位点特异性分析。对 2'- O -Me 敏感的 DNA 聚合酶进行了工程改造，可催化 DNA 和 RNA 的 DNA 合成，并通过实时 PCR 定量从 RNA 位点特异性地核苷酸的2'- O -甲基化。

2'- O -Me 敏感 DNA 聚合酶以含有甘油的 5 µM 溶液形式提供，并与 10x 反应缓冲液一起提供。 

当添加合适的染料时，该酶还可用于实时循环，例如 GreenDye (#2000)

mypols2022年价格表

货号 品名 规格 价格 品牌
#9001-250units HiDi® DNA polymerase 250units 1580  mypols
#9201-250units HiDi® Taq DNA polymerase 250units 1580  mypols
#9997-20µl m6A sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 20µl 4000  mypols
MX1101-500units MedixMDx Fast Taq Polymerase 500units 1440  mypols
MX1102-250units MedixMDx HS Taq DNA Polymerase 250units 1860  mypols
MX1103-100units MedixMDx HS HiFi DNA Polymerase 100units 1700  mypols
MX1104-10'000units MedixMDx HighScript Reverse Transcriptase 10'000units 2760  mypols
MX1105-2500units MedxiMDx RNase Inhibitor 2500units 1700  mypols
MX1106-1600units MedixMDx Fast Bst Polymerase 1600units 1560  mypols
MX1107-1600units MedixMDx Fast Bst Polymerase with Fluorescence 8U/uL 1600units 1900  mypols
#9999-20µl 2'-O-Me sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 20µl 4000  mypols
#6500-100reactions RevTaq RT-PCR DNA polymerase 100reactions 1800  mypols
#9998-20µl RT-KTQ2 DNA polymerase 20µl 4000  mypols
#1101-400units Taq hotstart DNA polymerase 400units 1300  mypols
#9101-100reactions HiDi® 2x PCR Master Mix 100reactions 1600  mypols
#4200-100reactions HiDi® Taq 2x PCR Master Mix 100reactions 1600  mypols
MX2101-100reactions MedixMDx qGreen Mix Separate-ROX 100reactions 840  mypols
MX2102-100reactions MedixMDx qProbe Mix Separate-ROX 100reactions 840  mypols
MX2103-100reactions MedixMDx qRT-Probe Mix No-ROX 100reactions 1820  mypols
MX2104-100reactions MedixMDx qRT-Probe Mix Separate-ROX 100reactions 1820  mypols
MX2105-200reactions MedixMDx HiPlex qRT-Probe Mix No-ROX 200reactions 3400  mypols
MX2106-100reactions MedixMDx Fast Bst Mix 100reactions 4040  mypols
MX2107-100reactions MedixMDx Fast Bst RT Mix 100reactions 5060  mypols
MX6101-5mL MedixMDx qPCR lyo ready mix 5mL 5000  mypols
MX6102-5mL MedixMDx qRT-PCR lyo ready mix 5mL 10000  mypols
#4000-100reactions PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 100reactions 1700  mypols
#2201-96reactions qPCR Probe LyoBeads, pre-dispensed in separable 96x PCR well-plate 96reactions 1980  mypols
#9801lyo-80reactions qPCR Probe 2 x LyoCake Master Mix (freeze-dried) 80reactions 1980  mypols
#2001-500reactions Taq 2x PCR Master Mix 500reactions 4200  mypols
#6101-100reactions Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix 100reactions 2000  mypols
#6101CE-100reactions Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix IVD 100reactions #VALUE! mypols
#6201-100reactions Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX) 100reactions 2000  mypols
#6301-100reactions Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye) 100reactions 2000  mypols
#6401-100reactions Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX) 100reactions 2000  mypols
#5000-100reactions DirectBlood Genotyping PCR Kit 100reactions 3980  mypols
#6901-100reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit 100reactions 7800  mypols
#6901CE-100reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit IVD 100reactions 9900  mypols
MX5101-100reactions MedixMDx Library Quant Kit for Illumina® Separate-ROX 100reactions 2560  mypols
#2000-200reactions GreenDye 20x 200reactions #VALUE! mypols
MX4501-100-4x100mM dNTP Sets (100 mM solution) 4x100mM 3540  mypols
MX4502-25-25mMeach dNTP Mixes – 25 mM each (100 mM total) 25mMeach 880  mypols
MX4503-100-100mM dUTP (100 mM) 100mM 1320  mypols
MX71031-1mg MedixMDx Anti-Taq Polymerase mAb (Clone MC1101) 1mg 5820  mypols
#9001-1000units HiDi® DNA polymerase 1000units 5600  mypols
#9201-1000units HiDi® Taq DNA polymerase 1000units 5600  mypols
#9997-100µl m6A sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 100µl 17980  mypols
MX1103-500units MedixMDx HS HiFi DNA Polymerase 500units 8180  mypols
MX1104-40'000units MedixMDx HighScript Reverse Transcriptase 40'000units 9940  mypols
MX1106-8000units MedixMDx Fast Bst Polymerase 8000units 6180  mypols
MX1107-8000units MedixMDx Fast Bst Polymerase with Fluorescence 8U/uL 8000units 7160  mypols
#9999-100µl 2'-O-Me sensitive RT-KTQ DNA polymerase mutant 100µl 17980  mypols
#6500-500reactions RevTaq RT-PCR DNA polymerase 500reactions 8000  mypols
#9998-100µl RT-KTQ2 DNA polymerase 100µl 17980  mypols
#1101-4000units Taq hotstart DNA polymerase 4000units 10400  mypols
#9101-500reactions HiDi® 2x PCR Master Mix 500reactions 7200  mypols
#4200-500reactions HiDi® Taq 2x PCR Master Mix 500reactions 7200  mypols
MX2101-500reactions MedixMDx qGreen Mix Separate-ROX 500reactions 3980  mypols
MX2102-500reactions MedixMDx qProbe Mix Separate-ROX 500reactions 3980  mypols
MX2103-500reactions MedixMDx qRT-Probe Mix No-ROX 500reactions 6140  mypols
MX2104-500reactions MedixMDx qRT-Probe Mix Separate-ROX 500reactions 6140  mypols
MX2105-600reactions MedixMDx HiPlex qRT-Probe Mix No-ROX 600reactions 9380  mypols
MX2106-500reactions MedixMDx Fast Bst Mix 500reactions 16220  mypols
MX2107-500reactions MedixMDx Fast Bst RT Mix 500reactions 20300  mypols
MX6101-100mL MedixMDx qPCR lyo ready mix 100mL 90000  mypols
MX6102-100mL MedixMDx qRT-PCR lyo ready mix 100mL 18000  mypols
#4000-500reactions PlexTaq® 5x qPCR Multiplex Master Mix 500reactions 7800  mypols
#2201-5x96reactions qPCR Probe LyoBeads, pre-dispensed in separable 96x PCR well-plate 5x96reactions 8980  mypols
#9801lyo-400reactions qPCR Probe 2 x LyoCake Master Mix (freeze-dried) 400reactions 7980  mypols
#6101-500reactions Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix 500reactions 9000  mypols
#6201-500reactions Volcano3G® RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX) 500reactions 9000  mypols
#6301-500reactions Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye) 500reactions 9000  mypols
#6401-500reactions Volcano3G® RT-PCR 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX) 500reactions 9000  mypols
#5000-500reactions DirectBlood Genotyping PCR Kit 500reactions 17980  mypols
#6901-500reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit 500reactions #VALUE! mypols
#6901CE-500reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit IVD 500reactions #VALUE! mypols
MX5101-500reactions MedixMDx Library Quant Kit for Illumina® Separate-ROX 500reactions 10760  mypols
#2000-800reactions GreenDye 20x 800reactions 3100  mypols
MX71031-5mg MedixMDx Anti-Taq Polymerase mAb (Clone MC1101) 5mg 25460  mypols
#6901-1000reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit 1000reactions 64800  mypols
#6901CE-1000reactions Volcano3G® Direct COVID19 Kit IVD 1000reactions 79600  mypols