mirusbio MIR 5404说明书

mirusbio MIR 5404说明书

 

 

mirusbio MIR 5404说明书

TransIT®-2020 Transfection Reagent

A high performance, animal-free, broad spectrum DNA transfection reagent

0.4 mlMIR 5400

1 mlMIR 5405

5 x 1 mlMIR 5406

10 x 1 ml

Catalog number selected: MIR 5404

  • 广谱DNA传递 – 在许多细胞类型中实现高表达,包括难以转染的细胞系和原代细胞
  • 对细胞温和 – 平衡高效核酸传递和低细胞毒性  
  • 无动物起源 –高度性能,大兼容性

附加信息

新!为什么用毒性影响转染结果?
新!干细胞应用的
 IT®-2020的高滴度的病毒生产
的细胞类型使用成功转染 IT®-2020:细胞系(PDF) | 原代或干细胞(PDF)

 

数字和数据

 

 IT®-2020试剂表现出更高的表达和较低的细胞毒性相对于其他转染试剂。使用荧光素酶表达质粒,使用的试剂,以每个条形下方指示的试剂与DNA的比例,用荧光素酶表达质粒转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。每孔使用0.1 µg质粒DNA在96孔板中进行转染。在转染后24小时测量荧光素酶表达(柱状图)和乳酸脱氢酶(LDH)水平(线状图)。与单独的细胞相比,LDH水平以细胞毒性百分比表示,并使用市售比色法进行测量;在图上,所有等于或小于零的值都表示为零。误差棒代表一式三份孔的标准偏差。

 

高性能质粒转染。初级人小上皮细胞(HSAEpic)用转染 IT®-2020和EGFP表达质粒(4:1试剂对DNA比)。转染后24小时使用Zeiss axiovert倒置荧光显微镜拍摄图像。

 

 

广泛的细胞类型中的基因表达。根据行业*的测试方案,将的细胞类型用荧光素酶表达质粒(0.1 µg /孔)转染到96孔板中。试剂的DNA比对每种细胞类型进行了优化:反式 IT®-2020(Mirus公司生物,2:1或3:1),FuGENE®HD转(罗氏,3.5:1),Lipofectamine®2000(Life Technologies公司,1.5:1 ,3:1或5:1)。转染后24小时测量荧光素酶活性。将值标准化为Trans IT-2020,并以萤光素酶表达的百分比表示。FuGENE®是Fugent LLC的注册商标。Lipofectamine®是Life Technologie

 

技术指标

储存条件:
所有配置:储存在-20°C 

产品保证:
所有配置: 1年
 

技术产品文献

完整协议

 IT®-2020全染方案(PDF)

快速参考协议

 IT®-2020快速参考协议(PDF)

安全数据表

 IT®-2020 SDS (PDF)

优化协议

DNA转染的优化方案(PDF)

 

 

 

 

 

 

pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative

 

pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative

型号 载体名称 出品公司 载体用途
VGI0404 pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative Invitrogen Gateway系统

Comments for:

CMV promoter:

attB1 site:

EmGFP:

EmGFP forward sequencing primer site:

5’ miR flanking region:

miR-neg control:

3’ miR flanking region:

attB2 site (c):

miRNA reverse sequencing primer site (c):

TK polyadenylation signal:

f1 origin:

SV40 early promoter and origin:

EM7 promoter:

Blasticidin resistance gene:

SV40 polyadenylation signal:

pUC origin (c):

Spectinomycin resistance gene (c):

Spect ni omycin

5’ miR flanking

 region attB1 EmGFP attB2

pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR-neg

control plasmid

5759 nucleotides

1 – 588

680 – 704

713 – 1432

1409 – 1428

1492 – 1518

1519 – 1578

1579 – 1623

1652 – 1676

1667 – 1686

1705 – 1976

2088 – 2516

2543 – 2851

2906 – 2972

2973 – 3371

3529 – 3659

3797 – 4470

4540 – 5550

质粒图谱: