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Fast Pfu DNA 聚合酶

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Fast Pfu DNA 聚合酶

简要描述：Fast Pfu DNA 聚合酶

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E031-01A 250U 含dNTP 360元
E031-01B A包装×5 含dNTP 1620元
E031-02A 250U 不含dNTP  310元
E031-02B A包装×5 不含dNTP  1395元

 

· 制品内容 （250 U）

Fast Pfu DNA聚合酶（5 U/μl） 50 μl
dNTP 混合液 （各10 mM） 250 μl
5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+ 2000 μl

 

· 制品说明
Pfu DNA聚合酶为zui常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（0.5kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的以上缺点，SinoBio采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。

· 用 途
用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等（参见 SinoBio 实验方案）。

· 产品特点
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
*配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

· 质量保证
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议

Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3’端”A”突出， 其PCR产物的克隆有两种方案：
1.PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见 Sinobio 实验方案）。
2.将产物3’末端加A后再与T-Vector连接（参见 SinoBio 实验方案）。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为 20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解， 尽量在冰上配置反应体系，并zui后加入Fast Pfu酶。。

· 相关图片

 

· 其他说明

 

Luxol Fast Blue髓鞘染色液（伊红法）,索莱宝,G3240-3×50ml

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上海金畔生物科技有限公司提供Luxol Fast Blue髓鞘染色液（伊红法）,索莱宝,G3240-3×50ml，可以访问官网了解更多产品信息。
Luxol Fast Blue髓鞘染色液（伊红法）,索莱宝,G3240-3×50ml

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索莱宝

·  英文名称 : Luxol Fast Blue/Eosin Stain Kit

·  储存条件 : 室温,12个月

·  单位 : 瓶

 

髓鞘（myelin sheath）是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。
      很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义，例如神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。

浓度
规格 3×50ml
保存 室温,12个月

固绿染色液(Fast Green Stain，0.5%),索莱宝,G1661-100ml

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索莱宝

·  储存条件 : 室温,避光,6个月

·  单位 : 瓶

·  货期 : 2-3天

 

固绿(Fast Green FCF)又称坚牢绿FCF或快绿, 属于酸性染料，能染色含有浆质的纤维素细胞组织，在染细胞和植物组织上应用极广，是植物组织学最常用的染料之一。它常与番红O联合用于显示软骨，其原理是基于阳离子染料粘多糖中阴离子基团的结合，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。该试剂亦用于植物标本染色等。

浓度
规格 100ml
保存 室温,避光,6个月

固绿染色液(Fast Green Stain，0.1%),索莱宝,G1660-100ml

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固绿染色液(Fast Green Stain，0.1%),索莱宝,G1660-100ml

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索莱宝

·  储存条件 : 室温,避光,6个月

·  单位 : 瓶

·  货期 : 2-3天

 

细胞和植物组织的染色,使用参考–改良番红O-固绿软骨染色试剂盒。

浓度
规格 100ml
保存 室温,避光,6个月

Luxol Fast Blue染色液,索莱宝,G3242-50ml

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Luxol Fast Blue染色液,索莱宝,G3242-50ml

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索莱宝

·  英文名称 : Luxol Fast Blue Stain solution

·  储存条件 : 室温,避光,12个月

·  单位 : 瓶

·  货期 : 2-3天

 

髓鞘（myelin sheath）是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。
      很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义，例如神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。

浓度
规格 50ml
保存 室温,避光,12个月

Luxol Fast Blue 髓鞘染色液（焦油紫法）,索莱宝,G3245-3x50ml

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上海金畔生物科技有限公司提供Luxol Fast Blue 髓鞘染色液（焦油紫法）,索莱宝,G3245-3x50ml，可以访问官网了解更多产品信息。
Luxol Fast Blue 髓鞘染色液（焦油紫法）,索莱宝,G3245-3x50ml

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索莱宝

·  英文名称 : Luxol Fast Blue/Cresyl Violet Stain Kit

·  储存条件 : 2-8℃保存

·  单位 : 盒

 

髓鞘（myelin sheath）是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。
    很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义，例如神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。

浓度
规格 3x50ml
保存 2-8℃保存

TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX* 货号17293-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*

TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*

货号 17293 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mL 价格 3612
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：17293

产品名称：TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*

规格：5ml

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

溶剂：水

 

产品介绍

用于 TaqMan 探针的 TAQuest FAST qPCR Master Mix 是一种即用型 2X 溶液，针对 qPCR 和两步法 RT-qPCR 进行了优化，非常适合用于 TaqMan 基因表达分析。预混液与 FAST 条件兼容，因此在 20 uL 反应体积中进行 40 个 PCR 循环，可在 50 分钟内提供结果。预混液提供所有基本成分，包括我们专有的 TAQuest FAST 热启动 Taq DNA 聚合酶和优化的 PCR 缓冲液中的 dNTP，但模板、引物和探针除外。用于 TaqMan 探针的 TAQuest FAST qPCR Master Mix 设计用于使用具有性能的内部阳性对照进行双重反应。预混液可确保所有样品类型（如基因组、质粒、病毒和 cDNA 模板）的 PCR 特异性和灵敏度。该预混液含大量 ROX 参考染料。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*。

 

适用仪器

qPCR  
仪器规格 基于探针的滤波片

 

样品实验方案
注意 在室温下解冻TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*。 使用前彻底涡旋 qPCR Master Mix。
1. 制备表 1 所示的下列反应混合物之一。
2. 轻轻涡旋混合试剂，然后短暂离心。
3. 在 qPCR 仪器中设置板并按表 2 所示操作。

 

表 1. 各反应每孔试剂组成

成分 体积 (25 µL/reaction) 体积 (50 µL/reaction) 终浓度
TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX* 12.5 µL 25 µL 1X
上游引物，10 µM 0.25-2.5 µL 0.5-5.0 µL 0.1-1.0 µM
下游引物，10 µM 0.25-2.5 µL 0.5-5.0 µL 0.1-1.0 µM
DNA模板 1-5 µL 1-5 µL 优化的浓度
无核酸酶水 25 µL 50     µL  

表 2. 热循环参数

范围 聚合酶 PCR (30-40个循环)
  Hold 变性 退火 延伸
温度 95 °C 95 °C 55-65 °C 68-72 °C
时间 (m:ss) 0:20 0:30 1:00 1:00

 

参考文献

Resilient SARS-CoV-2 diagnostics workflows including viral heat inactivation.
Authors: Lista, Maria Jose and Matos, Pedro M and Maguire, Thomas J A and Poulton, Kate and Ortiz-Zapater, Elena and Page, Robert and Sertkaya, Helin and Ortega-Prieto, Ana M and Scourfield, Edward and O’Byrne, Aoife M and Bouton, Clement and Dickenson, Ruth E and Ficarelli, Mattia and Jimenez-Guardeño, Jose M and Howard, Mark and Betancor, Gilberto and Galao, Rui Pedro and Pickering, Suzanne and Signell, Adrian W and Wilson, Harry and Cliff, Penelope and Kia Ik, Mark Tan and Patel, Amita and MacMahon, Eithne and Cunningham, Emma and Doores, Katie and Agromayor, Monica and Martin-Serrano, Juan and Perucha, Esperanza and Mischo, Hannah E and Shankar-Hari, Manu and Batra, Rahul and Edgeworth, Jonathan and Zuckerman, Mark and Malim, Michael H and Neil, Stuart and Martinez-Nunez, Rocio Teresa
Journal: PloS one (2021): e0256813

Development of a multiplex TaqMan qPCR assay for simultaneous detection and differentiation of four DNA and RNA viruses from clinical samples of sheep and goats.
Authors: Xu, Xingang and Yang, Feng and Zhang, Qi and Xu, Ying and Huang, Jiali and Fu, Mingzhe and Zhang, Weimin
Journal: Journal of virological methods (2019): 58-64

Evaluation and utilization of preassembled frozen commercial fast real-time qPCR master mixes for detection of cytomegalovirus and BK virus.
Authors: Glover, William A and Atienza, Ederlyn E and Nesbitt, Shannon and Kim, Woo J and Castor, Jared and Cook, Linda and Jerome, Keith R
Journal: Journal of medical virology (2016): 115-9

Frequency-encoded laser-induced fluorescence for multiplexed detection in infrared-mediated quantitative PCR.
Authors: Schrell, Adrian M and Roper, Michael G
Journal: The Analyst (2014): 2695-701

Real-time stability testing of air-dried primers and fluorogenic hydrolysis probes stabilized by trehalose and xanthan.
Authors: Rombach, Markus and Kosse, Dominique and Faltin, Bernd and Wadle, Simon and Roth, Günter and Zengerle, Roland and von Stetten, Felix
Journal: BioTechniques (2014): 151-5

Development of a novel internal positive control for Taqman based assays.
Authors: Hartman, Laurie J and Coyne, Susan R and Norwood, David A
Journal: Molecular and cellular probes (2005): 51-9

[Establishment and application of real-time fluorescence polymerase chain reaction based on the TaqMan probes for detection of Yersinia pestis].
Authors: Li, Wei and Hai, Rong and Yu, Dong-zheng and Zhang, Zhi-kai and Cai, Hong
Journal: Zhonghua liu xing bing xue za zhi = Zhonghua liuxingbingxue zazhi (2005): 613-6

[Multiplex PCR for detection and quantification of GM potato event EH92-527-1 in food].
Authors: Tyshko, N V and Sadykova, E O and Grouzdev, D S and Sukhacheva, M V
Journal: Voprosy pitaniia: 57-61

[Multiplex polymerase chain reaction for genetically modified potato event AV43-6-G7 quantification. Proof of efficiency].
Authors: Tyshko, N V and Sadykova, E O and Sukhacheva, M V and Grouzdev, D S
Journal: Voprosy pitaniia: 62-70

说明书
TAQuest FAST qPCR Master Mix 用于TaqMan探针*高ROX*.pdf

TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX* 货号17276-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX*

TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX*

TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX* 货号17276 货号 17276 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mL 价格 1164
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：17276

产品名称：TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX*

规格：1ml

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

溶剂：水

 

产品介绍

TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green 是一种即用型 2X溶液，针对 qPCR 和两步法 RT-qPCR 进行了优化。对于 20 uL 反应体积中的 40 个 PCR 循环，预混液可在 50 分钟内提供结果。该混合物包括含有 dNTP 的优化缓冲液和我们专有的 TAQuest FAST 热启动 Taq DNA 聚合酶，该酶旨在允许即时热启动，最大限度地减少非特异性产物的形成，从而允许室温反应设置。运行所需的 PCR 反应只需要模板和目标引物。 TAQuest FAST qPCR Master Mix 与 Helixyte Green 确保 PCR 特异性和灵敏度对所有样品类型，如基因组、质粒、病毒和 cDNA 模板。 Helixyte Green 嵌入染料无需使用序列特异性探针即可快速检测和分析 DNA。该预混液不含 ROX 参考染料。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX*。 

 

适用仪器

qPCR  
仪器规格 SYBR Green 滤波片

 

样品实验方案
注意 在室温下用 Helixyte Green *无ROX* 解冻 TAQuest™ FAST qPCR Master Mix。 使用前彻底涡旋 qPCR Master Mix。
1. 制备表 1 所示的下列反应混合物之一。
2. 轻轻涡旋混合试剂，然后短暂离心。
3. 在 qPCR 仪器中设置板并按表 2 所示操作。

 

表 1. 各反应每孔试剂组成

成分 体积 (25 µL/reaction) 体积 (50 µL/reaction) 最终浓度
TAQuest qPCR Master Mix with Helixyte Green *无 ROX* 12.5 µL 25 µL 1X
上游引物，10 µM 0.25-2.5 µL 0.5-5.0 µL 0.1-1.0 µM
下游引物，10 µM 0.25-2.5 µL 0.5-5.0 µL 0.1-1.0 µM
DNA模板 1-5 µL 1-5 µL 优化的浓度
无核酸酶水 25 µL 50     µL  

表 2. 热循环参数

范围 聚合酶激活 PCR (30-40个循环)
  Hold 变性 退火 延伸
温度 95 °C 95 °C 55-65 °C 68-72 °C
时间 (m:ss) 0:20 0:30 1:00 1:00

 

参考文献

Fatal systemic toxoplasmosis in a 3-month-old young tibetan goat (Capra hircus).
Authors: Pavone, Silvia and Crotti, Silvia and Cruciani, Deborah and D’Avino, Nicoletta and Zema, Jacopo and Morelli, Simone and Gobbi, Marco and Madeo, Laura
Journal: BMC veterinary research (2020): 423

Development of four PCR-based methods to differentiate tilefish species (Branchiostegus japonicus and B. albus).
Authors: Kang, Tae Sun
Journal: Food chemistry (2019): 1-8

A multi-screening Fast qPCR approach to the identification of abortive agents in ruminants.
Authors: Sebastiani, Carla and Curcio, Ludovica and Ciullo, Marcella and Cruciani, Deborah and Crotti, Silvia and Pesca, Cristina and Torricelli, Martina and Sebastianelli, Martina and Felici, Andrea and Biagetti, Massimo
Journal: Journal of microbiological methods (2018): 12-17

A rapid real-time PCR method to differentiate between mottled skate (Beringraja pulchra) and other skate and ray species.
Authors: Kim, Mi-Ra and Kwon, Kisung and Jung, Yoo-Kyung and Kang, Tae Sun
Journal: Food chemistry (2018): 112-119

Development of a Sensitive Real-Time Fast-qPCR Based on SYBR® Green for Detection and Quantification of Chicken Parvovirus (ChPV).
Authors: Nuñez, Luis F and Santander-Parra, Silvana H and Chaible, Lucas and De la Torre, David I and Buim, Marcos R and Murakami, Alexandre and Zaidan Dagli, Maria Lucia and Astolfi-Ferreira, Claudete S and Piantino Ferreira, Antonio J
Journal: Veterinary sciences (2018)

Evaluation and utilization of preassembled frozen commercial fast real-time qPCR master mixes for detection of cytomegalovirus and BK virus.
Authors: Glover, William A and Atienza, Ederlyn E and Nesbitt, Shannon and Kim, Woo J and Castor, Jared and Cook, Linda and Jerome, Keith R
Journal: Journal of medical virology (2016): 115-9

Fast quantitative PCR, locked nucleic acid probes and reduced volume reactions are effective tools for detecting Batrachochytrium dendrobatidis DNA.
Authors: Ruthig, Gregory R and Deridder, Benjamin P
Journal: Diseases of aquatic organisms (2012): 249-53

Multi-platform comparison of ten commercial master mixes for probe-based real-time polymerase chain reaction detection of bioterrorism threat agents for surge preparedness.
Authors: Buzard, Gregory S and Baker, Daniel and Wolcott, Mark J and Norwood, David A and Dauphin, Leslie A
Journal: Forensic science international (2012): 292-7

Real-time quantitative PCR and fast QPCR have similar sensitivity and accuracy with HIV cDNA late reverse transcripts and 2-LTR circles.
Authors: Yoder, Kristine E and Fishel, Richard
Journal: Journal of virological methods (2008): 253-6

Detection of equine herpesvirus-1 in nasal swabs of horses by quantitative real-time PCR.
Authors: Perkins, G A and Goodman, L B and Dubovi, E J and Kim, S G and Osterrieder, N
Journal: Journal of veterinary internal medicine: 1234-8

说明书
TAQuest FAST qPCR Master Mix with Helixyte Green *无ROX*.pdf