Covidyte TF670

简要概述

CoV-19是一种可以感染人类和多种动物。这类病.毒具有胃肠道、呼吸道和神经系统的嗜性，可以导致多种疾病。在2019年底，一种新型的CoV-19被称为严重急性呼吸系统综合症SARS-CoV-2，开始在全球蔓延。即使大多数受感染的患者仅患有轻度症状，例如发烧和 ，但该疾病可能发展为致命的肺炎和急性呼吸衰竭病例，尤其是在多病体弱的的老人中。该病.毒仅仅从出现开始的三四个月，全球已经感染了超过100万人。目前全世界都迫切需要开发抗SARS-CoV-2的特异性抗病.毒治疗方法和疫苗，而Covid-19主蛋白酶是抗CoV设计的重要靶点，在病.毒基因表达和复制中起着关键作用。目前已掌握的治疗人类免疫缺陷病.毒（HIV）和丙型肝炎的成功策略是抑制蛋白水解酶消灭病.毒蛋白酶。而且证明了蛋白酶抑制剂治疗病.毒感染具有非常大的潜力。同样，SARS-CoV-2病.毒必须要进行复制的酶便是蛋白酶，因此Covid-19是抗病.毒治疗极好的靶点。

Covidyte TF670是一种包含11个氨基酸序列的肽底物，可被CoV-19蛋白酶切割。FRET肽的”N”和”C”末端分别包含Dabcyl（淬灭剂）和Edans（供体），当该肽完整时，Edans的荧光可被Dabcy有效地淬灭。当该肽被CoV-19蛋白酶水解时，Edans片段产生明显增强的荧光，因为其荧光不再被Dabcyl淬灭。CoV-19蛋白酶的活性可以通过Edans的荧光强度有效地检测到。Covidyte TF670是筛选CoV-19蛋白酶抑制剂的便捷工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Covidyte肽底物系列产品。 

点击查看光谱

产品说明书

样品实验方案

溶液配制

储备溶液配制

1.Covidyte TF670储备液（200X）：向Covidyte TF670小瓶中添加25 µL（对于cat＃13540）或250 µL（对于cat＃13541）DMSO。

注意：制成单次使用的等分试样，并储存在-20°C下。

工作溶液配制

1.Covidyte TF670工作溶液：在20 mM Tris缓冲液（pH 7.5）或自备缓冲液中以1：200稀释底物储备液。每个实验在96孔板中使用50μL底物溶液。

2.Cov蛋白酶稀释：根据需要稀释CoV蛋白酶。

实验步骤

（一个96孔板的样品方案）

1. 将50μLCovidyte TF670工作溶液和50μLCoV蛋白酶稀释液添加到测定板的所有孔中。

2. 使用荧光酶标仪在Ex / Em = 640/680 nm（截止660nm）处检测荧光的增加。 

对于动力学读数：立即开始连续不断地测量荧光强度，并每5分钟记录一次数据，持续30-120分钟。
对于终点读数：在避光的条件下，将反应在所需温度下孵育30至120分钟。然后测量荧光强度。

图示

图1蛋白酶在蛋白质激活、细胞调节和信号转导以及氨基酸的生成中起着至关重要的作用，用于蛋白合成或其他代谢途径。 FRET蛋白酶底物广泛用于检测蛋白酶活性，特别是用于病.毒蛋白酶的检测，这些病.毒蛋白酶经常需要较长的肽序列才能实现结合，例如CoV-19，HIV和HCV蛋白酶。原理：内部淬灭的FRET肽底物被蛋白酶消化，荧光强度与蛋白酶活性成正比，从而产生高荧光的肽片段。Tide Quencher、Tide Fluor 和iFluor 染料都是研发用于高通量筛选应用的FRET蛋白酶底物的极其有效的淬灭剂。

相关产品