Cytoskeleton AKL95-C说明书
Cytoskeleton，Inc。很高兴为药物筛选，信号转导和细胞骨架研究提供广泛的试剂盒和产品。我们专注于生产纯化蛋白质和易于使用的试剂盒，以研究生物化学和细胞过程。我们的试剂盒可用于少量样品，用于基础研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量样品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我们现有的产品，我们还在产品线中为微管，微管蛋白，运动蛋白，小G蛋白效应物，GAP，GEF和其他几种蛋白提供药物筛选服务。
结合蛋白质
· 概述
· 关于
· CITATIONS
· 常见问题解答
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测定所有肌动蛋白结合蛋白（ABP）以确保其活性与公布的值相当。测定因产品而异，包括F-肌动蛋白切断测定，F-肌动蛋白激活的ATP水解和肌动蛋白聚合测定。显示了测量WASP VCA结构域蛋白在肌动蛋白聚合中的作用（右）。
Cytoskeleton，Inc。销售一系列纯化的肌动蛋白结合蛋白。所有Cytoskeleton的肌动蛋白结合蛋白都具有高纯度，并经过严格的生物活性测试。细胞骨架还为肌动蛋白结合蛋白研究提供肌动蛋白，抗体和试剂盒。 |
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由Arp2 / 3和WASP VCA结构域刺激的肌动蛋白聚合。试剂盒BK003用于研究Arp2 / 3（Cat。＃RP01）和WASP VCA（Cat。＃VCG03）结构域对肌动蛋白聚合的影响。 |
肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用
*，F-和G-肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用（14）。目前有超过150种已知的肌动蛋白结合蛋白（ABP），其占细胞蛋白的约25％。ABP在肌动蛋白细胞骨架上赋予大量功能多样性，其涉及诸如肌肉收缩，唇形突破，细胞运动，胞质分裂和细胞质流动的过程。研究这些过程如何调节肌动蛋白丝功能和动力学是一个重要且不断增长的研究领域。
可以通过使用生物化学，遗传学和免疫学方法分离和研究肌动蛋白结合蛋白。因为存在超过50种类型的肌动蛋白结合蛋白，所以用于鉴定它们的方法及其功能/活性也是多种多样的。肌动蛋白亲和柱通常用于亲和纯化ABP，无论它们是F-或G-肌动蛋白结合。可以通过利用芘肌动蛋白荧光的聚合增强来进行显示潜在ABP影响肌动蛋白动力学的简单测定（参见测量肌动蛋白聚合物部分）。这种性质的研究有助于鉴定新的肌动蛋白结合蛋白。有几篇值得一读的关于识别和量化新肌动蛋白结合蛋白的可能方法的评论（15,16,17）
问题1：哪种肌动蛋白结合蛋白（ABP）可用作F-肌动蛋白结合对照？
答案1：肌动蛋白结合蛋白α-辅肌动蛋白（Cat。＃AT01）是一种F-肌动蛋白结合和交联蛋白，使其可用作F-肌动蛋白结合研究的对照。它的Kd是1μM，这意味着在该浓度下发生50％结合。因此，我们的目标是使用 2μM的α-肌动蛋白作为结合测定中的阳性对照。在结合反应中，2μM浓度的α-辅肌动蛋白相当于0.23μg/μl。此外，α-辅肌动蛋白对pH敏感，其高亲和力发生在pH 7.0。
问题2：Cytoskeleton的肌球蛋白或重的meromyosin是否具有F-肌动蛋白活力？
答案2：遗憾的是，我们不会出售运动级肌球蛋白或重肌红蛋白用于肌动蛋白运动试验。我们发现质量控制测试非常难以复制，因此我们无法充分确保试剂的质量。因此，肌球蛋白（Cat。＃MY02和MY03）和重型meromyosin蛋白（Cat。＃MH01）不推荐用于F-肌动蛋白运动测定。已经测试过这些试剂的客户在运动方面没有取得很好的成功，因此我们不建议购买样品进行测试。如果需要运动级肌动蛋白或重型meromyosin，我们建议遵循原始方案（Kron和Spudich，1985）并在液氮中冷冻100μl等分试样以确保稳定性。
参考文献： SJ Kron和JA Spudich，1985年。荧光肌动蛋白丝在固定在玻璃表面的肌球蛋白上移动。PNAS，83,6272-6276。
结合蛋白质系列产品：
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PHDG1 |
Acti-stain 488 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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PHDH1 |
Acti-stain 555 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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PHDN1 |
Acti-stain 670 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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BK001 |
Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
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BK003 |
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
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AKL95 |
Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AD99 |
Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AS99 |
Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AKL99 |
Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AKF99 |
Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AP05 |
Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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PHDG2 |
Acti-stain 488 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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PHDH2 |
Acti-stain 555 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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PHDN2 |
Acti-stain 670 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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BK005 |
Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
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BK007 |
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL96 |
Actin protein (>96% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AD100 |
Actin protein (>100% pure): bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AS100 |
Actin protein (>100% pure): chicken gizzard muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL100 |
Actin protein (>100% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKF100 |
Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AP06 |
Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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PHDG3 |
Acti-stain 488 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDH3 |
Acti-stain 555 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDN3 |
Acti-stain 670 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
BK009 |
Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
|
BK011 |
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
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AKL97 |
Actin protein (>97% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AD101 |
Actin protein (>101% pure): bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
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AS101 |
Actin protein (>101% pure): chicken gizzard muscle |
ea |
cytoskeleton |
肌动蛋白（纯度> 95％）：兔骨骼肌
Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle
1×1毫克（Cat。＃AKL95-B）
5×1 mg（Cat。＃AKL95-C）
产品用途包括
· 肌肉肌动蛋白结合蛋白的鉴定和表征
· 体外肌动蛋白聚合研究
· Western印迹分析的抗体标准
从兔骨骼肌中纯化出肌动蛋白材料。 AKL99肌动蛋白纯度大于99％，AKL95纯度大于95％。肌肉肌动蛋白的分子量约为43kDa。兔肌肉肌动蛋白作为白色冻干粉末提供。冻干的蛋白质在4℃下干燥至<10％湿度时保存6个月。当再 在蒸馏水中构成为10毫克/毫升，该蛋白质是在以下缓冲液：5mM的的Tris-HCl pH 8.0中，0.2毫米氯化钙2，0.2mM的ATP，5％蔗糖和1％的葡聚糖。
纯度
通过在12％聚丙烯酰胺凝胶上扫描Coomassie Blue染色蛋白的光密度测定法测定纯度。AKL99由> 99％纯肌肉肌动蛋白组成，而AKL95纯度> 95％（见图1）。
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图1：图1.兔骨骼肌肌动蛋白的纯度。在SDS-PAGE凝胶上运行100μg> 99％纯（AKL99）和> 95％纯（AKL95）兔骨骼肌肌动蛋白，并用考马斯蓝染色。箭头表示肌动蛋白，箭头表示α-肌动蛋白污染物（115kDa）。纯化的肌动蛋白中的微量杂质主要是肌动蛋白结合蛋白，例如α-肌动蛋白和凝溶胶蛋白。 |
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生物活性
肌肉肌动蛋白的生物活性由其在体外有效聚合成长丝（F-肌动蛋白）的能力和在旋转分析中与未聚合组分分离的能力决定。严格的质量控制确保AKL99产生> 90％的F-肌动蛋白，AKL95在该测定中产生> 80％的F-肌动蛋白。
问题1：储存肌动蛋白的*方法是什么，以确保大的稳定性和保质期？
答案1： 细胞骨架提供我们所有的肌动蛋白作为冻干粉末，以便它们可以在室温下运输。收到后，冻干粉末应在4℃下储存在带有干燥剂的密封容器中。重要的是监测干燥剂的新鲜度并确保其继续吸收水分以保护冻干的肌动蛋白。妥善储存后，冻干肌动蛋白保证自购买之日起6个月内保持稳定。或者，肌动蛋白可立即以推荐的浓度重新悬浮，等分，在液氮中快速冷冻并储存在-70℃。冷冻的等分试样可稳定6个月。解冻冷冻等分试样时，重要的是在室温水浴中解冻。
问题2：聚合后储存F-肌动蛋白的*方法是什么？
答案2： G-肌动蛋白在4°C下稳定2天，需要二价阳离子，pH 6.5 – 8.0和ATP稳定性。F-肌动蛋白是稳定的，可以在4°C下储存1-2周。F-肌动蛋白需要ATP（0.2mM）和Mg2 +（2mM）的稳定性，并且在pH6.5和pH8.5以下是不稳定的。F-肌动蛋白对冷冻不稳定。F-肌动蛋白可以转移到各种缓冲液（例如HEPES，磷酸盐等）而没有不利影响。我们建议在4°C下储存F-肌动蛋白时，添加抗菌剂，如100μg/ ml氨苄青霉素和10μg/ ml氯霉素。
Mohammad等，2012。Flightless I是一种粘附相关的肌动蛋白加帽蛋白，可调节细胞迁移。FASEBĴ。doi：10.1096 / fj.11-202051。
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货号 |
品名 |
规格 |
品牌 |
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BK165-S |
Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
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BK165 |
Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK163-S |
Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK163 |
Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK160-S |
Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK160 |
Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK162-S |
Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK162 |
Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK161-S |
Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK161 |
Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
AAC04-Beads |
Acetyl-Lysine Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
APY03-Beads |
Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM11-Beads |
SUMOylation 1 Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM24-Beads |
SUMOylation 2/3 Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
UBA01-Beads |
Ubiquitination Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CIG02-Beads |
Acetyl-Lysine Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CIG03-Beads |
SUMO1 IP Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CIG01-Beads |
IgG Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CUB02-Beads |
Ubiquitination Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
BLR01 |
BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
BLR02 |
BlastR™ Rapid Filtration Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC02 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1) |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC03 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC03-HRP |
Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC01 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20) |
ea |
cytoskeleton |
|
APY03 |
Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10) |
ea |
cytoskeleton |
|
APY03-HRP |
Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM01 |
SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM24 |
SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM23 |
SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM23-HRP |
SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) |
ea |
cytoskeleton |
|
AUB01 |
Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal |
ea |
cytoskeleton |
|
AUB01-HRP |
Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDG1 |
Acti-stain 488 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDH1 |
Acti-stain 555 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDN1 |
Acti-stain 670 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
BK001 |
Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
|
BK003 |
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL95 |
Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AD99 |
Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AS99 |
Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL99 |
Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKF99 |
Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AP05 |
Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
APHR |
Actin protein (rhodamine): human platelet |
ea |
cytoskeleton |
|
AR05 |
Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AT01 |
Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
RP01P |
Arp2/3 protein complex: porcine brain |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-TFC01 |
Cardiac Thin Filament Complex (CTFC) |
ea |
cytoskeleton |
|
CF01 |
Cofilin 1 protein: human recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
HPG6 |
Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
MH01 |
Heavy meromyosin protein |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MH03 |
Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment) |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS03 |
Myosin – cardiac S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS04 |
Myosin – skeletal muscle S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS05 |
Myosin – smooth muscle S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
MY02 |
Myosin II protein: rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
MY03 |
Myosin protein: bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
PR02 |
Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDR1 |
Rhodamine Phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
CY-SC001 |
SiR-Actin Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
CY-SC013 |
SiR700-Actin Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
VCG03 |
WASP protein VCA domain: GST tagged: human |
ea |
cytoskeleton |
上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商
1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。
2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。
3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。
4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。
5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。
6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。
7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。