abeomics 14-131ACL说明书
abeomics 14-131ACL说明书
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TLR9/NF-kB Leeporter™ Luciferase Reporter-HEK293 Cell Line
TLR9/NF-kB Leeporter™ 萤光素酶报告基因-HEK293 细胞系
产品编号：14-131ACL
| 应用 ： | 功能分析 |
| 数量 ： | 1 瓶 |
| 内容 ： | 每个小瓶在 1 ml 90% FBS + 10% DMSO 中含有 2 ~ 3 x 10^6 个细胞。 |
| 储存情况 ： | 收到后立即储存在液氮中。 |
TLR9/NF-kB Leeporter™ 萤光素酶报告细胞系是稳定转染的 HEK 293 细胞系，在 NF-kB 反应元件的转录控制下表达全长人类 Toll 样受体 9 (TLR9) 和海肾萤光素酶报告基因. TLR9 是关键的先天免疫受体之一。细胞系的功能活性已通过 TLR9 配体测定得到验证，其中在被 CpG 激活后，TLR9 迅速启动下游信号通路并介导 NF-kB 的核转位（图 1）。
应用：
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监测 TLR9 信号通路活性。
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筛选 TLR9 信号通路的激活剂或抑制剂。
培养条件：
细胞应在 37 o C 和 5% CO 2 使用 DMEM 培养基（含 L-谷氨酰胺、4.5g/L 葡萄糖和丙酮酸钠）并添加 10% 热灭活 FBS 和 1% Pen/Strep 以及 2 µ g/ml 嘌呤霉素和 5 µg /ml 杀稻瘟菌素 （注意：在报告细胞分析期间可以省略嘌呤霉素和杀稻瘟素）。
建议在收到冷冻细胞后或在 37 o C 水浴 中从液氮中快速解冻，转移到含有 10 ml 不含嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的生长培养基的试管中，离心细胞，重悬细胞在预热的生长中不含嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的培养基，将重悬的细胞转移到 T25 瓶中，在 37 o C-CO 2 培养箱中培养。
将 T25 烧瓶放在培养箱中 1~3 天，不要干扰或更换培养基，直到细胞*恢复活力并贴壁。一旦细胞贴壁率超过 90%，去除生长培养基并通过胰蛋白酶消化和离心使细胞传代。在第一次传代时，切换到含有嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的生长培养基。细胞在达到*汇合之前应该被分裂。
为了使细胞传代，用胰蛋白酶/EDTA 将细胞从培养容器中分离出来，加入完整的生长培养基并转移到试管中，旋转细胞，重悬细胞并将适当等分的细胞悬浮液接种到新的培养容器中。传代比例 = 每周 1:10 至 1:20。 为了获得满意的结果，细胞不应传代超过 16 次。