iFluor 350 酪胺

简要概述

产品基本信息

货号：45095

产品名称：iFluor 350 酪胺

规格：200 Slides

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：432.45

Ex(nm)：345

Em(nm)：450

量子产率(cm ^-1 M ^-1)：20000

消光系数：0.95

产品介绍

对于许多免疫组织化学（IHC）的应用，传统的酶扩增程序足以实现充分的抗原检测。然而，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。酪 胺信号放大技术（TSA）已被证明是一种特别通用和强大的酶放大技术，提高了检测灵敏度。TSA是基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将标记的酪胺底物转化为氧化的、高活性的自由基的能力，该自由基可在HRP处或其附近共价结合酪氨酸残基。为了达到 限度的IHC检测，酪胺预先标记了一个荧光团。通过每个过氧化物酶标签上的多个酪胺底物的转换所产生的信号放大转化为对低丰度目标的超灵敏检测，以及使用少量抗体和杂交探针。在免疫组化应用中，TSA法的敏感性增强使原代抗体稀释度增加，以减少非特异性背景信号，并能克服由于固定程序不理想或靶蛋白表达水平低而导致的弱免疫标记。iFluor 350酪胺含有明亮的iFluor350，可以很容易地用标准DAPI滤波片组检测。它是Alexa Fluor®350酪胺（Alexa Fluor®是ThermoFisher的商标）或其他光谱类似的荧光酪胺共轭物或TSA试剂（如荧光素酪胺）的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 350 酪胺。

iFluor 633 酪胺

	货号	11083	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Slides
	Ex (nm)	640	Em (nm)	654
	分子量	1271.67	溶剂	DMSO
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：11083

产品名称：iFluor 633 酪胺

规格：200 Slides

储存条件：保存在冰箱-15℃干燥

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1271.67

外观：固体

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：640

发射波长(nm)：654

产品介绍

酪胺信号放大 (TSA) 已被证明是一种特别通用且功能强大的酶信号放大技术，具有更高的检测灵敏度。 TSA 基于 HRP 的能力，在低浓度过氧化氢存在下，将标记的含酪胺的底物转化为氧化的、高反应性自由基，该自由基可以与 HRP 处或附近的酪氨酸残基共价结合。在免疫组织化学应用中，TSA 方法的灵敏度增强可以增加一抗稀释度以减少非特异性背景信号，并且可以克服低水平目标表达引起的弱免疫标记。iFluor 633 酪胺含有明亮的 iFluor 633 荧光团，可使用标准 Cy5 滤光片组轻松检测。 iFluor 633 是 亮的 NIR 荧光团之一。 

iFluor 546 酪胺

简要概述

产品基本信息

货号：45103

产品名称：iFluor 546 酪胺

规格：200 Slides

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1282.88

Ex(nm)：541

Em(nm)：557

量子产率(cm ^-1 M ^-1)：100000

消光系数：0.67

产品介绍

对于许多免疫组织化学（IHC）的应用，传统的酶扩增程序足以实现充分的抗原检测。然而，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。酪胺信号放大技术（TSA）已被证明是一种特别通用和强大的酶放大技术，提高了检测灵敏度。TSA是基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将标记的酪胺底物转化为氧化的、高活性的自由基的能力，该自由基可在HRP处或其附近共价结合酪氨酸残基。为了达到 限度的IHC检测，酪胺预先标记了一个荧光团。通过每个过氧化物酶标签上的多个酪胺底物的转换所产生的信号放大转化为对低丰度目标的超灵敏检测，以及使用少量抗体和杂交探针。在免疫组化应用中，TSA法的敏感性增强使原代抗体稀释度增加，以减少非特异性背景信号，并能克服由于固定程序不理想或靶蛋白表达水平低而导致的弱免疫标记。iFluor 546酪胺含有明亮的iFluor546，可以很容易地用标准TRITC滤波片组检测。它是Alexa Fluor®546酪胺（Alexa Fluor®是ThermoFisher的商标）或其他光谱类似的荧光酪胺共轭物或TSA试剂（如荧光素酪胺）的极好替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 546 酪胺。

iFluor 568 酪胺

简要概述

产品基本信息

货号：45106

产品名称：iFluor 568 酪胺

规格：200 Slides

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：813.89

Ex(nm)：568

Em(nm)：587

量子产率(cm ^-1 M ^-1)：100000

消光系数：0.57

产品介绍

对于许多免疫组织化学（IHC）的应用，传统的酶扩增程序足以实现充分的抗原检测。然而，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。酪胺信号放大技术（TSA）已被证明是一种特别通用和强大的酶放大技术，提高了检测灵敏度。TSA是基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将标记的酪胺底物转化为氧化的、高活性的自由基的能力，该自由基可在HRP处或其附近共价结合酪氨酸残基。为了达到大限度的IHC检测，酪胺预先标记了一个荧光团。通过每个过氧化物酶标签上的多个酪胺底物的转换所产生的信号放大转化为对低丰度目标的超灵敏检测，以及使用少量抗体和杂交探针。在免疫组化应用中，TSA法的敏感性增强使原代抗体稀释度增加，以减少非特异性背景信号，并能克服由于固定程序不理想或靶蛋白表达水平低而导致的弱免疫标记。iFluor 568酪胺含有明亮的iFluor568，可以很容易地用标准ROX滤波片组检测。它是Alexa Fluor®568酪胺（Alexa Fluor®是ThermoFisher的商标）或其他光谱类似的荧光酪胺共轭物或TSA试剂（如荧光素酪胺）的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 568 酪胺。

iFluor 647 酪胺

简要概述

对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些过程的敏感性和实用性。乙酰胺信号放大（TSA）已被证明是一种特别通用且功能强大的酶放大技术，具有很高的测定灵敏度。 TSA拥有HRP在低浓度过氧化氢的存在下将标记的含酪胺底物转化为可与HRP或附近的酪氨酸残基共价结合氧化的高反应性自由基的能力。为了实现大程度的IHC检测，酪胺预先标记有荧光团，使用少量的抗体和杂交探针通过每个过氧化物酶标记的多个酪胺底物的更新而产生信号放大并转化为低丰度靶标的超灵敏检测。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的敏感性增强可以提高一抗稀释度，以减少非特异性背景信号，并且可以克服由于固定步骤或目标表达水平低而导致的免疫标记弱的问题。 iFluor 647酪胺包含明亮的iFluor 647，可使用标准Cy3滤波片组轻松检测到。它是AlexaFluor®647酪胺（AlexaFluor®是ThermoFisher的商标）或其他光谱相似的荧光酪胺缀合物或TSA试剂（例如Cy3酪胺）的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 647酪胺。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 修复/透化细胞或组织

2. 在封闭缓冲液中添加一抗

3. 加入结合HRP的二抗

4. 准备酪胺工作溶液，并在室温下添加到细胞或组织中（5-10分钟）

溶液配制

储备溶液配制

酪胺储备溶液（200X）：
将100 µL DMSO加入小瓶中并充分混合。注意：未使用的酪胺储备溶液可在2-8℃下储存。

工作溶液配制

酪胺工作溶液（1X）：
将100 µL酪胺储备溶液添加到20 mL含有0.003％H₂O₂的缓冲液中。 注意：可以使用pH = 7.4的Tris Buffer以获得性能。注意：应立即使用Tyramide工作溶液，随用随配。注意： 20 mL溶液适合200次测试。

实验步骤

（该步骤适用于细胞或组织染色）

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1％Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

组织固定，脱石蜡和补液

（根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。）

过氧化物酶标记

1.可选：通过在过氧化物酶淬灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选：如果使用结合HRP的链霉亲和素，建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液（例如含1％BSA的PBS）封闭30分钟。

4.除去封闭溶液，并添加稀释好的一抗，在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中，并在室温下孵育60分钟。注意：孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

酪胺标记

1.准备并向每个样品中加入100 µL的Tyramide工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。 注意：如果观察到非特异性信号，则可以缩短与Tyramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育时间。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。

2.用PBS冲洗3次。

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂，如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Tyramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。