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jembio Tth 111 逆转录酶简介

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jembio Tth 111 逆转录酶简介

 

 jembio Tth 111 逆转录酶            


在 Mn2+ 存在下，Thermus thermopilus 逆转录酶在升高的温度下催化 RNA 逆转录为 cDNA。

来源：嗜热栖热菌

描述：

• 适用于DNA 的高温合成(1)。

• 从 RNA 模板合成 cDNA (2)。

• 导致引物杂交和RNA 延伸的特异性更高。

• 可以在高温下逆转录 (2)。

• 最大限度地减少RNA 强二级结构的问题。

• 用于对含有问题二级结构的DNA 进行高效PCR。

• 适用于RT-PCR；相同的酶用于逆转录和随后扩增获得的 cDNA 模板 (2)。• 对从有问题的样本中分离的模板 DNA 中存在的扩增抑制剂具有抗性 (3,4)。          


  单位定义：一个单位是在 50°C 下 10 分钟内将 1 nmol dTTP 掺入酸不溶形式所需的酶量。

储存条件：储存于 –20°C。

储存缓冲液：50 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.5）、5 mM 二硫苏糖醇、0.1 mM EDTA、50% (v/v) 甘油和稳定剂。检测条件：40 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.5）、1 mM MnCl2、1 mg/ml 牛血清白蛋白、10 mM 二硫苏糖醇、0.5 mM [α-??P] dTTP 和 0.4 mM poly(A)·( dT)50。

在 50°C 下在 50 ?l 反应体积中孵育 10 分钟。质量控制：检测所有制剂的污染核酸内切酶、核酸外切酶、非特异性 RNase 以及单链和双链 DNase 活性。

参考：

1. Wang, AM, Doyle, MV 和 Mark, DF (1989) Proc。纳特尔。阿卡德。科学。美国 86、9717-9721。

2. Myers, TW, Gelfanld, DH (1991) Biochemistry 30, 7661-7666。

3. Kather, HL, Schwartz, I. (1994) Biotechniques 16, 84-92。

4. Poddar, SK, Sawyer, MH, Connor, JD (1998) J. Med。微生物。47, 1131-1135。

逆转录酶（AMV）使用说明

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逆转录酶（AMV）使用说明

反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶，该酶以RNA 为模板，以dNTP 为底物，tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物，在tRNA 3'-OH 末端上，根据碱基配对的原则，按5'-3'方向合成一条与RNA 模板互补的DNA 单链，这条DNA 单链叫做互补DNA (complementary DNA，CDNA)。

反转录酶（Reverse transcriptase）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。

AMV是一种逆转录酶的名称。amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化，*无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板，具有以rna为模板的dna聚合酶活性，dna为模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性，

AMV逆转录酶

适反应温度在42-55℃，高可达60℃，如果使用焦磷酸钠，适温度为37-41℃。rtt反应缓冲液根据不同用途可以作为5x或10x反应液使用，同时可抑制rnaseh酶活性。按照标准使用方法可以得到长至10-12kbcdna。rt007amv逆转录酶比普通amv逆转录酶和mmlv逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cdna。

 

基本资料

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反应温度：42-60℃产物长度：10-12kb

来源：禽畜源，全酶

反应效率：5u/reaction

rnaseh活性：弱，被抑制

特点

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1．高灵敏度2、高得率

3．高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构

4．可合成长至10-12kb的cdna

5．rt反应液可适用不同用途

 

逆转录酶（AMV）使用方法

solarbio逆转录酶

货号：RT1060
规格：200U/500U/1000U
保存:-20℃保存，避免反复冻融，保质期为2年。
产品内容

 

产品简介：
逆转录酶（AMV）从AvianMyeloblastosisVirus分离出来，经过高度纯化，不含核酸酶。可用于合成一链cDNA、制作cDNA探针、RNA转录、测序和RNA的逆转录反应。

逆转录酶（AMV）一个活性单位U定义为：在37℃，10min条件下，使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。

使用说明：
合成一链cDNA的步骤
以下试剂客户自己提供
dNTPs(10mM)

引物（OligodT（18）或随机引物或特异性引物

无核酸酶双蒸水
RNA模板
RNase抑制剂

RT反应（20μl体系）：
1．使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s；
2．取灭过菌且无核酸酶的0.2mlPCR管，依次加入

2~5μgRNAXμl
引物*1μl

引物*：OligodT18(10μM)或随机引物(50ng/μl)或特异性引物(2μM)】
dNTPs(10mM)1μl
补加无核酸酶的双蒸水至总体积15.5μl

3. 65度保温 5min 然后冰浴5min;

4.往步骤3的pcr管中依次加入下列组份

RNase 抑制剂（40u/ul）    0.5ul

10*AMV reaction buffer   2ul

DTT  (200mm)  1ul

逆转录酶（AMV）     1UL

5.轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s

6. 现在42度保温1hr ,然后70度保温15min,

7.上述产物可立即进行下一步的pcr反应或-20度保存。

 

 

AMV 逆转录酶

英文名称： AMV Reverse Transcriptase 总访问： 213
国产/进口： 进口 半年访问： 125
产地/品牌： 美国 Life Sciences Advanced Technologie 产品类别： 其他生物试剂
规       格： 50,000 U
货       号： AMV 007

 

LifeSci AMV 逆转录酶
一、公司介绍
Life Sciences Advanced Technologies 成立于1975年，是世界上一家生产AMV反转录酶的厂商。LSAT的AMV反转录酶因为其高灵敏度和有竞争力的价格体系，已经被许多世界有名的测序公司用于他们的反转录试剂盒产品。
Life Sciences Advanced Technologies在分子诊断试剂和酶类的开发研究上处于世界*地位。
Life Sciences Advanced Technologies决心在两个方面帮助人类疾病的诊断：提供应用基因测序诊断慢性复杂疾病的反转录试剂盒里的AMV反转录酶和传染病现场诊断的NASBA试剂盒。
 
二、产品推荐
1. RTHSA34
产品描述：
作为CDNA文库构建试剂盒的配套产品用于基因测序，浓度为35,000 U/ml。该款反转录酶已经被位居世界前三的的一家测序公司用于他们的反转录试剂盒，可实现17.5 U / cDNA逆转录和低于1 ng的RNA序列转录。
产品优势：
•仅需要0.5ul的酶对于每个cDNA文库试剂盒，有效控制反应体系，用于后续的扩增等
•每个cDNA文库试剂盒只需要17.5U, 相对于其他使用200单位的逆转录酶，可以节省50%以上的成本。
• amv 效率是Invitrogen superscriptase (一款MMLV 反转录酶)的11倍，是NEB和Promega 同款AMV的4倍。
2.AMV 007
产品描述：
主要应用于RT-PCR反应的AMV反转录酶，已广泛应用于许多生物技术实验室，浓度是20,000 U/ml。终端用户使用2.5 U 就能完成一个RT-PCR反应。
产品优势：
•用2.5U就能完成一个反应，有些中国用户，将其20000单位/ml的产品稀释到5000 U /ml，这样客户使用0.5 ul 就能完成一个RT-PCR反应。
•一个RT – pcr反应只需要2.5 U，相比NEB和Promega 的AMV RT，可以节省75%的成本。
3. BRT121
产品描述：
作为一种低无机磷酸盐的反转录酶，适用于进行下游克隆过程中的CDNA合成，因为一般情况下较高的无机磷酸盐浓度对磷酸转移反应有抑制作用。常用的可选浓度为5,000 Units/mL。

nanohelix热逆转录酶说明书

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nanohelix热逆转录酶说明书

nanohelix热逆转录酶说明书

热逆转录酶
200 u/㎕ , 1,000 u/㎕

  • 修饰的 MMLV RTase，RNaseH 阴性 

  • 42~55℃有效。50℃最佳

  • 高连续性（高达 12 kb 或更多）和灵敏度 

  • RT-PCR 性能良好

产品

货号 产品 特征 尺寸
BRT200 热逆转录酶 200 u/㎕ 风俗
BRT1000 热逆转录酶 1,000 u/㎕ 风俗

Thermo Reverse Transcriptase是 M-MLV Reverse Transcriptase (RTase) 的热稳定性和 RNase H 阴性变体，是一种在 42℃ ~ 55℃ 的温度范围内从 RNA 模板合成 cDNA 的酶，在 50℃ 时活性最高。Thermo Reverse Transcriptase的高合成能力和生产力可以从 RNA 模板合成长达 12 kb 的 cDNA。

 

 

应用 

  • 为文库或克隆生成长达 12 kb 的第一链 cDNA

  • 两步法或一步法 RT-PCR 应用 

  • 常规或实时 RT-PCR 

  • 用于检测病毒 RNA 的 RT-PCR

 

 

 

图 1. Thermo Reverse Transcriptase 200 u/㎕、1,000 u/㎕（= HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase）与竞争对手的 RT-PCR 活性比较。  从人血中提取总 RNA。使用总 700 ng RNA、oligo-d(T) 引物、200U HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase 在 50℃ 或 200U Promega's M-MLV RTase (Promega, USA) 在 42℃ 合成第一链 cDNA。在 50 ul PCR 反应中使用 10 % 的 cDNA 反应与对应于人类动力蛋白基因片段的引物组和 2.5 U HelixAmp™ HyperSense-Taq DNA 聚合酶。

 

jembio Tth 111​ 逆转录酶说明书

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jembio Tth 111​ 逆转录酶说明书

 jembio Tth 111 逆转录酶说明书   

   Thermus thermopilus Reverse Transcriptase 在 Mn2+ 存在的情况下在高温下催化 RNA 逆转录为 cDNA。

来源：嗜热栖热菌

描述：

• 适用于DNA 的高温合成(1)。

• 从 RNA 模板合成 cDNA (2)。

• 引物杂交和 RNA 延伸的特异性更高。

• 可以在高温下进行逆转录 (2)。

• 最大限度地减少RNA 二级结构强的问题。

• 用于DNA 的有效PCR，包含有问题的二级结构。

• 适用于RT-PCR；相同的酶用于逆转录和后续扩增获得的 cDNA 模板 (2)。

• 对从有问题的样本中分离的模板 DNA 中存在的扩增抑制剂具有抗性 (3,4)。           

单位定义：一个单位是在 50°C 下 10 分钟内将 1 nmol dTTP 掺入酸不溶形式所需的酶量。

储存条件：储存在 –20°C。

储存缓冲液：50 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.5）、5 mM 二硫苏糖醇、0.1 mM EDTA、50% (v/v) 甘油和稳定剂。

检测条件：40 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.5）、1 mM MnCl2、1 mg/ml 牛血清白蛋白、10 mM 二硫苏糖醇、0.5 mM [α-³²P] dTTP 和 0.4 mM poly(A)·( dT)50。

在 50°C 下孵育 10 分钟，反应体积为 50 µl。

质量控制：对所有制剂进行污染内切核酸酶、外切核酸酶、非特异性 RNase 以及单链和双链 DNase 活性的检测。

AMV逆转录酶,生工,B500999-0200 200U

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上海金畔生物科技有限公司提供AMV逆转录酶,生工,B500999-0200 200U，可以访问官网了解更多产品信息。
AMV逆转录酶,生工,B500999-0200 200U

询价
生工
AMV逆转录酶

英文名 AMV Reverse Transcriptase
相关类别 反转录PCR（RT-PCR） 储存 冷冻（-20℃）

产品描述

概述

AMV Reverse Transcriptase （RT）是由大肠杆菌表达的重组禽类成髓细胞瘤逆转录酶。AMV RT是一个异源二聚体，由两个不同的亚基组成（alpha和beta亚基）。AMV RT 具有多种活性，包括RNA和DNA依赖的DNA polymerase活性、DNA-RNA解旋活性、序列特异的Mn2+依赖性内切核酸酶活性和RNase H (45~60°C)内保持活性，因此可逆转录含有大量二级结构的RNA。

特点

  • 优化活性温度范围45~50°C 热稳定性高，逆转录温度可达60°C 高效合成长达13 kb的第一链cDNA 合成掺入修饰的核苷酸

应用

第一链cDNA合成，用于RT-PCR和实时RT-PCR;可提高反应温度降低二级结构对逆转录的影响;合成cDNA，用于克隆和表达研究;合成标记的cDNA探针;引物延伸法分析RNA

组份

一个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量

技术规格

储存 -20°C
浓度 10 U/μl
保质期 24 months
储存缓冲液 200 mM 磷酸钾，2 mM DTT，0.2% (V/V) Triton X-100 和 50% (V/V) 甘油（pH 7.2）。
5X AMV RT 缓冲液 50 mM Tris-HCl (pH 8.3)，40 mM KCl， 8.75 mM MgCl2，10 mM DTT，0.1 mg/ml 乙 酰化的 BSA，1 mM 放射性标记的 dTTP 以 及 0.25 mM poly(A)：oligo(dT)。
保 存 液 200 mM磷酸钾，2 mM DTT，0.2% (V/V) Triton X-100和50%（V/V）甘油（pH 7.2）
5X AMV RT 缓冲液 250 mM Tris-HCl（pH 8.5, 25°C），40 mM MgCl2，150 mM KCl，5 mM DTT
抑制剂 金属鏊合剂和无机磷酸盐。焦磷酸钠可降低AMV RT活性，但是当其浓度 ≤ 4 mM 时可增加全长cDNA的产量
失活温度 85°C加热5分钟

浓度 10 U/μl
规格 200U
保存 冷冻（-20℃）