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- 产品货号:
- BN26073
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- 中文名称:
- 镍-IDA琼脂糖凝胶 6FF
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- 英文名称:
- Ni IDA Sepharose 6FF
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- 品牌:
- Biorigin
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货号
产品规格
售价
备注
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BN26073-10ml
10ml
¥540.00
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BN26073-25ml
25ml
¥1120.00
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BN26073-100ml
100ml
¥3680.00
产品描述
1 简介
金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸,如组 氨酸能与多种过渡金属离子如Cu 2+ ,Zn 2+ ,Ni 2+ ,Co 2+ ,Fe 3+ 发生特殊的相互作用,能够吸附富含这类氨基 酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。因此,偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分离出这 些含有多个组氨酸的蛋白以及对金属离子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。一般来说,Ni 2+是用于纯化 组氨酸标记的蛋白质的优选金属离子。半胱氨酸和色氨酸也能与固定金属离子结合,但这种结合力要远小于组氨酸残基与金属离子的结合力。
镍亲和层析介质具有特异性好、流速快的优点,非常适合放大生产。
2 性能参数:
*检测条件: 层析柱 16mm×200mm *柱床高 5cm,25℃
3 使用方法
Ni-NTA琼脂糖凝胶6FF预先偶联Ni2+离子。通常,Ni2+是用于纯化重组组氨酸标签蛋白的优选金属离子, 用咪唑进行洗脱。
我们建议在含0.5-1.0 M NaCl的缓冲液,中性至弱碱性pH 7-8,这样的条件下结合,经常使用磷酸钠缓冲液。也可以使用Tris-HCl,但是在金属-蛋白质亲和力非常弱的情况下应该避免,因为它可以降低结合强度,在缓冲液中避免螯合剂如EDTA或柠檬酸盐的存在。
如果重组组氨酸标签蛋白表达为包涵体,则在所有缓冲液中包括高达6M Gua-HCl或8M尿素。当使用 高浓度的尿素或Gua-HCl时,通常发生蛋白质解折叠。包涵体变性复性是个很复杂的过程,一般的建议纯化可溶蛋白。
提示:含有尿素的样品可以通过SDS-PAGE直接分析,而含有Gua-HCl的样品在SDS-PAGE之前必须用 尿素缓冲液置换缓冲液。
4 保存
使用完的填料,用纯水彻底冲洗,最后保存在 20%乙醇中,4℃保存。
注意事项:
1.上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。
2.在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。
3.不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。
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