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biontex转染试剂选择指南

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biontex转染试剂选择指南

biontex转染试剂选择指南
 

使用说明：

在“转染试剂选择指南”中，您可以通过设置不同的过滤器（例如，针对核酸和细胞类型的组合）找到现有参考。页面顶部“搜索参考”中的适当关键字也可以产生结果。参考文献表明找到的转染试剂已成功用于相应的应用。理想情况下，应测试的转染参数和转染效率。


如果该列表不包括有关您的细胞类型的参考，这并不意味着没有合适的试剂可用，而只是没有关于该细胞类型的经验报告。

细胞类型 细胞类型描述 货号 核酸/递送分子 产品 书目数据 PDF 关联

 

 小鼠原代成肌细胞   miRNA Metafectene PRO CE Winbanks 等人，J. Biol。化学，2011 年 4 月；286: 13805 – 13814   关联

 

 小鼠原代肝细胞   miRNA Metafectene PRO S. Surendran 等人，《科学报告》，2016 年，6：18958；DOI：10.1038/srep18958   关联

 

 人原代成纤维细胞   siRNA Metafectene PRO T. Stiff 等人，PLoS Genet., 2013, 9(3): e1003360, doi.org/10.1371/journal.pgen.1003360   关联

 

 早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等人，《科学报告》，7：43287，DOI：10.1038/srep43287   关联

 

 晚二龄幼虫小菜蛾血腔   质粒 Metafectene PRO S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017    

 

 Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Z. Guo 等人，《科学报告》，2015，5：13728；DOI：10.1038/srep13728   关联

 

 小鼠（18.5 dpc 胎儿或新生儿）卵巢   miRNA Metafectene H. Zhang 等人，Reproduction，2014 年 6 月；148: 43 – 54   关联

 

 兔（新西兰）来自关节软骨的原代软骨细胞   质粒 Metafectene J.-H. Ryu 等人，J. Biol。化学，2006 年 8 月；281：22039 – 22047   关联

 

 Spodoptera exigua hemocoel 第一天幼虫 L5（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Y. Kim 等人, Peptides, 2015, 68: 91-98;doi.org/10.1016/j.peptides.2015.02.003    

 

 L3D1 NP 幼虫的 Plutella xylostella hemocoel（菱背蛾或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等，J. of General Virology，2016，97：2780-2796；DOI 10.1099/jgv.0.000560   关联

 

 早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel   双链RNA Metafectene PRO J. Zhou 等人，Pest Manag。科学，2020，76：712–720，DOI：10.1002/ps.5569   关联

 

 Plutella xylostella，三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO B. Park 等人，昆虫科学，2012，19：47–54，DOI 10.1111/j.1744-7917.2011.01421.x    

 

 甜菜夜蛾五龄幼虫（L5）（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO J. Park 等人，PLoS ONE，2014，9(9)：e105717，doi：10.1371/journal.pone.0105717   关联

 

 小鼠混合神经元-神经胶质小脑培养物   质粒 K2转染系统    

 

 Rabitt (Lapine) 关节软骨细胞   质粒 Metafectene P. Orth 等人，Mol Biotechnol，2008 年 2 月；38(2): 137-44    

 

 小鼠软骨细胞   质粒 Metafectene A. Jash 等人，PLoS ONE，2012，7(7)：e40828，doi：10.1371/journal.pone.0040828   关联

 

 甜菜夜蛾幼虫和蛹（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Ahmed 等人，《科学报告》，2019，9：4988，doi.org/10.1038/s41598-019-41541-2   关联

 

 小鼠异种移植肿瘤，由人类 Hep-2 细胞建立   质粒 Metafectene J. Zhou et al., Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Zazhi, Mar 2006; 20(6): 264-7    

 

 甜菜夜蛾四龄和五龄幼虫（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Ahmed 等人，无脊椎动物病理学杂志，2018，doi.org/10.1016/j.jip.2018.05.009    

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学    

 

 人原代 CD14+ 单核细胞   miRNA Metafectene SI S. Smith，JCI 洞察力，2018，3(15):e120798，doi.org/10.1172/jci.insight.120798   关联

 

 人永生化淋巴细胞细胞系（EBV永生化）   siRNA Metafectene PRO M. Pradas-Juni 等人，Mol. 内分泌学, 2014, 28(9): 1558-1570, doi: 10.1210/me.2014-1065   关联

 

 Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)   双链RNA Metafectene PRO AAM Mohamed 等人，PLoS ONE，2014，9(3)：e92680，doi：10.1371/journal.pone.0092680   关联

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500   关联

 

 小鼠永生化皮肤成纤维细胞（缺乏 Lap2-alpha）   质粒 Metafectene PRO E. Bartova 等，Protoplasma，2017，254：2035-2043，DOI 10.1007/s00709-017-1076-1  
细胞类型 细胞类型描述 货号 核酸/递送分子 产品 书目数据 PDF 关联

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学    

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500   关联

 

 Plutella xylostella 幼虫（菱形或卷心菜蛾）   质粒 Metafectene PRO W. Gad 等人，J. Gen. Virol.，2008 年 4 月；89: 931 – 938   关联

 

 L5 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel   双链RNA Metafectene PRO AA Baki 等人，Arch。昆虫生化。生理学，2019:100:e21524，doi.org/10.1002/arch.21524    

 

 甜菜夜蛾幼虫血腔（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Md. Sadekuzzaman 等人，Dev。和比较。Immunol., 2017, 77: 210-220, DOI: 10.1016/j.dci.2017.08.014    

 

 大鼠原代肝细胞   siRNA Metafectene PRO F. Damiano 等，Biochem。J., 2013, 449: 543–553, doi:10.1042/BJ20120906    

 

 大鼠（Wistar 新生儿）原代海马神经元   siRNA Metafectene PJ Kammermeier, J. Neurosci., 2008 年 8 月；28: 8560 – 8567   关联

 

 4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射   siRNA Metafectene S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109   关联

 

 人类皮肤黑色素瘤（FFPE 组织切片）   质粒 Metafectene PRO M. Venza 等人，Biochim。等生物物理学。学报，2015，1849：247-256；doi.org/10.1016/j.bbagrm.2014.12.004    

 

 小鼠肝细胞   质粒 Metafectene PRO S.-Y。Cai 等人，JCI 洞察力。2017, 2(5): e90780, doi.org/10.1172/jci.insight.90780    

 

 人胎儿皮质干细胞培养   质粒 Metafectene S. Couillard-Despres 等人，2014 年，US 8,841,430   googleapis.com/c6/aa/0f/25b3644975870e/US8841430.pdf” style=”box-sizing: border-box; text-decoration: none; color: rgb(51,153,204); padding-bottom: 0px; padding-top: 0px; padding-left: 0px; margin: 0px; padding-right: 0px; touch-action: manipulation” target=”_blank”>关联

 

 Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)   双链RNA Metafectene PRO Q. Wang 等人, PLoS ONE, 2013, 8(11): e79381, doi:10.1371/journal.pone.0079381   关联

 

 爪蟾XCT细胞   质粒 Metafectene PRO M. Dubinska-Magiera 等，Protoplasma，2016，253：943-956；DOI 10.1007/s00709-015-0861-y   关联

 

 Plutella xylostella，早期三龄幼虫（菱背蛾或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO 阿里先生等人，无脊椎动物病理学杂志，2012，110：389–397，doi.org/10.1016/j.jip.2012.05.003    

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO JS Park 等人，BMC Res Notes，2011 年 1 月；4:8    

 

 Plodia interpunctella 幼虫（印度粉蛾）   双链RNA Metafectene PRO G. Deok Han 等人，Pesticide Biochem。和生理学，2017 年 11 月，143：48-56，doi.org/10.1016/j.pestbp.2017.09.010    

 

 小鼠足细胞   siRNA K2转染系统 F. Kliewe 等人，科学报告，nature.com，7：9916，DOI：10.1038/s41598-017-10116-4   关联

 

 Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Z. Guo 等人，2015，PLoS Genet 11(4)：e1005124。doi:10.1371/journal.pgen.1005124   关联

 

 从新生儿包皮中分离的人角质形成细胞   siRNA Metafectene S. Bruche，博士论文，2014，伦敦帝国理工学院   关联

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO A. Al Baki 等人，Pest Manag。科学，2020，76：1020–1030，DOI：10.1002/ps.5612   关联

 

 Tribolium castaneum（晚龄幼虫的血腔）   质粒 Metafectene PRO R. Hepat 等人，J. Virol.，2013 年 10 月，第 87 卷，第 20 期，11223–11230   关联

 

 L5D1 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel   双链RNA Metafectene PRO MA Al Baki 等人，公共​​科学图书馆 ONE，2018 年，13 (10)：e0204935，doi.org/10.1371/journal。pone.0204935   关联

 

 4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射   siRNA Metafectene S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109   关联

 

 晚二龄幼虫小菜蛾血腔   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017    

 

 小鼠培养的海马神经元   质粒 Metafectene PRO A. Schneider, 论文, 2018, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg  

 

 

 

 

Cygnus产品及应用选择指南

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Cygnus产品及应用选择指南

Cygnus产品及应用选择指南

:

       部分药品来源于生物组织，但产量有限，所以其价格十分昂贵。微生物/细胞生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。利用基因工程将合成相应药物成分的基因导入细胞内，让其产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。

                                           基因工程图

                      

 

        基因工程大大改变了现有制药生产的状况，但是基因工程产品中残留的宿主细胞蛋白是影响制品纯度的重要因素,反复使用含宿主细胞蛋白的基因工程制品有可能引起机体的过敏反应。目前应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程主要采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）作为宿主细胞。因制品中细胞蛋白残留量低 ,用常规的理化方法无法检测,为此需要建立细胞蛋白残留量测定方法,对半成品进行检定,从而更有效地保证制品的质量 ,提高制品的安全性。

        Cygnus technologies, Inc.是美国一家专门从事生物工程和制药过程中残留物检测的一系列产品。生物制品生产过程中存在许多影响产品质量的残留物，诸如特殊重组表达系统中宿主细胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的残留以及生物制品加工过程中培养物残留的污染物。公司提供了广泛而灵敏度*的一系列用于检测生物工程残留物的产品，

        Cygnus公司检测产品覆盖了常用于基因工程的培养细胞以及一些用于细胞培养的添加物。CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary），该细胞具有不死性，可以传代百代以上，是目前生物工程上广泛培养的细胞。*批准应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种，其中只有一种（乙肝疫苗）是由酵母菌生产的，其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的，大肠杆菌不能形成有活性的二聚体（如白介素2），也不具有糖基化的功能（如EPO），而CHO却具有如上的功能，因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中还有一个优点，该细胞属于成纤维细胞（fibroblast），是一种非分泌型细胞，它本身很少分泌CHO内源蛋白，因而检测起来很困难。

 

一、     Cygnus Elisa检测产品

        共有39种Elisa 检测试剂盒，包括原核、真核表达细胞宿主蛋白检测试剂盒，细胞培养残留物检测试剂盒等。

公司产品：

 货号  货名
 F015  CHO HCP ELISA kit（中国仓鼠卵巢细胞）
 F410

 E.coli HCP ELISA Kit（大肠杆菌）
 F140  Pichia pastoris HCP ELISA Kit（毕赤酵母）
 F030  BSA ELISA kit
 F050  Protein A ELISA kit
 F050H  Protein A-h ELISA kit （human IgG）
 F400  Protein A ELISA kit

 

1.CHO HCP ELISA kit（F015）

zui常用的用于检测中国仓鼠卵巢细胞宿主蛋白试剂盒。

1）CHO HCP ELISA kit（F015）盒子组成

 

2）操作流程（中文操作流程仅供参考，实验请参照原装英文说明书）

客户可以根据检测灵敏度的需要，选择其中一种检测方法。

 

两种操作方法的比较：

   Rapid protocol   High sensitivity protocol
 标准品  0,4,20,75,250ng/ml  0,1,4,20,75ng/ml
 检测耗时  2+1.5=3.5h  2+2+1.5=5.5h
 灵敏度  2 ng/ml   <500pg/ml

 

2. E.coli HCP ELISA kit（F410）

针对利用E.coli生产相关药物的客户，检测大肠杆菌宿主蛋白残留物的利器。

1）E.coli HCP ELISA kit（F410）盒子组成

2）操作流程（中文操作流程仅供参考，实验请参照原装英文说明书）

 

 

3. Pichia pastoris HCP ELISA kit（F140）

真核表达系统（毕赤酵母）宿主细胞残留物检测试剂盒。

1）Pichia pastoris HCP ELISA kit盒子组成

 

2）两种不同的操作流程

 

两种操作方法的比较：

   Rapid protocol  Standard protocol
 标准品  0,4,20,75,250ng/ml  0,1,4,20,75ng/ml
 检测耗时（h）  1+0.5=1.5  3+0.5=3.5
 灵敏度  <75 ng/ml  <0.3 ng/ml

 

4. BSA ELISA kit （F030）

细胞培养添加物BSA的检测试剂盒。

1）BSA ELISA kit （F030）盒子组成

 

2）操作步骤

 

5. Protein A的检测试剂盒

针对开发抗体药，检测纯化过程中残留的Protein A，也有其他相关应用，分为三款F050、F050H和F400，其中F400是产品，是灵敏度zui高、效果的检测Protein A的试剂盒。

1）三个试剂盒的组成

 

 

2）三个试剂盒的差别

 货号  标记系统  底物  灵敏度  检测对象  处理步骤
 F050  生物素，

AP偶联的抗体

  PNPP  120pg/mL  重组的Protein A  无热处理
 F050H  

生物素，

AP偶联的抗体

  PNPP  100pg/mL  人源化的Protein A  热处理
 F400  HRP  TMB  50pg/mL  重组修饰的Protein A  热处理

 

二、Cygnus WB检测产品

        WB也是检测宿主细胞蛋白的手段，Cygnus的WB kits里的抗体跟相应的Elisa Kits是一样的，WB kits里面包括酶标抗体、阳性抗原、酶底物和封闭浓缩液，Cygnus的WB产品共有11种。具体产品可以参照下列（http://www.cygnustechnologies.com/category/western-blot-kits.html

）

部分WB产品：

 货号  品名  种属性  对应的Elisa
 F415  E.coli HCP WB kit  Bacterial  F410
 F145  Pichia pastoris HCP WB kit  Yeast  F140
 F185  SP2/0 HCP WB kit  Mammalian  F180
 F060  CHO HCP WB kit  Mammalian  F015

 

三、 Cygnus免疫学产品

       免疫学产品全部是Elisa和WB盒子里面的相关产品，提供抗体、抗原浓缩液（对照/标准品）、缓冲液和洗涤液等。

       大部分抗体为山羊和兔来源，偶有猪抗，抗体货号有前后缀，不同后缀代表的意思不同。Cygnus抗体共有117种，众多抗体产品参照下列*：http://www.cygnustechnologies.com/category/antibodies.html

抗体的前缀/后缀代表的意义：

       PA或者PG是IgG片段

       AF是亲和纯化的抗体

       AF-AP偶联了AP的亲和纯化抗体

       AF-B偶联了生物素的亲和纯化抗体

       AF-HRP是偶联了HRP的亲和纯化抗体

下面为部分抗体产品：

货号   货名  类型

规格
 A549  anti-A549 HCP  Goat, neat serum  1 ml
 A549-AF  anti-A549 HCP  Goat, affinity purified  1 mg
 A549-PA  anti-A549 HCP  Goat, IgG fraction

 1 ml
 C0016AF-HRP  anti-CHO HCP  Goat , affinity purified:HRP  1 mg
 C0016  anti-CHO HCP  Goat, neat serum  1 ml
 AP117  anti-E.coli HCP  Goat, affinity purified  1 mg
 AF117B  anti-E.coli HCP  Goat,affinity purified:biotinylated  1 mg
 PI-49  anti-P. pastoris HCP  Goat, neat serum  1 ml
 PI-49AF-AP  anti-P. pastoris HCP  Goat,affinity purifed:alkaline phosphatase labeled  1 ml

日本JCRB细胞保藏中心细胞订购指南

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日本JCRB细胞保藏中心细胞订购指南


JCRB Cell Bank

日本JCRB细胞保藏中心（JCRB细胞库）成立于1985年，JCRB保藏中心通过了BS EN ISO 9001:2008认证，提供了近1481种细胞株和细胞系。JCRB细胞库专注于收集人类和动物的各种培养细胞，包括癌症和转基因细胞。JCRB的细胞资源被分发给日本和世界各地的研究人员。这些细胞经过了充分的微生物污染、病毒污染和交叉培养污染检测，均验证为合格细胞株。一些细胞经过了核型和/或细胞表面标记特征鉴定。JCRB一直致力于开发细胞培养和质量控制的新方法，以支持药物科学的医学基础研究。


JCRB


全称：日本JCRB细胞保藏中心、日本JCRB细胞库

链接：https://cellbank.nibiohn.go.jp/english/

细胞查询链接：https://cellbank.nibiohn.go.jp/english/cellsearch_e/


细胞价格货期


·单个细胞株：15000 RMB。

·多个细胞株：由于细胞价格中较大部分比例来自于进口相关成本（前置审批、国际干冰运输、清报关费用），因此采购多个细胞株可大大降低单株细胞成本。

·货期：审批单过后4-6周  



细胞订购流程：


· 动物C级：报价–合同–向厂家下单–厂家1-2周给发票-付款给厂家-厂家收到款后确定发货时间（每周一发货）—联系物流取货–到货报关-海关上门查验–合格后运输到客户–运输到客户


· 人源C级： 审核资质-报价–合同付款–审批单（1-3周）–向厂家下单–厂家1-2周给发票-付款给厂家（1周左右到账）-厂家收到款后确定发货时间每周一发货—联系物流取货–报关–海关查验-到货—运输到客户


· 人源A及：审核资质-报价–合同付款–风评（大约一个月）–审批单（1-3周）–向厂家下单–厂家1-2周给发票-付款给厂家-厂家收到款后确定发货时间每周一发货—联系物流取货–报关–海关查验-到货–运输到客户—海关后期监管

细胞分级和资质

人源细胞株：江浙沪 北京湖北湖南…

·人源C级：广东等个别区域

·人源Aji：按当地管理规范来

动物源细胞株：

·动物C级：不需要审批单

·猴源及牛源细胞株：厂家不能出口

·动物C级：客户不需要任何资质

·人源C级：出入境特殊物品卫生检疫审批资质

·人源A及：出入境特殊物品卫生检疫审批资质 二级实验室资质


细胞进口材料

·动物C级：金畔准备（中英文 COA MSDS 说明书 书 厂家合同 客户合同 ） 

        客户准备（FORM A ）

·人源C级：金畔准备（中英文 COA MSDS 说明书 书 厂家合同 客户合同 伦理道德证书）

        客户准备（情况说明 科研方案，清关协议 FORM A）

·人源A及：金畔准备（产品标识及产品包装的说明 来源说明 中英文 COA MSDS 说明书 书 厂家合同 客户合同 伦理道德证书）

       客户准备（病原微生物实验室安全操作规规程 样品接收和消毒规程 二级病原微生物实验室备案表 项目书 医废处理协议  

       运输资质 情况说明 科研方案，清关协议 FORM A ） 货运公司准备（危险品运输人员资质  运输资质 ）  

这些资料可能和客户所在地管理不一样而有所变化


细胞运输及投诉：

·运输：JCRB细胞全程干冰运输，为保证质量优先选用世递

·投诉率：金畔代理5年JCRB细胞，除2022年疫情上海封城，其他时间0投诉

·投诉流程：从金畔购买的细胞有真实质量问题，金畔100%保证解决


特别提醒：

·很多细胞有一些特殊情况 如无法出口，培养特殊，来源特殊，及使用受限…..请参考Important Notice(s) 。

·本公司作为日本JCRB细胞库在中国境内正规代理商， 为保障您使用权益，请选择正规途径购买JCRB细胞产品，以免产生不必要的法律纠纷。

·动物C级 受海关二次查验时间不确定性，可能会影响货期

·人源A及 产品将由货运公司直接送货给您，收到细胞后请不要开箱，请联系海关进行监管，监管后再开箱使用，以免造成法律风险


书：



JCRB常卖产品：

货号 品名 规格 品牌
IFO50268 EHS 1vial JCRB
JCRB0822 NUGC-3 1vial JCRB
JCRB0156 JCRB0156 [KHYG-1] 1vial JCRB
JCRB0820 EBC-1 1vial JCRB
JCRB0821 NUGC-2 1vial JCRB
JCRB0080 LU99 1vial JCRB
JCRB1043 OVISE 1vial JCRB
JCRB1812 MOLM-14 1vial JCRB
JCRB0252 MKN1 1vial JCRB
JCRB0622 HSC-2 1vial JCRB
JCRB0623 HSC-3 1vial JCRB
IFO50317 RKN 1vial JCRB
JCRB1045 OVMANA 1vial JCRB
JCRB1228 NCC-StC-K140 1vial JCRB
JCRB0172 RMG-1 1vial JCRB
JCRB1142 HEC-265 1vial JCRB
JCRB1142 HEC-265 1vial JCRB
IFO50320 RMUG-S 1vial JCRB
JCRB1120 HEC-59 1vial JCRB
JCRB1048 OVTOKO 1vial JCRB
JCRB1009 RERF-GC-1B 1vial JCRB
JCRB0834 NUGC-4 1vial JCRB
JCRB0176 RKN 1vial JCRB
JCRB0062 HEL 1vial JCRB
JCRB1020 RERF-LC-Ad1 1vial JCRB
IFO50321 GAK 1vial JCRB
JCRB1337 DL-40 1vial JCRB
JCRB1002 K562/ADM 1vial JCRB
JCRB1002 K562/ADM 1vial JCRB
JCRB0079 LU65 1vial JCRB
JCRB1196 KMS-20 1vial JCRB
IFO50355 ONS-76 1vial JCRB
JCRB1118 HEC6 1vial JCRB
JCRB0183 QGP-1 1vial JCRB



proaxsis PA004-1操作指南

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proaxsis PA004-1操作指南

proaxsis PA004-1操作指南

NEATstik®（10盒）

PA004-1（单个试剂盒）和PA004-10（10个试剂盒）

NEATstik®是一项快速的即时护理测试，可以监测痰液样本中活性中性粒细胞弹性蛋白酶的水平。

NEATstik®通常以10个测试盒的形式提供。如果需要，可以提供单项测试，费用为£28英镑，另加运费和增值税（如果有）

 

  1. 预期用途

NEATstik®是一种一次性体外诊断试剂，用于定性检测痰液样本中的活性中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)。本产品仅供医疗保健专业人士使用。

 

  1. 背景

中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是一种丝氨酸蛋白酶，储存在中性粒细胞中直至活化和释放。NE有三种形式：作为活性酶、无活性酶原或抑制剂结合酶。活性NE是一种降解酶，在正常生理情况下，参与

在炎症和消除微生物感染中1。然而，在肺部疾病中，当发现高浓度的活性NE时，这种降解能力引起过度的组织降解，损伤气道壁有助于破坏性和恶性的炎症周期2。

痰中的活性NE是感染和炎症的已确定生物标志物，与炎性肺病的感染严重程度相关，包括但不限于囊性纤维化(CF)、慢性阻塞性

肺部疾病(COPD)和支气管扩张症3-5。持续监测痰液中这种临床上有用的生物标志物可能有助于这些肺部疾病的管理。

  1. 试验原理

NEATstik®利用ProteaseTag®技术特异性检测痰液样本中的活性NE。

NEATstik®由封装在塑料盒内的侧流试纸组成。试纸条由膜和垫组成，置于固体载体上，应用结合物和两条反应线：供试(T)线和对照线

(C)线。结合物是ProteaseTag®（旨在与活性NE特异性相互作用）和有色金颗粒的混合物。供试(T)细胞系由可检测NE的抗体和对照(C)细胞系可检测结合物组成。

样品稀释后，向NEATstik®的样品端口加入小体积，开始检测过程。稀释样本沿试纸移动，并与结合物相互作用。结合物中的ProteaseTag®将与样本中存在的活性NE结合，沿试纸上行并与供试品结合

(T)线。过量结合物将与对照(C)线结合。

检测线的外观确认了样品中存在的活性NE高于预先设定的阈值。

质控线的外观证实检测正确进行。

  1. 试剂盒组分

每个复合包装盒包含10个套件。

每个试剂盒包含：

密封箔袋中的1×NEATstik®侧流检测

1 xNEATstik®样本稀释缓冲液(20 mL)1 x痰液稀释罐

1 x双球吸管1 x刻度吸管1 x说明书

 

需要但未提供的材料

痰液收集罐称量秤或天平秒表/计时器

  1. 试验程序

收集样品

采集样本进行检测时，要求患者将痰液（不是唾液）咳入痰液采集壶（未提供）。建议立即检测样品。

样品制备

加入NEATstik®前，必须稀释痰液样本。

  1. 将痰液稀释罐的底部放在称量天平上。称量天平去皮重（零）。
  1. 将痰液稀释罐保持在称量天平上，使用抹刀（连接在痰液稀释罐的盖子上）将1-2 g痰液从痰液收集罐中转移到痰液稀释罐中。
  2. 记录转移痰液的重量(g)。痰液稀释罐应保持在称量天平上。
  3. 使用以下计算公式计算NEATstik®样品稀释缓冲液产生10倍稀释所需的量：

痰液重量 = g

x 9

= g NEATstik®

样品稀释缓冲液

  1. 称量天平去皮重（零）。
  2. 使用刻度移液管，将NEATstik®样本稀释缓冲液转移至痰液稀释罐中，直至计算重量。
  3. 将盖子放在痰液稀释罐上，并确保其拧紧。
  4. 倒置痰液稀释槽，使痰液与缓冲液混合

10次。

  1. 检测方法（续）

执行测试

  1. 从铝箔包装中取出NEATstik®，置于水平面上，观察窗朝上。
  2. 取下痰液稀释罐的盖子。
  3. 使用双球吸管吸取稀释痰液样本。尽量确保

读取结果和质量控制

如果检测成功完成，对照(C)线将以红线显示（颜色强度可能不同）。如果质控(C)线不可见，则结果无效，应使用新样本和新的检测试剂盒重复检测。

如果TEST(T)线可见，则确认痰液样本中存在大于预设阈值的活性NE。

  1. 性能特征

使用58份冷冻痰液样本评估NEATstik®检测的性能。使用ProteaseTag®Active NE免疫测定法(ProAxsis Ltd)定量测定活性NE。

  • 42份样本有痰液NE浓度

< 8µg/mL = 阴性

  • 16份样本有痰液NE浓度

> 8µg/mL = 阳性

该检测对16份NE定量高于8µg/mL的痰液样本中的16份给出了阳性结果（100%灵敏度），对42份NE定量低于8µg/mL的痰液样本中的36份给出了阴性结果（86%特异性）。

 

  1. 使用限制

仅用于稀释痰液样本

为获得准确结果，请遵循提供的说明

NEATstik®结果必须结合其他临床和患者进行评价

  1. 处置

痰液样本和使用的检测组分具有潜在生物危害性。根据当地临床废物指南适当处置使用过的检测试剂盒和痰液样本。

 

  1. 参考文献
  1. Pham,C.(2008)International Journal of Biochemistry&Cell Biology,40(6-7),1317-1333.
  2. Sandhaus,R.&Turino,G.(2013)COPD,10(S1):60-63.
  3. Sagel,S. et al(2012)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,186(9):857-865
  4. Mayer-Hamblett,N. et al(2007)美国呼吸与重症医学杂志，175:822-828
  5. Chalmers,J.D. et al(2016)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine 195:1384–1393.


 

仅溶液-无痰液“结块”。

医疗保健专业人员可获得的数据。

NEATstik®不能定量痰液样本中的活性NE。


 

 

  1. 定量活性中性粒细胞弹性蛋白酶
  1. 将样品应用于NEATstik®上的椭圆形样品端口。

 

  1. 读取结果前，等待10 min（使用定时器）。

 

如果TEST(T)线不可见，痰液样本中存在的任何活性NE均不超过预设阈值。

 

  1. 故障排除

未出现对照(C)线

试验无效。使用新套件重复。

 

  1. 警告和注意事项

请勿使用超过有效期的组件

请勿混合不同试剂盒批次的组分

本检测仅供一次性使用。请勿重复使用

处理痰液样本和进行检测时，应穿戴合适的防护。

 

  1. 储存

在室温下储存试剂盒。

如果在推荐的储存条件下，每个检测试剂盒仍保存在原始包装中，则可使用至标签上打印的失效日期。

从密封袋中取出后，应立即使用NEATstik®侧流试验。

NEATstik®样本稀释缓冲液应在开瓶后立即使用。

 

ESI BIO VascuNet故障排除指南

发表于由

ESI BIO VascuNet故障排除指南

 

 

 

ESI BIO的使命是成为客户信赖的合作伙伴，将科学发现转化为诊所。我们通过提供突破性的干细胞技术作为研究级和治疗级产品来实现这一目标，从研究到诊所的照明，以帮助我们的客户实现他们治疗疾病的目标。

ESI BIO建立在丰富的创新和科学的基础之上。我们于2000年在新加坡成立了ES Cell International，在那里我们通过制造个可翻译的临床级胚胎干细胞系来创建历史，以便分发给研究界。

 

ESIBIO现在开展业务Alameda CA. 我们是BioTime，Inc。拥有的以干细胞为基础的子公司的骄傲家族的成员，我们从中受益于的科学，知识产权和干细胞技术的深层来源。

ESI BIO   EM2202   VascuNet™故障排除指南

 

VascuNet™ Pericyte Co-Culture Assay

VascuNet™Pericyte Co-Culture Assay将HUVEC和周细胞结合在一个96孔板测定形式的共培养系统中。组分包括细胞，阴性对照，生长和含有补充剂的测定培养基。

SKU： EM2202

更临床相关的共培养测定

VascuNet™Pericyte Co-Culture Assay是一种新型血管生成模型，包括HUVEC和周细胞（PC-Ms），用于研究药物和治疗化合物对96孔板血管形成的影响。PC-M细胞源自使用ESI-017人胚胎干细胞系的专有分化方法。细胞和培养基成分经过严格的质量筛选，以确保重现性。网络维持长达四到六天，允许更广泛和临床相关的模型系统，用于研究化合物对管形成的影响。

特征

· VascuNet管网比其他系统更接近体内血管

· 允许对已建立的血管上的促血管生成化合物和抗血管生成化合物进行长期体外分析

· 周细胞是hESC衍生的，确保易于扩增和可重复的结果

由BioTime，Inc。的子公司ReCyte Therapeutics Inc开发

格式

96孔板

样本类型

小分子，重组蛋白，DNA / RNA构建体或条件培养基

分析时间

管网维持至少4天。

储存和稳定性

根据指示储存，所有套件组件在收到之日起至少可保存3个月。

组件

有关套件组件的完整列表，请下载EM-2202技术数据表

应用

筛选和评估促血管生成化合物或抗血管生成化合物

技术文件

产品支持

 VascuNet™Pericyte共培养分析方案
 VascuNet™故障排除指南
 EM-2202技术数据表

小册子
 VascuNet™Pericyte共培养分析产品说明书

参考

Gerhardt，H。和Betsholtz，C。（2003）血管生成中的内皮 – 周细胞相互作用。Cell Tissue Res 314：15-23。

汉密尔顿，NB，等。（2010）Pericyte介导的毛细血管直径调节：健康和疾病中神经的血管耦合的一个组成部分。Front Neuroenergetics 2：5。Stratman 

，AN，et al。（2009）血管生成管组装期间的周细胞募集刺激内皮基底膜基质形成。血液114：5091-5101。

von Tell，D.，et al。（2006）周细胞和血管稳定性。Exp Cell Res 312：623-629。

 

 

 

ESI BIO产品目录：

 

货号

品名

规格

品牌

GS310

HyStem® Hydrogel Kit

2.5 mL

ESIBIO

GS311

HyStem® Hydrogel Kit

7.5 mL

ESIBIO

GS1004

HyStem® Hydrogel Kit

12.5 mL

ESIBIO

GS310P

HyStem® Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

2.5 mL

ESIBIO

GS311P

HyStem® Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

7.5 mL

ESIBIO

GS312

HyStem®-C Hydrogel Kit

2.5 mL

ESIBIO

GS313

HyStem®-C Hydrogel Kit

7.5 mL

ESIBIO

GS1005

HyStem®-C Hydrogel Kit

12.5 mL

ESIBIO

GS312P

HyStem®-C Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

2.5 mL

ESIBIO

GS313P

HyStem®-C Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

7.5 mL

ESIBIO

GS314

HyStem®-HP Hydrogel Kit

2.5 mL

ESIBIO

GS315

HyStem®-HP Hydrogel Kit

7.5 mL

ESIBIO

GS1006

HyStem®-HP Hydrogel Kit

12.5 mL

ESIBIO

GS314P

HyStem®-HP Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

2.5 mL

ESIBIO

GS315P

HyStem®-HP Hydrogel Kit w/ PEGSSDA

7.5 mL

ESIBIO

GS1007

HyStem® Hydrogel UV QuickSet Kit

2.5 mL

ESIBIO

GS1008

HyStem® Hydrogel UV QuickSet Kit

7.5 mL

ESIBIO

GS450

PEGgel Kit

1 mL

ESIBIO

GS240

DG Water

10 mL

ESIBIO

GS241

DG Water

20 mL

ESIBIO

GS3007

Extralink® Vial

0.5 mL

ESIBIO

GS3006

Extralink® Vial

2.5 mL

ESIBIO

GS3009

Extralink® Lite Vial

0.5 mL

ESIBIO

GS3008

Extralink® Lite Vial

2.5 mL

ESIBIO

5050

Fibronectin

1 mg

ESIBIO

GS231

Gelin-S® Thiol-modified Gelatin

1 mL

ESIBIO

GS230

Gelin-S® Thiol-modified Gelatin

5 mL

ESIBIO

GS222

Glycosil® Hyaluronic Acid

1 mL

ESIBIO

GS220

Glycosil® Hyaluronic Acid

5 mL

ESIBIO

GS217

Heprasil® Hyaluronic Acid

1 mL

ESIBIO

GS215

Heprasil® Hyaluronic Acid

5 mL

ESIBIO

5010-D

Nutragen® Bovine Collagen

50 mL

ESIBIO

GS711

PEGDA

1 mL

ESIBIO

GS700

PEGDA

1 g

ESIBIO

GS705

PEGDA

5 g

ESIBIO

GS755

PEGSSDA

0.5 mL

ESIBIO

5020

PEPTITE-2000® RGD Peptide

5 mg

ESIBIO

5005-B

PureCol® Collagen

100 mL

ESIBIO

5007-A

VitroCol® Collagen

20 mL

ESIBIO

5051

Vitronectin

0.1 mg

ESIBIO

EM2203

ExoSense™ CD63 Exosome ELISA Kit

96 assays

ESIBIO

EM2202

VascuNet™ CoCulture Assay Kit

1 Kit

ESIBIO

ST11006

BioLiteTM SSEA-1 (DyLight 488) anti-Human/Mouse Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11008

BioLiteTM TRA-1-81 (DyLight 488) anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11023

Nestin anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11003

Oct4 anti-Human/Mouse Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11001

Sox2 anti-Human/Mouse Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11013

SSEA-1 anti-Human/Mouse Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11014

SSEA-3 anti-Human/Mouse Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11015

SSEA-4 anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11018

TRA-1-60 (PE) anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11016

TRA-1-60 anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST11017

TRA-1-81 anti-Human Antibody

100 µL

ESIBIO

ST12007

LIF, Mouse Recombinant

10 µg

ESIBIO

ST12008

LIF, Mouse Recombinant

100 µg

ESIBIO

ES-84

PureStem® 4D20.8, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-98

PureStem® E15, Meso-prx/latp Progenitor

ea

ESIBIO

ES-283

PureStem® 7PEND24, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-278

PureStem® 7SMOO32, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-250

PureStem® SK11, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-268

PureStem® MEL2, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-256

PureStem® SM30, NCr-fac Progenitor

ea

ESIBIO

ES-335

PureStem® ES-335 Meso-latp Progenitor

ea

ESIBIO

ES-100

PureStem® E72 BETATROPHIN+ Progenitor

ea

ESIBIO

ES-1001

PureStem® ES-1001 GDF11+ Progenitor

ea

ESIBIO

ES-184

PureStem® EN7 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-101

PureStem® ES-101 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-139

PureStem® ES-139 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-154

PureStem® ES-154 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-198

PureStem® ES-198 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-199

PureStem® ES-199 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-209

PureStem® ES-209, Meso-prx/latp Progenitor

ea

ESIBIO

ES-210

PureStem® ES-210, Ecto-ntu Progenitor

ea

ESIBIO

ES-236

PureStem® ES-236 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-170

PureStem® E44 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-196

PureStem® W10 Progenitor

ea

ESIBIO

ES-194

PureStem® Z11, Meso Progenitor

ea

ESIBIO

EM-1001

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k01

500 mL

ESIBIO

EM-1002

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k02

500 mL

ESIBIO

EM-1003

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k03

500 mL

ESIBIO

EM-1004

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k04

500 mL

ESIBIO

EM-1005

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k05

500 mL

ESIBIO

EM-1006

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k06

500 mL

ESIBIO

EM-1007

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k07

500 mL

ESIBIO

EM-1008

PureStem® Progenitor Growth Media, EPM k08

500 mL

ESIBIO

EM-2002

HyStem®-4D Chondrogenesis Differentiation Kit

1 Kit

ESIBIO

EM-2007

HyStem®-4D Differentiation Kit

1 Kit

ESIBIO

EM-2001

PureStem® Chondrogenesis Differentiation Kit

1 Kit

ESIBIO

EM-2006

PureStem® Choroid Plexus Differentiation Kit

1 Kit

ESIBIO

EM-2003

PureStem® Osteogenesis Differentiation Kit 01

1 Kit

ESIBIO

EM-2004

PureStem® Osteogenesis Differentiation Kit 02

1 Kit

ESIBIO

ST10035

LY411575

5 mg

ESIBIO

ST10008

PD0325901

2 mg

ESIBIO

ST10009

PD0325901

10 mg

ESIBIO

ST10010

PD0325901

415 µL, 10 mM

ESIBIO

ST10034

PD173074

2 mg

ESIBIO

ST10021

RepSox

5 mg

ESIBIO

ST10027

RG108

5 mg

ESIBIO

ST10024

SB203580

2 mg

ESIBIO

ST10012

SB431542

5 mg

ESIBIO

ST10013

SB431542

10 mg

ESIBIO

ST10014

SB431542

1.3 mL, 10 mM

ESIBIO

ST10025

SP600125

5 mg

ESIBIO

ST10015

Thiazovivin

2 mg

ESIBIO

ST10017

XAV939

2 mg

ESIBIO

ST10018

Y27632

2 mg

ESIBIO

ST10019

Y27632

10 mg

ESIBIO

ST10020

Y27632

625 µL, 10 mM

ESIBIO

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

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5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

INCYTO C-WellTM技术指南

发表于由

上海金畔生物INCYTO C-WellTM技术指南

上海金畔生物INCYTO C-WellTM技术指南

使用INCYTO C-WellTM的通用、高通量和大小可控的细胞球体培养方案

一般信息

本指南的目的：

C-WellTM技术指南包含有关C-WellTM细胞球体培养平台的信息。本指南提供了球体形成和试剂制备的完整方案。

储存和有效期：

室温下储存时，C-WellTM的有效期为36个月。

不要重复使用，否则会遇到以下问题：污染、细胞球体形成失败和富含蛋白质的表面。

请勿将C-WellTM储存在紫外线辐射环境中。

预期用途：

仅供研究使用。不适用于人类或动物的诊断或治疗用途。

 

C孔描述TM

C-WellTM：

C-WellTM是一个革命性的细胞球体培养平台，以高通量的方式生成各种类型的尺寸控制的细胞球体。使用培养细胞球体的技术是一种悬滴法。

每个悬滴中的环境聚集细胞，然后形成单个球体。但悬滴法有几个局限性。悬滴法的主要局限性是：“劳动强度”、“低通量”、“培养时间相对较短”、“无法获得额外的新鲜生长培养基”和“细胞球体大小不均匀”。

与悬滴法相比，C-WellTM具有以下优势

任何其他商业化球体培养平台：“由于易于获得培养基更换，延长培养期10-30天”、“通过控制细胞接种密度，某些应用的培养期极短，为2-3天”、“无直接细胞-细胞接触的共培养准备系统，例如Transwell小室”、“生成尺寸受控的细胞球体”、“由于无剪切应力结构，易于改变装置中的生长培养基”、“适用于各种细胞类型”和“无限通量（一个装置可获得361个细胞球体）”。

 

方法

使用C孔制备用于细胞球体培养的试剂和材料TM

  • 靶细胞生长培养基
  • 胰蛋白酶/EDTA或ACCUTASETM
  • 台盼蓝
  • 磷酸盐缓冲液(PBS)1X
  • 70%乙醇
  • 100%乙醇
  • 去离子水(DDW)，可选
  • 牛血清白蛋白(BSA)4%溶液，可选

使用C孔制备细胞球体培养设备TM

  • C-WellTM
  • 锥形管（15 mL或50 mL）
  • T75烧瓶或细胞培养皿
  • 细胞过滤器（100 μm孔径）
  • 皮氏培养皿（60 mm或100 mm，未处理）
  • 血细胞计数器（例如DHC-N01、INCYTO）
  • 移液器和吸头（1 mL和200 μL）
  • 血清移液器及吸头(10 mL)
  • 洁净工作台
  • CO2培养箱
  • 相差显微镜检查
  • 吸引器
  • 离心机
  • 酒精灯

A. C孔预处理TM 细胞接种前

  1. 将生长培养基、1X PBS（或DDW）和100%乙醇加热至室温。

生长培养基的推荐近似体积为14 mL/1器械，1X PBS为24 mL/1器械，100%乙醇为8 mL/1器械。

  1. 在超净工作台中拆除C-WellTM的包装。
  2. 使用无菌镊子，从一个外缘朝向另一个外缘将C-WellTM置于60 mm培养皿上，以防止C-WellTM和培养皿之间产生气泡。
  3. 向制备的平皿中加入8 mL 100%乙醇。
  4. 用1 mL移液器反复移液，轻轻去除微孔中的气泡。
  5. 在培养皿一角抽吸100%乙醇。请勿在每个微孔中抽吸溶液。
  6. 向培养皿中加入8 mL 1X PBS，再次去除气泡。
  7. 在培养皿一角抽吸1X PBS。请勿在每个微孔中抽吸溶液。
  8. 重复上述7、8步两次。
  9. 向培养皿中加入7 mL生长培养基，并充分去除气泡。
  10. 将培养皿置于培养箱中至少24小时。
  11. 用1 mL移液器反复移液，轻轻去除微孔中的气泡。
  12. 在培养皿一角吸出生长培养基，并在细胞接种前加入7 mL新鲜生长培养基。

B-1.靶细胞单细胞悬液的制备（贴壁细胞用）

  1. 将生长培养基和适当浓度的胰蛋白酶/EDTA溶液预热至37 ℃。
  2. 加入10 mL 1X PBS，轻轻清洗细胞培养瓶(T75)或培养皿(100 mm)。
  3. 吸取1X PBS溶液。
  4. 加入2 mL胰蛋白酶/EDTA溶液，并将烧瓶置于37℃CO2培养箱中1 ~ 2 min（取决于细胞类型）。
  5. 轻轻敲击烧瓶，观察细胞。大部分细胞应分离
  6. 用4 mL生长培养基或适当的中和溶液中和胰蛋白酶/EDTA处理的细胞悬液。
  7. 通过反复移液*分离细胞。
  8. 用血细胞计数器计数细胞数量（例如INCYTO C-Chip、DHC-N01）
  9. 在适当离心力下离心细胞悬液。
  10. 通过抽吸去除上清液。
  11. 将细胞团块重悬于生长培养基中。细胞悬液的终接种密度和终体积应分别为0.1 ~ 0.5 × 106个/mL和7 mL。这些值因细胞类型而异。

 

B-2.靶细胞单细胞悬液的制备（用于悬浮细胞）

  1. 将生长培养基和适当浓度的胰蛋白酶/EDTA溶液（可选）加热至37 ℃。
  2. 通过反复移液使细胞悬液均质化并解聚。
  3. 用血细胞计数器计数细胞数量（例如INCYTO C-Chip、DHC-N01）
  4. 在适当离心力下离心细胞悬液。
  5. 通过抽吸去除上清液。
  6. （可选）加入1 ~ 2 mL胰蛋白酶/EDTA溶液，置于37 °C CO2培养箱中1 ~ 2 min（细胞类型不同）。
  7. （可选）用2 ~ 4 mL生长培养基或适当的中和溶液中和胰蛋白酶/EDTA处理的细胞悬液（因细胞类型而异）。
  8. （可选）在适当离心力下离心细胞悬液。
  9. （可选）通过抽吸去除上清液。
  10. 将细胞团块重悬于生长培养基中。细胞悬液的终接种密度和终体积应分别为0.1 ~ 0.5 × 106个/mL和7 mL。这些值因细胞类型而异。

 

  1. 使用C-Well形成细胞球体TM
    1. 将生长培养基加热至37 ℃。
    2. 用1 mL移液器反复移液，轻轻去除微孔中的气泡。
    3. 吸出培养皿一角的生长培养基，加入7 mL细胞接种密度为0.1 ~ 0.5 × 106个/mL的细胞悬液
    4. 10 ~ 15 min后（因细胞类型而异），轻轻吸出细胞悬液，除去上清液细胞。
    5. 在培养皿一角加入7 mL生长培养基。
    6. 吸出混悬液，并在培养皿一角加入7 mL生长培养基。重复该步骤两次。确保该步骤结束时没有悬浮细胞是非常重要的。如果不是，这些悬浮细胞可能阻碍细胞球体的形成。
    7. 培养皿置37 °C CO2培养箱中孵育24小时。
    8. 每24小时更换一次培养皿中的生长培养基。
 
 

图1 MCF7球体的培养条件。细胞接种密度和清洗时间因细胞类型而异。应通过预实验确定适当的接种密度和洗涤时间。


 

 

图2 MCF7球体的形成。

 

 

 

图3 A549球体的形成。

 

 

图4 HepG2球体的形成。

 

 

图5小鼠神经干细胞(mNSC)球体的形成。与其他传统的球体培养方法相比，C-WellTM可以生成尺寸控制、形状均匀的细胞球体。

  1. 从C孔中分离细胞球体TM
    1. 将生长培养基加热至37 ℃。
    2. 用移液器直接吸取（带1 mL吸头）生长培养基至C-WellTM上。
    3. 重复上述步骤2，直至收集到大部分细胞球体。
    4. 轻轻移取细胞球体溶液。
    5. 将溶液添加到细胞过滤器的一个表面（顶部）。
    6. 翻转滤网，并将生长培养基添加到滤网的另一面（底部）。
    7. 将细胞球体铺板于未经处理的培养皿中。

现货ludger LT-KDMB-A1操作指南

发表于由

ludger LT-KDMB-A1操作指南

定量唾液酸释放和 DMB 标记试剂盒

唾液酸分析工作流程旨在满足生物制药唾液酸含量分析的法规要求，以以下内容：

  1. 药物唾液酸化的总体程度 – 每分子唾液酸残基的绝对定量（nmol/mg 蛋白质）

  2. Neu5Ac:Neu5Gc 的相对量

  3. O-乙酰化唾液酸的鉴定和相对百分比

  • 演讲： 定量唾液酸分析
    （或点击此处查看国语版）

  • 应用资料： 定量唾液酸分析
    （或点击此处查看国语版）

  • 产品指南：LT-KDMB-A1
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产品/订购信息：

用 DMB 释放和标记唾液酸：

  • LT-KDMB-A1

  • LudgerTag DMB 唾液酸释放和标记试剂盒

每个试剂盒适用于分析 22 个样品，并包含以下内容：

  • DMB 染料 (LT-DMB-01)

  • 乙酸 2 摩尔 (LT-ACETIC2M-01)

  • 乙酸中的巯基乙醇 (LT-MERCAPTO-01)

  • 连二亚硫酸钠（还原剂） (LT-DITHIO-01)

  • N-乙酰 神经氨酸 (Neu5Ac 或 NANA) — 定量标准 (CM-NEU-AC-01)

  • N- 羟乙酰神经氨酸 (Neu5Gc 或 NGNA) — 定量标准 (CM-NEU-GC-01)

  • 唾液酸参考组（包含 Neu5Ac、Neu5Gc、Neu5,7Ac2、Neu5Gc、9Ac、Neu5,8Ac2、Neu5,9Ac2 和 Neu5,x,xAc3（其中 x 是未知的乙酰位置））（CM-SRP-01）

配套产品：

标准和控制：

  • GCP-FET-50U-X4

  • 胎球蛋白糖蛋白 — 工艺标准

  • BQ-GPEP-A2G2S2-10U

  • LudgerBioQuant GPEP A2G2S2 糖肽——定量过程标准

  • CM-NEU5,9,AC2-01

  • 5 – N-乙酰基-9-O-乙酰基神经氨酸 (Neu5,9Ac2) — 参考标准

  • *CM-NEU-AC-01

  • N-乙酰 神经氨酸（Neu5Ac 或 NANA）——定量标准

  • *CM-NEU-GC-01

  • N- 羟乙酰神经氨酸（Neu5Gc 或 NGNA）——定量标准

  • *CM-SRP-01

  • 唾液酸参考面板——系统适用性和参考标准

  • * 套件中各包含 1 个，但如果您需要额外的复制品，可以单独订购。

高效液相色谱分析：

  • LS-R1-4.6×150

  • LudgerSep R1 HPLC 色谱柱（含有十八烷基硅烷涂层颗粒的疏水色谱柱）

超高效液相色谱分析：

  • LS-UR2-2.1×100

  • LudgerSep uR2 UHPLC 色谱柱（含有十八烷基硅烷涂层颗粒的疏水色谱柱）

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


 

海报

糖基标准品作为稳健可靠的糖蛋白分析的关键工具

Hendel J、Peel S、Spencer D
发表于： 第 29 届国际碳水化合物研讨会
，葡萄牙里斯本。2018年7月15-19日

获得英国化学学会《有机与生物分子化学》杂志颁发的化学生物学海报奖

唾液酸化：生物制药的关键糖基化质量属性

Hendel JL、Kozak RP、Morgan CL、Royle L
发表于：WCBP 2018：第 22 届生物技术健康产品监管和分析科学接口研讨会
，美国华盛顿特区。2018年1月30日至2月1日

生物制药中唾液酸的分析

Hendel J、Royle L、Kozak RP、Fernandes DL
发表于：
WCBP 2017：第 21 届生物技术健康产品监管和分析科学接口研讨会
，美国华盛顿特区。2017年1月24-26日

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ludger LT-MONO-96操作指南

发表于由

定量单糖释放和 2-AA（2-氨基苯甲酸）标记试剂盒

单糖分析是 ICH Q6B 生物药物表征指南中规定的监管要求。该信息可用于药物开发的所有阶段，作为确定糖基化类型（N-连接和/或 O-连接）和糖基化发生程度的方法。它还可用于证明制造过程中 QC 批次放行的批次之间的一致性。

Ludger 的单糖分析试剂盒使用方便、可靠，可用于定量常规单糖分析。（试剂盒足以进行 96 次分析）。

  • 通过弱酸水解从糖蛋白样品中释放中性和氨基单糖

  • 用 2-氨基苯甲酸 (2AA) 对释放的单糖进行荧光标记

  • 通过 (U)HPLC 分析对 2AA 标记的单糖与标准品（GlcN、GalN、Gal、Man、Glc、Fuc、Xyl）进行相对定量分析

 

INCYTO C-WellTM技术指南

发表于由

 

INCYTO

 

C-WellTM：

C-WellTM是一个革命性的细胞球体培养平台，以高通量的方式生成各种类型的尺寸控制的细胞球体。使用培养细胞球体的技术是一种悬滴法。

每个悬滴中的环境聚集细胞，然后形成单个球体。但悬滴法有几个局限性。悬滴法的主要局限性是：“劳动强度”、“低通量”、“培养时间相对较短”、“无法获得额外的新鲜生长培养基”和“细胞球体大小不均匀”。

与悬滴法相比，C-WellTM具有以下优势

任何其他商业化球体培养平台：“由于易于获得培养基更换，延长培养期10-30天”、“通过控制细胞接种密度，某些应用的培养期极短，为2-3天”、“无直接细胞-细胞接触的共培养准备系统，例如Transwell小室”、“生成尺寸受控的细胞球体”、“由于无剪切应力结构，易于改变装置中的生长培养基”、“适用于各种细胞类型”和“无限通量（一个装置可获得361个细胞球体）”。