可定性、定量检测动物组织、蜂蜜、牛奶等样品，采用硝基呋喃类代谢物四合一处理方法，衍生时间可短至3h,灵敏度0.05μg/kg。

一、概要
        呋喃唑酮（FurazoLidone）（又称痢特灵），属硝基呋喃类药物，为广谱抗生素，对革兰氏阳性及阴性菌均有一定抗菌作用。由于呋喃唑酮价格低廉且治疗效果好，所以被广泛应用于家禽、家畜、水产品的痢疾、肠炎、球虫病，以及火鸡黑头病的预防和治疗。但研究证明硝基呋喃类药物及其代谢物具有相当大的毒性，有致畸胎副作用，且能诱发癌症，这引起了人们高度重视。
        1990年7月欧盟颁布2377/90/EEC条例，将硝基呋喃类药物及其代谢产物列为A类禁用药物，我国农业部文件:农牧发[2002]1号规定食品性动物中呋喃唑酮为不得检出。
        本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
        本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被呋喃唑酮代谢物抗原，样本残留的呋喃唑酮代谢物和微孔条上预包被的抗原竞争抗呋喃唑酮代谢物抗体，加入酶标二抗后，经TMB底物显色，样本吸光度值与其残留物呋喃唑酮代谢物呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中呋喃唑酮代谢物的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测动物组织（鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉、肝脏）蜂蜜、牛奶等样品中的呋喃唑酮代谢物的残留量。
四、提供的材料与试剂
酶标板、标准液*6瓶、高浓度标准品100μg/kg、呋喃唑酮代谢物抗试剂、呋喃唑酮代谢物酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、呋喃唑酮代谢物浓缩样品稀释液、衍生化试剂
五、样品前处理步骤
（一）组织、蜂蜜前处理方法一（呋喃四合一方法，衍生16h）
称取均质后的样品, 分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，振荡；过夜孵育；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；加入乙酸乙酯，振荡；离心；取上层乙酸乙酯氮气流下吹干；加入样品稀释液和正己烷，充分混匀；离心；取下层水相用于分析。
（二）组织、蜂蜜前处理方法二（呋喃四合一方法，衍生3h）
称取均质后的样品, 分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，振荡；衍生2h；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；加入乙酸乙酯，振荡；离心；取上层乙酸乙酯于氮气流下吹干；加入样品稀释液和正己烷，充分混匀；离心；取下层水相用于分析。
稀释倍数：2
（三）牛奶前处理方法一（呋喃四合一方法，衍生16h）
取牛奶样品离心，吸除上层脂肪；取出去脂牛奶样品至离心管中；按要求加入配液；振荡混合，离心。取上清液至离心管中，分别加入盐酸溶液和1衍生化试剂，充分振荡；过夜孵育（大约16h）；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；再加入乙酸乙酯，用振荡器剧烈振荡；离心；取上层乙酸乙酯至试管中，氮气吹干；加入样品稀释液，涡动，加入正己烷，充分混匀；离心；取下层水相用于分析。
（四）牛奶前处理方法二（呋喃四合一方法，衍生3h）
取牛奶样品离心；取出去除脂肪牛奶样品至离心管中；按要求加入配液；振荡混合，离心；取牛奶的离心上清液至5离心管中，分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，充分振荡；衍生2h；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；加入乙酸乙酯，振荡；离心；取上层乙酸乙酯至试管中，氮气吹干；加入样品稀释液，涡动，再加入正己烷，涡动混匀；离心；取下层水相用于分析。
稀释倍数：2
六、检测步骤
1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号
5、加标准品/样本
6、洗板
7、显色
8、测定
七、结果判定
1、用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围(μg/kg)。
2、定量分析
八、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.05μg/kg
样本最低检测限：
组织、蜂蜜、牛奶样品检测下限…………………………0.1μg/kg
回收率：
组织 …………………………………………………… 90±10%
蜂蜜 ……………………………………………………85±10%
奶样 …………………………………………………… 90±10%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件：保存试剂盒于2~8℃。
保存期：该产品有效期为12个月。