普通RIPA裂解液(组织/细胞),索莱宝,R0020-100ml

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普通RIPA裂解液(组织/细胞),索莱宝,R0020-100ml

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索莱宝

·  别名 : 蛋白提取试剂盒

·  英文名称 : RIPA buffer

·  储存条件 : RIPA裂解液4℃保存,PMSF-20 ℃保存。至少1

·  单位 : 瓶

 

普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF100mM1.5ml

产品简介:RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。

使用说明 :

如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。

根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)

用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern和免疫沉淀等操作。

浓度
规格 100ml
保存 RIPA裂解液4℃保存,PMSF-20 ℃保存。至少1年

非变性组织/细胞裂解液,索莱宝,R0030-100ml

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非变性组织/细胞裂解液,索莱宝,R0030-100ml

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索莱宝

·  英文名称 : Native lysis Buffer

·  储存条件 : 4℃保存,有效期 1 年,PMSF置于-20℃保存

·  单位 : 瓶

 

非变性组织/细胞裂解缓冲液内含非离子型去垢剂,能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原抗体结合或酶学活性,因此适宜于进行免疫共沉淀。另外,有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点,这种情况应该使用非变性裂解。

使用说明:

根据使用量,取每 1ml 裂解液加入 10ul PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔加入 150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触,冰上放置裂解 5-10 分钟。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液,冰上放置裂解 5-10 分钟。期间可以用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)    用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

充分裂解后,将裂解后的样品 10000-14000g 离心3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGEWestern 和免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。

注意事项:

为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。裂解时间可根据实验要求进行优化处理。

非变性蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用 BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的 Triton X-100 等干扰物质,不能用 Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100ml
保存 4℃保存,有效期 1 年,PMSF置于-20℃保存

核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-100T

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核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-100T

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索莱宝

·  别名 : 细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒

·  英文名称 : Nuclear Protein Extraction Kit

·  储存条件 : 核/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF-20 ℃保存。

·  单位 : 瓶

 

产品简介: 本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂,释放出胞浆蛋白,再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106Hela细胞或40mg组织)。

规格:50T/100T

产品内容:

 核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-100T

保存:/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF-20 ℃保存。

 

操作方法:

裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

一、对于体外培养细胞:

1.根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mMPMSF需现用现加,若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸,可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM

2.对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS洗一遍,用细胞刮刀收集细胞,或用EDTA消化后吹打下细胞(最好不用胰酶硝化,以免胰酶消化目的蛋白)。500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清留下沉淀备用。

3.对于悬浮细胞:用PBS洗一遍,500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清,留下细胞沉淀备用。

4.每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl40mg)。

5.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长),必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。

6.冰浴10分钟。

7.最高转速剧烈涡旋10秒,4 1200016000g离心10分钟。

8.上清即为抽提得到的细胞浆蛋白,立即吸取上清至预冷的样品管中备用,进行后续的PAGEWestern等实验,但蛋白浓度较低,可根据需要进行相应浓缩。

9.沉淀即为细胞核,要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染),加入50-100μl核蛋白抽提试剂。

10.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散,冰浴10分钟。

11.最高转速剧烈涡旋10秒,41200016000g离心10分钟。12.立即吸取上清至预冷的样品管中,此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。    对于组织样品:    把组织称重后,尽可能切成非常细小的碎片,按每50mg组织加入200μl-500μl PBS,用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液,500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清,收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5

注意事项:

1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号PC0020)测定蛋白浓度。

2.对于组织样品,本试剂盒适用于新鲜组织,对冻存组织抽提效果较差。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100T
保存 核/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF于-20 ℃保存。

核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-50T

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核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-50T

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索莱宝

·  别名 : 细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒

·  英文名称 : Nuclear Protein Extraction Kit

·  储存条件 : 核/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF-20 ℃保存。

·  单位 : 瓶

 

产品简介: 本核蛋白提取试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法。整个过程只需约60分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来。得到的蛋白可以用于Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂,释放出胞浆蛋白,再通过离心得到细胞核。然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。本试剂盒可以抽提50/100个样品(每个样品约2×106Hela细胞或40mg组织)。

规格:50T/100T

产品内容:

 核蛋白提取试剂盒,索莱宝,R0050-50T

保存:/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF-20 ℃保存。

 

操作方法:

裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

一、对于体外培养细胞:

1.根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mMPMSF需现用现加,若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸,可以在两种蛋白抽提液中加入DTT至终浓度0.5mM

2.对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS洗一遍,用细胞刮刀收集细胞,或用EDTA消化后吹打下细胞(最好不用胰酶硝化,以免胰酶消化目的蛋白)。500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清留下沉淀备用。

3.对于悬浮细胞:用PBS洗一遍,500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清,留下细胞沉淀备用。

4.每20μl细胞沉淀加入200μl浆蛋白抽提试剂(2×106个细胞沉淀的体积约20μl40mg)。

5.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长),必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。

6.冰浴10分钟。

7.最高转速剧烈涡旋10秒,4 1200016000g离心10分钟。

8.上清即为抽提得到的细胞浆蛋白,立即吸取上清至预冷的样品管中备用,进行后续的PAGEWestern等实验,但蛋白浓度较低,可根据需要进行相应浓缩。

9.沉淀即为细胞核,要完全吸尽残余的上清(避免细胞浆蛋白的污染),加入50-100μl核蛋白抽提试剂。

10.用移液器吹打或高速涡旋15秒(可适当延长)至沉淀完全分散,冰浴10分钟。

11.最高转速剧烈涡旋10秒,41200016000g离心10分钟。12.立即吸取上清至预冷的样品管中,此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。    对于组织样品:    把组织称重后,尽可能切成非常细小的碎片,按每50mg组织加入200μl-500μl PBS,用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液,500 g离心23分钟收集细胞,吸尽上清,收集沉淀。加入200μl浆蛋白抽提试剂后接上述步骤5

注意事项:

1.裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂干扰,不能用Bradford法测定蛋白浓度,可以选用本公司生产的BCA蛋白定量试剂盒(货号PC0020)测定蛋白浓度。

2.对于组织样品,本试剂盒适用于新鲜组织,对冻存组织抽提效果较差。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 50T
保存 核/浆蛋白抽提试剂4℃保存,PMSF于-20 ℃保存。

Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate 货号: 141-07145

Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate
Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate       货号: 141-07145Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate       货号: 141-07145Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate       货号: 141-07145

  • 产品货号:
    141-07145
  • 中文名称:
    Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate
  • 英文名称:
    Nitorilotriacetic Acid Trisodium Salt Monohydrate
  • CAS号:
    18662-53-8
  • 品牌:
    Wako

  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • 141-07145-500 g

    500 g

    ¥1140.00

    常用生化试剂

产品描述

福林酚(进口),索莱宝,F8010-50ml

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福林酚(进口),索莱宝,F8010-50ml

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索莱宝

·  别名 : Folin-Phenol

·  英文名称 : Folin-Phenol

·  储存条件 : 4℃避光保存,有效期1

·  外观(性状) : 澄清黄色液体

·  单位 : 瓶

 

福林酚用于蛋白质含量的测定,蛋白的颜色反应,浓度的测定.

蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)与福林酚反应,生成深蓝色复合物,蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。

福林酚适用于Lowry 方法进行总蛋白定量,Sigma 2N 国产为1N

别名:Folin-Phenol 外观:澄清黄色液体 R34 S26-36/37/39-45

浓度
规格 50ml
保存 4℃避光保存,有效期1年