上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 100ml |
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蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 100ml |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuromedin U-23, rat |
编码 | [117505-80-3] |
别名 | Neuromedin U-23, rat |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | YKVNEYQGPVAPSGGFFLFRPRN-NH2 |
序列(三字母缩写) | H-Tyr-Lys-Val-Asn-Glu-Tyr-Gln-Gly-Pro-Val-Ala-Pro-Ser-Gly-Gly-Phe-Phe-Leu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2?(trifluoroacetate salt) |
基本描述 | Endogenous neurotensin-like neuropeptide from porcine spinal cord that exhibits contractile activity on guinea-pig ileum and induces hypotension in rats. It also acts as a potent modulator of dopamine D2 receptor agonist binding. |
溶解度 | |
分子量 | 2643 |
化学式 | C124H180N34O31 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | N. Minamino et al., BBRC, 156, 685 (1984) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 17567 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 5 mg | 价格 | 1164 | |
Ex (nm) | 561 | Em (nm) | 712 | |
分子量 | 471.98 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:17567
产品名称:核酸染料LDS 751
CAS:181885-68-7
规格:5mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:471.98
外观:深绿色粉末
溶剂:水或DMSO
激发波长(nm):543
发射波长(nm):712
产品介绍
LDS 751是一种渗透性细胞核酸染料,它在dsDNA上在〜543 nm处具有峰值激发,但可以用488 nm激光很好地激发。它是DRAQ 5 的替代产品,由于其最大的最大波长发射波长(〜712 nm),可用于多色分析。与LDS 751的dsDNA结合后,荧光增强程度约为20倍。LDS-751不进入细胞核,并与线粒体膜结合。因此,当使用LDS 751分析活细胞和使用LDS-751探针检测细胞时需要清楚,它不可用于细胞核检测。噻唑橙(RNA染料)和LDS-751(DNA染料)组合物已被用于将网织红细胞与其他细胞群分离。 LDS 751也已用于从有核细胞中分离红细胞。
点击查看光谱
参考文献
Exciton-controlled fluorescence: application to hybridization-sensitive fluorescent DNA probe
Authors: Okamoto A, Ikeda S, Kubota T, Yuki M, Yanagisawa H.
Journal: Nucleic Acids Symp Ser (Oxf) (2009): 49
Hybridization-sensitive fluorescent probe for long-term monitoring of intracellular RNA
Authors: Kubota T, Ikeda S, Yanagisawa H, Yuki M, Okamoto A.
Journal: Bioconjug Chem (2009): 1256
Interaction of LDS-751 with the drug-binding site of P-glycoprotein: a Trp fluorescence steady-state and lifetime study
Authors: Lugo MR, Sharom FJ.
Journal: Arch Biochem Biophys (2009): 17
Flow cytometric assessment of homeostatic aging of reticulocytes in rats
Authors: Wiczling P, Krzyzanski W.
Journal: Exp Hematol (2008): 119
Comparison of sample fixation and the use of LDS-751 or anti-CD45 for leukocyte identification in mouse whole blood for flow cytometry
Authors: Maes ML, Davidson LB, McDonagh PF, Ritter LS.
Journal: J Immunol Methods (2007): 79
Determination of the formation of dark state via depleted spontaneous emission in a complex solvated molecule
Authors: Guo X, Wang S, Xia A, Su H.
Journal: J Phys Chem A (2007): 5800
Cell cycle synchronization of Cupriavidus necator by continuous phasing measured via flow cytometry
Authors: Fritsch M, Starruss J, Loesche A, Mueller S, Bley T.
Journal: Biotechnol Bioeng (2005): 635
Exciton mobility and trapping in a MALDI matrix
Authors: Setz PD, Knochenmuss R.
Journal: J Phys Chem A (2005): 4030
Interaction of LDS-751 and rhodamine 123 with P-glycoprotein: evidence for simultaneous binding of both drugs
Authors: Lugo MR, Sharom FJ.
Journal: Biochemistry (2005): 14020
Quantitative evaluation of isothiocyanates as substrates and inhibitors of P-glycoprotein
Authors: Barecki-Roach M, Wang EJ, Johnson WW.
Journal: J Pharm Pharmacol (2003): 1251
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名称 | Neuron Specific Peptide |
编码 | |
别名 | Neuron Specific Peptide |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHCVHPANCPGGLMVT (Cys24 and 30 bridge) |
序列(三字母缩写) | H-Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys-Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr-OH (trifluoroacetate salt)(Cys24 and 30 bridge) |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 3870.5 |
化学式 | C161H262N52O51S4 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | L.B. Buck et al., Cell, 51, 127 (1987) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 | (Cys24 and 30 bridge) |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 50ml |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 71511 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 5 mg | 价格 | 9180 | |
Ex (nm) | 663 | Em (nm) | 678 | |
分子量 | 1281.66 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 660琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有异的水溶。它们的亲水使有机溶剂的使用小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特相匹配。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应和选择。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。
点击查看光谱
点击查看实验方案
产品说明书
染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。
3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 | Cat#1029 |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 50ml |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuron Specific Peptide |
编码 | |
别名 | Neuron Specific Peptide |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHC VHPANCPGGLMVT |
序列(三字母缩写) | Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys- Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 3996.7 |
化学式 | C166H268N54O53S4 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 71561 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 10 mg | 价格 | 15300 | |
Ex (nm) | 663 | Em (nm) | 678 | |
分子量 | 1281.66 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 660琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有 异的水溶 。它们的亲水 使有机溶剂的使用 小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记 能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显 于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的 便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特 相匹配。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的 试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应 和选择 。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活 染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应 试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。
点击查看光谱
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产品说明书
染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定 染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。
3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 | Cat#1029 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuron Specific Peptide |
编码 | |
别名 | Neuron Specific Peptide |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHCVHPANCPGGLMVT(Cys24&Cys30 bridge) |
序列(三字母缩写) | Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys-Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr(Cys24&Cys30 bridge) |
基本描述 | Brain peptide that possesses both gastrointestinal and vasoconstrictor properties. |
溶解度 | |
分子量 | 3870.5 |
化学式 | C161H262N52O51S4 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | L.B. Buck et al., Cell, 51, 127 (1987) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 | (Cys24&Cys30 bridge) |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 50ml |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 71565 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 10 mg | 价格 | 15300 | |
Ex (nm) | 757 | Em (nm) | 779 | |
分子量 | 1416.83 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 750琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。
点击查看光谱
点击查看实验方案
产品说明书
染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定 染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。
3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 750马来酰亚胺 | Cat#1068 |
iFluor 750酰肼 | Cat#1088 |
iFluor 750 胺 | Cat#1079 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuronostatin-13 (human, canine, porcine) |
编码 | |
别名 | Neuronostatin-13 (human, canine, porcine) |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | LRQFLQKSLAAAA-NH2 |
序列(三字母缩写) | Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Ala-NH2 |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 0 |
化学式 | |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 25ml |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 71516 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 5 mg | 价格 | 9180 | |
Ex (nm) | 610 | Em (nm) | 628 | |
分子量 | 1253.52 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 610琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有异的水溶。它们的亲水使有机溶剂的使用小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特相匹配。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应和选择。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。
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染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定 染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。
3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 | Cat#1029 |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 25ml |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuronostatin-13 (mouse, rat) |
编码 | |
别名 | Neuronostatin-13 (mouse, rat) |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | LRQFLQKSLAAAT-NH2 |
序列(三字母缩写) | Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Thr-NH2 |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 0 |
化学式 | |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
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货号 | 71566 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 10 mg | 价格 | 15300 | |
Ex (nm) | 610 | Em (nm) | 628 | |
分子量 | 1253.52 | 溶剂 | DMSO | |
产品详细介绍 |
简要概述
iFluor 610琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。
琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。
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染色样本分析
操作步骤
1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):
将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。
注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。
注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液(溶液B):
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。
3.确定 染料/蛋白质比例(可选):
注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。
3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。
4.运行结合反应:
4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。
注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。
5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。
注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。
注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
产品名称 | 货号 |
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 | Cat#1023 |
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 | Cat#1031 |
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 | Cat#1029 |
上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml
产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。
技术参数:
材质 | 玻璃 |
颜色 | 无色 |
容积 | 25ml |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | Neuronostatin-19 (human, canine, porcine) |
编码 | |
别名 | Neuronostatin-19 (human, canine, porcine) |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | APSDPRLRQFLQKSLAAAA-NH2 |
序列(三字母缩写) | Ala-Pro-Ser-Asp-Pro-Arg-Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Ala-NH2 |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 0 |
化学式 | |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
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Reference | |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |