上海金畔生物科技有限公司提供具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432173C,可以访问官网了解更多产品信息。
具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432173C
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 305 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
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具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432173C
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 305 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-3 (1-6),Protease Activated Receptor-3 (1-6), human |
编码 | [320347-28-2] |
别名 | PAR-3 (1-6),Protease Activated Receptor-3 (1-6), human |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | TFRGAP |
序列(三字母缩写) | H-Thr-Phe-Arg-Gly-Ala-Pro-OH (trifluoroacetate salt) |
基本描述 | This peptide is a human PAR-3-derived tethered ligand, which does not activate PAR-3 but rather activates PAR-1 and PAR-2, either in Jurkat or in other PAR-expressing cells. PAR3 Tethered Ligand (Human) / Activates PAR1 and PAR2 This peptide is the 1-6 fragment of the protease-activated receptor 3 (PAR-3), which induces ERK activation in human carcinoma cells endogeneously expressing PAR1 and PAR3. This effect is completely abolished by single alanine substitution at positions 3, 4 and 6 in the peptide. PAR-3 allosterically regulates PAR1 signaling by receptor dimerization governing increased endothelial permeability. Targeting of PAR3 may mitigate the effects of PAR1 in activating endothelial responses such as vascular inflammation. However this peptide does not affect VEGF release or expression. |
溶解度 | |
分子量 | 647.73 |
化学式 | C29H45N9O8 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | H.Ishihara et al., Nature, 386, 502 (1997) K.K. Hansen et al., Immunology, 112, 183 (2004) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22771 | 存储条件 | 在2-8度冷藏保存, 避免光照 | |
规格 | 5000 Tests | 价格 | 6564 | |
Ex (nm) | 460 | Em (nm) | ||
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
我们的Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞生存力的工具。有多种参数可用于监测细胞活力。 Cell Meter™比色WST-8细胞定量试剂盒使用水溶性WST-8四唑盐来定量活细胞的数量。水溶性WST-8四唑鎓盐在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸盐存在下进行生物还原后可生成水溶性橙色甲臜染料。该试剂盒既方便又强大,具有混合读取格式。 WST-8溶液直接添加到测试池中,不需要预先混合组分。 WST-8四唑盐被细胞脱氢酶还原为橙色的甲maz产物,可溶于组织培养基。通过监测460 nm处的吸光度增加,甲maz的产生量与活细胞数量成正比。 WST-8溶液的出色稳定性和极小的细胞毒性使该试剂盒可用于需要长时间孵育(例如24至48小时)的测定。 Cell Meter™比色WST-8细胞定量试剂盒提供了一种灵敏的比色测定法,可用于测定增殖和细胞毒性测定中的活细胞数量。检测灵敏度高于任何其他基于四唑盐的检测方法,例如MTT,XTT或MTS等。
点击查看细胞培养方案
适用仪器
光吸收酶标仪 | |
吸收: | 460nm |
推荐孔板: | 透明底板 |
产品说明书
简要概述
如果将WST-8TM溶液保存在4°C并避光,其稳定性可超过一年。 将其存放在<-20°C的温度下以便更长的存储时间。
操作步骤
细胞增殖和细胞毒性检测
细胞计数检测
数据分析
从空白标准孔获得的读数(Abs(460 nm))用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值即可得到基线校正值。 然后,绘制标准读数,以获得标准曲线和方程式。 该方程式可用于计算细胞数/孔样品。 我们建议您使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下网址找到:https://www.aatbio.com/tools/linear-logarithmic-semi-log-regression-online-calculator
参考文献
miR-218 inhibits the proliferation of human glioma cells through downregulation of Yin Yang 1
Authors: Yong Gao, Laisheng Sun, Zicheng Wu, Chengmin Xuan, Junxia Zhang, Yongping You, Xincheng Chen
Journal: Molecular Medicine Reports (2017)
上海金畔生物科技有限公司提供具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432172C,可以访问官网了解更多产品信息。
具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432172C
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 254 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-3 (1-6)Protease Activated Receptor-3 (1-6) amide, human |
编码 | |
别名 | PAR-3 (1-6)Protease Activated Receptor-3 (1-6) amide, human |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | TFRGAP-NH2 |
序列(三字母缩写) | H-Thr-Phe-Arg-Gly-Ala-Pro-NH2?(trifluoroacetate salt) |
基本描述 | This peptide is a murine PAR-3-derived tethered ligand sequence which does not activate PAR-3, but rather activates PAR-1 and PAR-2, either in Jurkat T-cells or in other PAR-expressing cells. PAR3 Tethered Ligand (Murine) / Activates PAR1 and PAR2 |
溶解度 | |
分子量 | 646.75 |
化学式 | C29H46N10O7 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | K.K.Hansen et al., Immunology, 112, 183 (2004) Kaufmann, R. et al. Regul. Pept. 125, 61( 2005) McLaughlin, J. et al. PNAS 104, 5662 (2007) Arisato, T. et al. Cell. Mol. Life Sci. 60, 1420 (2003) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22780 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1000 Tests | 价格 | 2604 | |
Ex (nm) | 575 | Em (nm) | ||
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞毒性检测的试剂盒,Cell Navigator荧光成像试剂盒是一类荧光成像工具,用来标记亚细胞,细胞器;例如细胞膜、溶酶体、线粒体和细胞核等。Cell Navigator系列细胞器或亚细胞结构标记试剂盒提供最全的细胞及相关细胞器荧光标记方案,每种检测方案均能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光检测方法。这种高效的细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter比色法细胞毒性检测试剂盒 使用可溶于水的四唑染料。在电子载体(PMS)存在的细胞还原性条件下,该染料能产生水溶性的甲瓒。四唑盐经细胞脱氢酶变成橙色的甲瓒产物,它在培养基是可溶的。一定数目甲瓒产物与一定数目活细胞成比例。我们的试剂盒比其他基于四唑细胞毒性检测试剂盒(如MTT、XTT)提供更强有力操作方案。不需要预混合,我们试剂盒四唑盐染料直接加入细胞。此外,我们的试剂盒比其他四唑细胞毒性检测试剂盒(如MTT、XTT)具有更高的灵敏度。能广泛的使用多种设备平台。适应于多种的研究,例如细胞粘附、细胞趋化、多耐药性、细胞生存能力、凋亡和细胞毒性等。该试剂盒具备最佳的组分和实验操作流程,适合于增殖或者不增殖的细胞,并能用于悬浮细胞或者贴壁细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒。
适用仪器
光吸收酶标仪 | |
吸收: | 570/605nm |
推荐孔板: | 黑色透明 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1-24小时
4.监测A570nm / A605nm的吸光度比
操作步骤
1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。
2.对照设置
2.1阳性对照:含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。
2.2阴性对照:含有细胞但不含有测试化合物。
2.3载体对照:含有细胞和用于递送测试化合物的载体。
2.4非细胞对照:含有不含细胞的生长培养基。
2.5测试化合物对照:含有用于递送测试化合物[Hank’s平衡盐溶液(HBSS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)]和测试化合物的载体对照。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意:对于96孔板,将所有对照的总体积与100μL匹配,对于具有生长培养基的384孔板,将所有对照的总体积与50μL相匹配。
3.将测定溶液(组分A)预热至37°C。 在开始实验之前彻底混合。
4.向每个孔中加入20μL(96孔板)或10μL(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。
5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 不推荐极长的孵育时间,因为指示剂可以转化为无色化合物。
6.用吸光度读板仪在OD比率A570nm / A605nm下监测吸光度的增加。 OD570与OD605的比率用于确定每个孔中的细胞活力。 注意:细胞存活率与OD570增加和OD605减少成正比。
数据分析
从含有细胞的那些孔的值中减去从非细胞对照孔读取的背景吸光度。注意:空白孔的背景吸光度可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。
每个孔中的吸光度读数表示孔中的细胞数。
根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Rsample – Ro)/(Rctrl – Ro)
Rsample是在测试化合物存在下OD570 / OD605的吸光度比。
Rctrl是不存在测试化合物(载体对照)时OD570 / OD605的吸光度比。
Ro是OD570 / OD605的平均背景(非细胞对照)吸光度比。
从空白标准孔获得的读数(Abs)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算细胞数/孔样品。
图1.用Cell Meter 比色细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量反应。 将1至10个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。用SpectraMax plus(Molecular Devices)在570nm和605nm下测量吸光度强度。 OD570 / OD605的比例与所示的细胞数成比例。 |
参考文献
Detection of thalidomide embryotoxicity by in vitro embryotoxicity testing based on human iPS cells
Authors: Nobuo Aikawa, Atsushi Kunisato, Kenji Nagao, Hideaki Kusaka, Katsumi Takaba, Kinya Ohgami
Journal: Journal of pharmacological sciences (2014): 201–207
相关产品
产品名称 | 货号 |
Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒 | Cat#15900 |
Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒 | Cat#22781 |
上海金畔生物科技有限公司提供具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432171C,可以访问官网了解更多产品信息。
具内螺纹口层析柱(带砂板),欣维尔,C432171C
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 203 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-3 ,Protease Activated Receptor-3(1-6)) amide (mouse) |
编码 | [261521-21-5] |
别名 | PAR-3 ,Protease Activated Receptor-3(1-6)) amide (mouse) |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | SFNGGP-NH2 |
序列(三字母缩写) | H-Ser-Phe-Asn-Gly-Gly-Pro-NH2?(trifluoroacetate salt) |
基本描述 | This peptide is the amino terminus of the fourth protease-activated receptor (PAR4) after the cleavage at Arg47/Gly48 was tested for its ability to stimulate COS cells expressing PAR4. The peptide readily activated both wild-type and mutant PAR4 (R47A) at 500 碌M, whereas thrombin and trypsin only activate the wild-type PAR4. |
溶解度 | |
分子量 | 576.61 |
化学式 | C25H36N8O8 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | K.K.Hansen et al., Immunology, 112, 183 (2004) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22781 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 1000 Tests | 价格 | 2604 | |
Ex (nm) | 571 | Em (nm) | 584 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞毒性检测试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。有许多不同的参数都可以用来检验细胞活性。Cell Meter荧光法细胞毒性检测试剂盒提供了一种快速、简单、精确、均一的一种荧光分析法来对细胞活性进行检测。本检测法是基于蓝色、非荧光性染料刃天青,接受了来自活细胞线粒体呼吸链中释放的电子时,被还原成粉红色荧光染料(试卤灵);通过对其颜色、荧光的变化的观察来实现检测。产物试卤灵的总量与活细胞数量成直接比例关系。对细胞的增殖性和细胞毒性检测,用本试剂盒比用其他检测法(例如,MTT)具有更高的灵敏度;因为本试剂盒的组分非常适合于低细胞毒性分析,并且能进行长时间保温(例如24~48小时)。本检测法可以便捷地用于96和384微孔板分析中。其高灵敏度(<100 CHO细胞),非放射性和无需洗脱,这些特性使本试剂盒适用于细胞增值性和细胞毒性的高通量扫描筛选,与许多化合物不同的是,它可以用于各种不同的实验平台中。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂20ul,本试剂盒提供的试剂足以进行1000次检测;384微孔板中,每孔加试剂10ul,本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞毒性检测试剂盒。
点击查看光谱
适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 540nm |
发射: | 590nm |
cutoff: | 570nm |
推荐孔板: | 黑色透明 |
读取模式: | 底读模式 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液(组分A)
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1-24小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(底部读取模式)(截止= 570 nm)
操作步骤
1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中,并在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(例如24,48或96小时)。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。 对于96孔板,建议的总体积为100μL,对于384孔板,建议的总体积为50μL。
4.向每个孔中加入20μL/孔(96孔板)或10μL/孔(384孔板)的测定溶液(组分A)。 轻轻摇动平板30秒,混合试剂。
5.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-24小时,避光。 注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 由于刃天青可以转化为无色二氢呋喃,因此不推荐极长的孵育时间。
6.在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下用荧光酶标仪(底部读取模式)监测荧光强度。
根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比:
%细胞活力= 100×(Fsample-Fo)/(Fctrl-Fo)
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物(载体对照)时的荧光读数。
Fo是平均背景(非细胞对照)荧光强度。
从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。
图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液(组分A)在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器(BMG Labtech)在Ex / Em = 540 / 590nm(截止值= 570nm)下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系(R2 = 0.998)。 |
参考文献
A fluorometric study of relative ocular lens cytosensitivity to multipurpose contact lens solutions using the resazurin assay method
Authors: Oriowo MO.
Journal: Toxicol In Vitro (2006): 1548
A resazurin-based biosensor for organic pollutants
Authors: Tizzard AC, Bergsma JH, Lloyd-Jones G.
Journal: Biosens Bioelectron (2006): 759
Application of the resazurin microtitre assay for detection of multidrug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Algiers
Authors: Nateche F, Martin A, Baraka S, Palomino JC, Khaled S, Portaels F.
Journal: J Med Microbiol (2006): 857
Determination of the diagnostic value of the resazurin reduction assay for evaluating boar semen by receiver operating characteristic analysis
Authors: Zrimsek P, Kosec M, Kunc J, Mrkun J.
Journal: Asian J Androl (2006): 343
Development and application of a resazurin-based biomass activity test for activated sludge plant management
Authors: McNicholl BP, McGrath JW, Quinn JP.
Journal: Water Res. (2006)
Development of resazurin microtiter assay for drug sensibility testing of Trypanosoma cruzi epimastigotes
Authors: Rolon M, Vega C, Escario JA, Gomez-Barrio A.
Journal: Parasitol Res (2006): 103
Evaluation of the resazurin microtiter assay for rapid detection of ofloxacin resistance in M. tuberculosis
Authors: Umubyeyi AN, Martin A, Zissis G, Struelens M, Karita E, Portaels F.
Journal: Int J Tuberc Lung Dis (2006): 808
Rapid susceptibility test for Mycobacterium tuberculosis to isoniazid and rifampin with resazurin method in screw-cap tubes
Authors: Coban AY, Cekic Cihan C, Bilgin K, Uzun M, Akgunes A, Cetinkaya E, Durupinar B.
Journal: J Chemother (2006): 140
Comparative evaluation of the nitrate reduction assay, the MTT test, and the resazurin microtitre assay for drug susceptibility testing of clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis
Authors: Montoro E, Lemus D, Echemendia M, Martin A, Portaels F, Palomino JC.
Journal: J Antimicrob Chemother (2005): 500
Detection of mitochondrial respiratory dysfunction in circulating lymphocytes using resazurin
Authors: Abu-Amero KK, Bosley TM.
Journal: Arch Pathol Lab Med (2005): 1295
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产品名称 | 货号 |
Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒 | Cat#22780 |
上海金畔生物科技有限公司提供层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432805,可以访问官网了解更多产品信息。
层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432805
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 610 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-4 (1-6)) amide |Protease Activated Receptor-4 (1-6) amide, human |
编码 | [245443-51-0] |
别名 | PAR-4 (1-6)) amide |Protease Activated Receptor-4 (1-6) amide, human |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | GYPGQV-NH2 |
序列(三字母缩写) | H-Gly-Tyr-Pro-Gly-Gln-Val-NH2 |
基本描述 | Protease-activated receptor-4 activating peptide derived from murine PAR-4. This peptide was able to cause rat platelet aggregation with an EC50 value of 40 碌M. Its effect on leucocyte rolling and adherence points at a role of PAR-4 in mediating proinflammatory processes. The family of at least seven transmembrane G protein coupled receptors includes at least four receptor subtypes (PAR1, PAR2, PAR3, PAR4). PAR4 activating peptides, GYPGKF-NH2 and AYPGKG-NH2, produce concentration dependent contractile effects on the muscle. |
溶解度 | |
分子量 | 618.69 |
化学式 | C28H42N8O8 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | M.D.Hollenberg et al., Can. J. Physiol. Pharmacol., 77, 458 (1999) M.Tognetto et al., Br. J. Pharmacol., 139, 21 (2003) M.D.Hollenberg and S.Houle, Swiss Med. Wkly., 135, 425 (2005) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22785 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 500 Tests | 价格 | 2604 | |
Ex (nm) | 360 | Em (nm) | 445 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 *蓝色荧光* 使用一种专属型染料,一旦进入活细胞中,其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物,可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物,产生具有强烈荧光的亲水性产物,并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系,因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料,且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中,例如微孔板分析,免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用,包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂100ul,本试剂盒提供的试剂足以进行500次检测;384微孔板中,每孔加试剂25ul,本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。
适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 360nm |
发射: | 450nm |
cutoff: | 420nm |
推荐孔板: | 黑色透明 |
读取模式: | 底读模式 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Blue,AM工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
在室温或37°C孵育1小时
在Ex / Em = 360/450 nm(截止= 420 nm)监测荧光强度(底部读取)
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein Blue,AM原液:
将20μLDMSO(组分B)加入到CytoCalcein Blue,AM(组分A)的小瓶中,并充分混合以制备CytoCalcein Blue,AM储备溶液。 注意:20μL的CytoCalcein Blue,AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时,密封管。
2.工作溶液配制
将全部内容物(20μL)的CytoCalcein Blue,AM储备溶液加入10mL测定缓冲液(组分C)中,并充分混合以制备CytoCalcein Blue,AM工作溶液。 这种CytoCalcein Blue,AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。 注意:如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白,应制备丙磺舒储备溶液,并加入到加样缓冲液中,最终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。
操作步骤
1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意:在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔(96孔板)和25μL/孔(384孔板)的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液。或者,细胞可以在无血清培养基中生长。
2.添加100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的CytoCalcein Blue,AM工作溶液。
3.将板在室温或37°C孵育1小时,避光。 (孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了最佳结果,孵育时间少于4小时)。注意:适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意:装载后请勿清洗电池。注意:对于非粘附细胞,建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。
4.用Ex / Em = 360 / 450nm(截止= 420nm)的荧光板读数器(底部读取)监测荧光强度。
数据分析
从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。
图1.用Cell Meter Cell Viability Assay Kit测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至5,000个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与100μL/孔的CytoCalcein Blue,AM染料 – 工作溶液在室温下孵育1小时。 用NOVOstar仪器(来自BMG Labtech)在Ex / Em = 360 / 450nm处测量荧光强度。 如所示,荧光强度与细胞数成线性关系(R2 = 1)。 |
参考文献
Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610
NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)
Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8
Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331
Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)
Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88
Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8
Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)
Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287
The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303
相关产品
产品名称 | 货号 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 | Cat#22786 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光 | Cat#22783 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测* | Cat#22787 |
上海金畔生物科技有限公司提供层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432804,可以访问官网了解更多产品信息。
层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432804
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 457 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-4 (1-6)) amide |Protease Activated Receptor-4 (1-6) amide, mouse |
编码 | [245443-52-1] |
别名 | PAR-4 (1-6)) amide |Protease Activated Receptor-4 (1-6) amide, mouse |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | GYPGKF-NH2 |
序列(三字母缩写) | H-Gly-Tyr-Pro-Gly-Lys-Phe-NH2?(trifluoroacetate salt) |
基本描述 | This peptide based on the proteolytically-revealed tethered ligand sequence of the murine proteinase-activated receptor-4 (PAR-4) was shown to cause platelet aggregation with an EC50 value of about 15 碌M. PAR-4 agonist peptide stimulates thromboxane production by human platelets with the maximal response to this agonist being approximately half of that observed after maximal thrombin stimulation. |
溶解度 | |
分子量 | 666.78 |
化学式 | C33H46N8O7 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | N.Vergnolle, J. Immunol., 163, 5064 (1999) M.D.Hollenberg and M.Saifeddine, Can. J. Physiol. Pharmacol., 79, 439 (2001) Fang, J. et al. Blood 106, 2671(2005) Mulè, F. et al. Gut. 53, 229 (2004) Sekiguchi, F. et al. Drug Design Rev. 1, 287 (2004) Faruqi, T. et al. J. Biol. Chem. 275, 19728 (2000) Greenberg, D. Biochem. 42, 2702 (2003) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432803,可以访问官网了解更多产品信息。
层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432803
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 305 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22787 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 200 Tests | 价格 | 2604 | |
Ex (nm) | 646 | Em (nm) | 659 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列试剂盒,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测* 使用一种专属型染料,一旦进入活细胞中,其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物,可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物,产生具有强烈荧光的亲水性产物,并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系,因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料,且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中,例如微孔板分析,免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用,包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中,每孔用试剂100ul,本试剂盒提供的试剂足以进行200次检测;384微孔板中,每孔加试剂25ul,本试剂盒提供的试剂足以进行800次检测。
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适用仪器
荧光酶标仪 | |
激发: | 635nm |
发射: | 670nm |
cutoff: | 665nm |
推荐孔板: | 黑色透明 |
读取模式: | 底读模式 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
准备含测试化合物的细胞溶液
取出介质
加入CytoCalcein™NIR工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
在室温或37°C下孵育1小时
在Ex / Em = 635/670 nm(截止= 665 nm)时读取荧光强度(底部读取模式)
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein™NIR储备溶液:
将20 µL DMSO(组分B)添加到CytoCalcein™NIR(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成CytoCalcein™NIR储备液。 注意:20 µL CytoCalcein™NIR储备液足以装满一块板。 避光。 为了存放,请将管子密封。
2.工作溶液配制
将20 µL CytoCalcein™NIR储备溶液添加到瓶中的测定缓冲液(10 mL,组分C)中并充分混合以制成CytoCalcein™NIR工作溶液。 注意:此CytoCalcein™NIR工作溶液适用于一块细胞板,在室温下至少可稳定2小时。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。
操作步骤
1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意:添加化合物之前不必洗涤细胞。但是,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔(96孔板)和25 µL /孔(384孔板)的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或抽吸后选择的缓冲液。或者,细胞可以在无血清培养基中生长。
2.从细胞中除去培养基。注意:加载CytoCalcein™NIR工作溶液之前,必须除去培养基。
3.加入100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的CytoCalcein™NIR工作溶液。
4.在室温或37°C下避光放置1小时。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。对于非贴壁细胞,建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟,然后制动。
5.使用荧光酶标仪(底部读取模式)在Ex / Em = 635/670 nm(截止= 665 nm)下监控荧光强度。
参考文献
Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610
NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)
Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8
Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331
Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)
Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88
Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8
Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
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Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)
Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287
The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303
相关产品
产品名称 | 货号 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光 | Cat#22783 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 | Cat#22785 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 | Cat#22784 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-4 (1-6)) |Protease Activated Receptor-4 (1-6), human |
编码 | [225779-44-2] |
别名 | PAR-4 (1-6)) |Protease Activated Receptor-4 (1-6), human |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | GYPGQV |
序列(三字母缩写) | H-Gly-Tyr-Pro-Gly-Gln-Val-OH (trifluoroacetate salt) |
基本描述 | This PAR-4 activating peptide caused secretion and aggregation of PAR-3 deficient mouse platelets. |
溶解度 | |
分子量 | 619.68 |
化学式 | C28H41N7O9 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | W.-F.Xu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 6642 (1998) H.Andersen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 11189 (1999) R.Kaufmann et al., J. Cancer Res. Clin. Oncol., 126, 91 (2000) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432802,可以访问官网了解更多产品信息。
层析柱,具内螺纹口,欣维尔,C432802
技术参数:
*注意:尽管我们采用的是厚壁玻璃材质,其安全系数比一般层析柱大大
加强,我们仍然推荐您在通风橱内操作此产品,并关上通风橱的玻璃门。
材质 | 玻璃 |
规格(mm) | 254 |
标准口 | #25 |
砂芯 | |
活塞 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
货号 | 22788 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 200 Tests | 价格 | 3924 | |
Ex (nm) | 360; 550 | Em (nm) | 450; 570 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
Live or Dead 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒,AAT Bioquest的Mycolight 细菌活力测定试剂盒可在革兰氏阳性和阴性细菌中提供细菌活力的双色荧光测定。该试剂盒利用我们的绿色荧光核酸染色剂MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时,MycoLight 绿色污渍通常会标记群体中的所有细菌(活的和死的)。相比之下,碘化丙锭只穿透膜受损的细菌,当两种染料都存在时,导致MycoLight 绿色染料荧光的减少。因此,使用MycoLight 绿色和碘化丙啶的适当混合物,具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光,而具有损伤膜的死亡或濒死的细菌 产生红色荧光。Mycolight 细菌活力测定试剂盒是监测细菌种群活力的强大工具,可作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm(FITC滤光片)和600-660nm(德克萨斯红色滤光片光片)处以488nm处(最常见的激发光源)激发荧光测定染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Live or Dead 细胞活性检测试剂盒。
适用仪器
荧光显微镜 | |
激发: | Texas Red(活),Cy5滤波片(活),DAPI滤波片(死) |
发射: | Texas Red(活),Cy5滤波片(活),DAPI滤波片(死) |
推荐孔板: | 黑色透明 |
荧光酶标仪 | |
激发: | 610nm,360nm |
发射: | 650nm,450nm |
cutoff: | 630,420nm |
推荐孔板: | 黑色透明 |
读取模式: | 底读模式 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物制备细胞
2.添加染料加工溶液
3.在室温或37°C孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 610/650 nm(截止= 630 nm,红色)和Ex / Em = 360/450 nm(截止= 420 nm,蓝色)或在荧光显微镜下观察(Texas red/Cy5通道 活细胞),(DAPI通道 死细胞)
工作溶液配制
将5μL的200X Cellbrite Red(组分A)和5μL的200X Nuclear Blue DCS1(组分C)加入1mL的测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备染料 – 工作溶液。 该染料加工溶液在室温下稳定至少1小时。 注意:由于最佳染色条件可能因细胞类型的不同而异,因此建议单独确定组分A和C的适当浓度。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。
操作步骤
1.根据标准方案准备细胞。 注意:我们用星形孢菌素(SS)在37℃下处理HeLa细胞4小时以诱导细胞凋亡。 详细信息请参见图1。
2.用100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的染料加工溶液替换生长培养基。
3.将染料加工溶液板在室温或37°C孵育30分钟至1小时,避光。
4.用HHBS,PBS或您选择的缓冲液洗涤细胞两次。
5.向细胞中加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的测定缓冲液(组分B)。
6.用荧光显微镜监测荧光信号,用德克萨斯红或Cy5过滤器检测活细胞,用DAPI过滤死细胞。 还可以使用荧光酶标仪(底部读取模式)在Ex / Em = 610 / 650nm(截止= 630nm,红色)和Ex / Em = 360 / 450nm(截止= 420nm,蓝色)下分析荧光强度。
数据分析
图1.用Live或Dead 细胞活力测定试剂盒*双荧光*(Cat#22788)标记的HeLa细胞的荧光图像。 将100,000细胞/孔/100μL的HeLa细胞在96孔黑壁/透明底板中接种过夜。 将细胞用0-1μM星形孢菌素(SS)在37℃处理4小时(A-D),或在乙醇(E)中固定,然后与染料加载溶液一起温育1小时。 荧光信号分别使用具有德克萨斯红或Cy5过滤器的荧光显微镜测量活细胞(红色)和用于坏死细胞的DAPI过滤器(蓝色)。(F)使用FlexStation®酶标仪(Molecular Devices)测量相应的荧光信号,底部读数模式为Ex / Em = 610/650(截止= 630nm,红色),Ex / Em = 360/450(截止= 分别为420nm,蓝色)。 |
参考文献
Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610
NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)
Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8
Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331
Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)
Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88
Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8
Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)
Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287
The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303
相关产品
产品名称 | 货号 |
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *绿色/红色双重荧光* | Cat#22789 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。
名称 | PAR-4 (1-6))|Protease Activated Receptor-4 (1-6), mouse |
编码 | [213018-42-9] |
别名 | PAR-4 (1-6))|Protease Activated Receptor-4 (1-6), mouse |
纯度 | 80%,90%,95%,98%,99% |
重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
序列(单字母缩写) | GYPGKF |
序列(三字母缩写) | H-Gly-Tyr-Pro-Gly-Lys-Phe-OH (trifluoroacetate salt) |
基本描述 | |
溶解度 | |
分子量 | 667.76 |
化学式 | C33H45N7O8 |
存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
注释 | |
Documents | |
Figures | |
Reference | M.L.Kahn et al., Nature, 394, 690 (1998) |
C端 | |
N端 | |
化学桥 |