多肽定制Protease – Activated Receptor – 1, PAR – 1 编码

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名称 Protease – Activated Receptor – 1, PAR – 1
编码
别名 Protease – Activated Receptor – 1, PAR – 1
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) TFLLRNPNDK-NH2
序列(三字母缩写) H-Thr-Phe-Leu-Leu-Arg-Asn-Pro-Asn-Asp-Lys-NH2?(trifluoroacetate salt)
基本描述
溶解度
分子量 1216.4
化学式 C54H89N17O15
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protease - Activated Receptor - 1, PAR - 1          编码
Figures Protease - Activated Receptor - 1, PAR - 1          编码
Reference B.D. Blackhart, K. Emilsson, D. Nguyen, W. Teng, A.J. Martelli, S. Nystedt, J. Sundelin,and R.M. Scarborough, J. Biol. Chem., 271, 16466 (1996)
C端
N端
化学桥

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382625C

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球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382625C

询价
欣维尔

产品简介:本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382625C

材质 玻璃
规格(mm) 254
标准口 35/20
砂芯
活塞

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法) 货号15258-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)    货号15258 货号 15258 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 400 Tests 价格 3924
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)是AAT Bioquest研发的检测NAD+/NADH的试剂盒。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD +)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP +)是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式,NAD +是NADH的氧化形式。 NAD形成NADP,通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADP用于合成代谢生物反应,例如脂肪酸和核酸合成,其需要NADPH作为还原剂。 在叶绿体中,NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。 通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。

传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来进行。 Amplite™荧光总NAD和NADH检测试剂盒为敏感检测NAD和NADH提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶循环反应中的NAD / NADH,其显着提高了检测灵敏度。 此外,该测定具有非常低的背景,因为其在红色可见范围内运行,这显着降低了生物样品引起的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite NAD+/NADH检测试剂盒。 

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)    货号15258

Amplite 比色NAD / NADH检测试剂盒提供灵敏的一步法检测,可在100μL检测体积(300 nM;图1)中检测少至30皮摩尔的NAD(H)。 可以以方便的96孔或384孔板进行检测。 其信号可通过光吸收酶标仪在~575nm或~570nm至~605nm的吸光度比下轻松读取,以提高测定灵敏度。

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 570/610nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

96孔板测定示例

概述

准备NAD / NADH反应混合物(50μL)

添加NADH标准品或测试样品(50μL)

在室温下孵育15分钟–2小时

检测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度

 

操作方法

1.准备NADH储备溶液:

将200μLPBS缓冲液加入到NADH标准品(组分C)的小瓶中,得到1mM(1nmol / L)NADH储备溶液。

注意:未使用的NADH储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

2.准备NAD / NADH反应混合物:

将10mL NAD / NADH缓冲液(组分B)加入NAD / NADH再循环酶混合物(组分A)的瓶中,并充分混合。

注意:NAD / NADH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NAD / NADH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

3.准备NADH标准品的系列稀释液(0至10μM):

3.1将10μL的NADH储备溶液(来自步骤1)加入到990L PBS缓冲液(pH 7.4)中,以产生10μM(10pmol / L)NADH标准溶液。

注意:稀释的NADH标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL 10μM NADH标准溶液进行1:3连续稀释,得到NADH标准品的3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM连续稀释液。

3.3如表1和2中所述,将含有NADH标准品和含NAD / NADH的测试样品的系列稀释液加入到黑色96孔板中。

注意:根据需要准备细胞或组织样本。

 

表1黑色96孔板中NADH标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

NS1

NS1

….

….

NS2

NS2

 

 

NS3

NS3

 

 

NS4

NS4

 

 

NS5

NS5

 

 

NS6

NS6

 

 

NS7

NS7

 

 

注意:NS = NADH标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

 

表2.每个孔的试剂组成

NADH Standard

Blank Control

Test Sample

Serial Dilutions*: 50 μL

PBS: 50 μL

50 μL 

注意:将连续稀释的NADH标准品(0.01μM至10μM)加入NS1至NS7的孔中,一式两份。 高浓度的NADH(例如,>100μM,最终浓度)可能由于NADH探针(对非荧光产物)的过度氧化而导致荧光信号降低。

 

4.在上清液反应中运行NAD / NADH测定:

4.1将50μL的NADH反应混合物(来自步骤2)加入NADH标准品,空白对照和测试样品(来自步骤3.3)的每个孔中,使得总NADH测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLNADH反应混合物。

4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时,避光。

4.3用Ex / Em = 540 / 590nm的荧光酶标仪检测荧光。

注1:也可将板的混合物转移到白色透明底板上,用吸光度酶标仪在576±5nm波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

注意2:对于NAD / NADH比率测量,建议使用试剂盒15263。

注意3:对于细胞的NAD / NADH检测,建议使用ReadiUse 哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *(货号:20012)裂解细胞。

 

数据分析

        空白孔中的荧光(仅用PBS缓冲液)用作对照,并从具有NADH反应的那些孔的值中减去。 NADH标准曲线如图1所示。

注意:荧光背景随时间增加,因此减去每个数据点的空白孔的荧光强度值是很重要的。

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)    货号15258

图1.使用NOVOStar酶标仪(BMG Labtech),在黑色96孔板中用Amplite 总NAD和NADH测定试剂盒测量NADH剂量反应。 在孵育1小时(n = 3)时可以检测到低至100nM(10pmol /孔)的NADH,而NADPH没有响应。

 

试剂应用文献

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Han, Xiaojuan and Tai, Haoran and Wang, Xiaobo and Wang, Zhe and Zhou, Jiao and Wei, Xiawei and Ding, Yi and Gong, Hui and Mo, Chunfen and Zhang, Jie and others
Journal: Aging cell (2016): 416–427

 

参考文献

Reduction of renal tubular injury with a RAGE inhibitor FPS-ZM1, valsartan and their combination in streptozotocin-induced diabetes in the rat
Authors: Davoud Sanajou, Amir Ghorbani Haghjo, Hassan Argani, Leila Roshangar, Nadereh Rashtchizadeh, Saeed Nazari Soltan Ahmad, Zahra Ashrafi-Jigheh, Saman Bahrambeigi, Farshid Asiaee, Jalil Rashedi
Journal: European journal of pharmacology (2019): 40–48

Functional analysis of the mitochondrial alternative oxidase gene (aox1) from Aspergillus niger CGMCC 10142 and its effects on citric acid production
Authors: Li Hou, Ling Liu, Hongfei Zhang, Lin Zhang, Lan Zhang, Jian Zhang, Qiang Gao, Depei Wang
Journal: Applied microbiology and biotechnology (2018): 1–15

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法)增强灵敏度 Cat#15275
Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(荧光法) 红色荧光 Cat#15257
Amplite NADH检测试剂盒(荧光法) 红色荧光 Cat#15261

说明书
Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法).pdf

多肽定制Protease Activated Receptor-2 (1-6), human 编码 [202933-49-1]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Protease Activated Receptor-2 (1-6), human
编码 [202933-49-1]
别名 Protease Activated Receptor-2 (1-6), human
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) SLIGKV
序列(三字母缩写) Ser-Leu-Ile-Gly-Lys-Val
基本描述
溶解度
分子量 615.78
化学式 C28H53N7O8
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protease Activated Receptor-2 (1-6), human           编码     [202933-49-1]
Figures Protease Activated Receptor-2 (1-6), human           编码     [202933-49-1]
Reference
C端
N端
化学桥

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382620C

上海金畔生物科技有限公司提供球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382620C,可以访问官网了解更多产品信息。
球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382620C

询价
欣维尔

产品简介:本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C382620C

材质 玻璃
规格(mm) 203
标准口 35/20
砂芯
活塞

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光 货号15280-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光    货号15280 货号 15280 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 422 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光是美国AAT Bioquest研发的检测NAD的试剂盒,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)及其氧化形式(NAD)是活细胞中发现的许多酶反应的必需辅助因子。 量化这些因子的产生或消耗是监测酶介导的反应或筛选这些酶反应的调节剂或底物的重要方法。 市场上有几种用于量化NADH或总NAD / NADH量的试剂盒,但是迄今为止在大量过量NADH存在下检测NAD是非常具有挑战性的,因为NAD在259 nm处具有其吸收峰且不发荧光, 使测量不实用。

Amplite 荧光NAD分析试剂盒可便捷,快速地检测NAD。 该试剂盒使用我们新开发的NAD传感器Quest Fluor NAD试剂直接测量NAD。 该试剂盒中使用的专有探针仅与NAD反应产生在Ex / Em = 420 / 480nm处荧光的产物,并且对NADH几乎没有响应。 该试剂盒可在100μL测定体积中检测少至30 nM的NAD,并在过量的NADH存在下监测0.3%的NAD产生。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且可以用于高通量筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的NAD检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 420nm
发射 480nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备NAD标准品或测试样品(50μL)

添加20μLQuestFluor NAD探针添加20μL

测定溶液在室温下孵育10-20分钟

添加15μL增强剂溶液

在室温下孵育10-20分钟

监测420/480 nm的荧光 

注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分。

 

操作步骤

1.准备NAD库存解决方案:

将500μlddH2 O加入到NAD标准品(组分D)的小瓶中以制备1mM NAD储备溶液。

注意:未使用的NAD储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20 ℃。

 

2.准备NAD标准品的系列稀释液(0至10μM):

2.1将10μLNAD储备溶液(来自步骤1)加入990L H2O或PBS缓冲液中以产生10M NAD标准溶液。

注意:稀释的NAD标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

2.2取200μL10μMNAD标准溶液,在H2O或PBS中进行1:3连续稀释,得到NAD标准品的10,3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM连续稀释液。

2.3如表1所述,将50μL系列稀释的NAD标准品和含有NAD的测试样品加入黑色/固体底96孔微孔板中:

 

表1在黑色/固体底96孔微孔板中的NAD标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

NS1

NS1

….

….

NS2

NS2

 

 

NS3

NS3

 

 

NS4

NS4

 

 

NS5

NS5

 

 

NS6

NS6

 

 

NS7

NS7

 

 

注1:NS = NAD标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

注2:将连续稀释的NAD标准品从10μM加到0.01μM加入NS1至NS7的孔中,一式两份。

 

3.运行NAD测定:

 

3.1将20μLQuestFluor NAD探针(组分A)溶液加入NAD标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中,充分混合。

3.2将20μL测定溶液(组分B)加入每个孔中,充分混合。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和10μLQuestFluor™NAD Probe和10μLAssaySolution。

3.3在室温下孵育反应10-20分钟,避光。

3.4向每个孔中加入15μL增强剂(组分C),使总NAD测定体积为105μL/孔,并在室温下孵育10-20分钟,避光。

注意:对于384孔板,添加7.5 uL增强剂。

3.5使用荧光板读数器在420/480 nm处检测荧光增加。

 

数据分析

        空白孔中的荧光(仅用H 2 O或PBS缓冲液)用作对照,并从具有NAD反应的那些孔的值中减去。 NAD标准曲线如图1所示。

Amplite NAD检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光    货号15280

图1.使用Germini酶标仪(Molecular devices),在96孔黑色/固体底板中用Amplite ™荧光NAD测定试剂盒测量NAD剂量反应。 A:NAD标准曲线,在孵育20分钟时可检测到低至30nM的NAD(n = 3)。 B:NAD和NADH响应的比较C:在溶液中存在100μMNADH的NAD标准曲线。 从孵育20分钟(n = 3)可以检测到从NADH转化的低至0.3%的NAD(~300nM)。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光 Cat#11403
Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11402
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11306

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多肽定制Protease Activated Receptor-2 (6-1) amide, human 编码 [245329-01-5]

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名称 Protease Activated Receptor-2 (6-1) amide, human
编码 [245329-01-5]
别名 Protease Activated Receptor-2 (6-1) amide, human
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) VKGILS-NH2
序列(三字母缩写) Val-Lys-Gly-Ile-Leu-Ser-NH2
基本描述
溶解度
分子量 614.79
化学式 C28H54N8O7
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protease Activated Receptor-2 (6-1) amide, human           编码     [245329-01-5]
Figures Protease Activated Receptor-2 (6-1) amide, human           编码     [245329-01-5]
Reference
C端
N端
化学桥

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381740C

上海金畔生物科技有限公司提供球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381740C,可以访问官网了解更多产品信息。
球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381740C

询价
欣维尔

产品简介:本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381740C

材质 玻璃
规格(mm) 457
标准口 35/20
砂芯
活塞

多肽定制Protein Kinase A Inhibitor (6-22), amide 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Protein Kinase A Inhibitor (6-22), amide
编码
别名 Protein Kinase A Inhibitor (6-22), amide
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) TYADFIASGRTGRRNAI-NH2
序列(三字母缩写) H-Thr-Tyr-Ala-Asp-Phe-Ile-Ala-Ser-Gly-Arg-Thr-Gly-Arg-Arg-Asn-Ala-Ile-NH2?(trifluoroacetate salt)
基本描述
溶解度
分子量 1868.1
化学式 C80H130N28O24
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protein Kinase A Inhibitor (6-22), amide          编码
Figures Protein Kinase A Inhibitor (6-22), amide          编码
Reference D.B. Glass et al., JBC, 264, 1457 (1989)
C端
N端
化学桥

Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光 货号15281-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光

Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光

Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光     货号15281 货号 15281 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 422 Em (nm) 466
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NADP检测试剂盒 (荧光法)蓝色荧光是美国AAT Bioquest研发的检测NADP的试剂盒,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD +)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP +)是活细胞中发现的许多酶反应的两个重要辅助因子。 NAD形成NADP,通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADP用于合成代谢生物反应,例如脂肪酸和核酸合成,其需要NADPH作为还原剂。在叶绿体中,NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。量化这些因子的产生或消耗是监测酶介导的反应或筛选这些酶反应的调节剂或底物的重要方法。市场上有几种用于量化NADPH或总NADP / NADPH量的试剂盒,但迄今为止在大量过量NADPH存在下检测NADP是非常具有挑战性的,因为NADP在260 nm处具有其吸收峰且不发荧光,使测量不实用。

Amplite 荧光NADP分析试剂盒可快速,快速地检测NADP。该试剂盒使用我们新开发的NADP传感器Quest Fluor NADP试剂直接测量NADP。该试剂盒中使用的专有探针仅与NADP反应产生在Ex / Em = 420 / 480nm处荧光的产物,并且对NADPH几乎没有响应。该试剂盒可在100μL测定体积中检测少至30 nM NADP,并在过量NADPH存在下监测0.3%NADP产生。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且可以用于高通量筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的NADP检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 420nm
发射 480nm
cutoff: 455nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备NADP标准品或测试样品(50μL)

添加20μLQuestFluor™NADP探针

添加20μL测定溶液

在室温下孵育10-20分钟

添加15μL增强剂溶液

在室温下孵育10-20分钟,监测420/480 nm的荧光

注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分。

 

操作步骤

1.准备NADP储备溶液:

将500μlddH2O加入到NADP标准品(组分D)的小瓶中以制备1mM NADP储备溶液。

注意:未使用的NADP储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20 ℃。

 

2.准备NADP标准品的连续稀释液(0至10μM):

2.1将10μL的NADP储备液(来自步骤1)加入到990L H2O或PBS缓冲液中以产生10M NADP标准溶液。

注意:稀释的NADP标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

2.2取200μL10μMNADP标准溶液,在H2O或PBS中进行1:3连续稀释,得到NADP标准品的10,3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM系列稀释液。

2.3如表1所述,将50μL系列稀释的NADP标准品和含有NADP的测试样品加入黑色/固体底96孔微孔板中:

 

表1黑色/固体底部96孔微孔板中NADP标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

NS1

NS1

….

….

NS2

NS2

 

 

NS3

NS3

 

 

NS4

NS4

 

 

NS5

NS5

 

 

NS6

NS6

 

 

NS7

NS7

 

 

注意1:NS = NADP标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

注意2:将连续稀释的NADP标准品(10μM至0.01μM)加入NS1至NS7的孔中,一式两份。

 

3.运行NADP测定:

3.1将20μLQuestFluor NADP探针(组分A)溶液加入NADP标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中,充分混合。

3.2将20μL测定溶液(组分B)加入每个孔中,充分混合。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和10μLQuestFluor™NADP探针和10μL分析溶液。

3.3在室温下孵育反应10-20分钟,避光。

3.4向每个孔中加入15μL增强剂(组分C),使总NADP测定体积为105μL/孔,并在室温下孵育10-20分钟,避光。

注意:对于384孔板,添加7.5 uL增强剂。

3.5使用荧光板读数器在420/480 nm处检测荧光增加。

 

数据分析

        空白孔中的荧光(仅用H 2 O或PBS缓冲液)用作对照,并从具有NADP反应的那些孔的值中减去。 NADP标准曲线如图1所示

Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光     货号15281

图1 使用Germini酶标仪(Molecular devices),在96孔黑色/固体底板中用Amplite 荧光NADP测定试剂盒测量NADP剂量反应。 A:NADP标准曲线,在孵育20分钟时可检测到低至30nM的NADP(n = 3)。 B:NADP和NADPH响应的比较C:在溶液中存在100μMNADPH的NADP标准曲线。 从孵育20分钟(n = 3)可以检测到从NADPH转化的低至0.3%的NADP(~300nM)。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法乙酰胆碱检测试剂盒 红色荧光 Cat#11403
Amplite 荧光法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11402
Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光 Cat#11306

说明书
Amplite NADP检测试剂盒(荧光法)蓝色荧光 .pdf

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381730C

上海金畔生物科技有限公司提供球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381730C,可以访问官网了解更多产品信息。
球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381730C

询价
欣维尔

产品简介:本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381730C

材质 玻璃
规格(mm) 305
标准口 35/20
砂芯
活塞

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381720C

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球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381720C

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欣维尔

产品简介:本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具砂板存储球闪式层析柱,欣维尔,C381720C

材质 玻璃
规格(mm) 203
标准口 35/20
砂芯
活塞

多肽定制Protein Kinase A Substrate 编码 [57836-10-9]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Protein Kinase A Substrate
编码 [57836-10-9]
别名 Protein Kinase A Substrate
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) GRGLSLSR
序列(三字母缩写) Gly-Arg-Gly-Leu-Ser-Leu-Ser-Arg
基本描述
溶解度
分子量 844.97
化学式 C34H64N14O11
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protein Kinase A Substrate           编码     [57836-10-9]
Figures Protein Kinase A Substrate           编码     [57836-10-9]
Reference
C端
N端
化学桥

Annexin V-mFluor Violet 510标记 货号20081-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Annexin V-mFluor Violet 510标记

Annexin V-mFluor Violet 510标记

Annexin V-mFluor Violet 510标记    货号20081 货号 20081 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 tests 价格 2604
Ex (nm) 412 Em (nm) 505
分子量 ~36000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Annexin V-mFluor Violet 510标记探针是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针,膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物,属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸(PS),其通常保持在细胞膜的内叶(细胞质侧)。 在细胞凋亡中,PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示,并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具,旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。

膜联蛋白V结合物在Ca2+存在下与凋亡细胞表面上的PS结合,它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此,我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用,以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Annexin V-mFluor Violet 510标记探针。

点击查看光谱 

产品说明书

分析方案

概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞

添加Annexin V结合物测定溶液

室温孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

 

1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞:

1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液:10mM HEPES,140mM NaCl和2.5mM CaCl2,pH 7.4。

1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

1.3离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中(来自步骤1.1)。

1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。

可选:在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭,用于坏死细胞。

1.6在室温下孵育30至60分钟,避光。

1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液(来自步骤1.1)以增加体积(参见下面的步骤1.8)。

1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度(参见下面的步骤2或3)。

 

2.使用流式细胞仪分析:

通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。

注意:粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人(见参考文献1和2)。

 

3.使用荧光显微镜分析:

3.1移取步骤1.6的细胞悬液,用膜联蛋白V结合测定缓冲液(来自步骤1.1)冲洗1-2次,然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液(来自步骤1.1)重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。

注意:对于粘附细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育(步骤1.6)后,用膜联蛋白V结合测定缓冲液(来自步骤1.1)冲洗1-2次,并将膜联蛋白V结合测定缓冲液(来自步骤1.1)加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后,细胞也可以在2%甲醛中固定,并在显微镜下观察。

3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞

 

参考文献

White light-induced cell apoptosis by a conjugated polyelectrolyte through singlet oxygen generation
Authors: Jiamei Liang, Pan Wu, Chunyan Tan, Yuyang Jiang
Journal: RSC advances (2018): 9218–9222

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Jack Coleman, Rui Liu, Kathy Wang, Arun Kumar
Journal: (2016): 77–92

 

相关产品

产品名称 货号
Annexin V-mFluor Violet 540标记 Cat#20082
Annexin V-mFluor Violet 450标记 Cat#20080
Annexin V-Cy7标记 Cat#20068

说明书
Annexin V-mFluor Violet 510标记.pdf

球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388060

上海金畔生物科技有限公司提供球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388060,可以访问官网了解更多产品信息。
球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388060

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欣维尔

产品简介本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388060

材质 玻璃
规格(mm) 610
标准口 35/20
砂芯
活塞

多肽定制Protein Kinase C (19-31) 编码 [121545-65-1]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Protein Kinase C (19-31)
编码 [121545-65-1]
别名 Protein Kinase C (19-31)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) RFARKGALRQKNV
序列(三字母缩写) Arg-Phe-Ala-Arg-Lys-Gly-Ala-Leu-Arg-Gln-Lys-Asn-Val
基本描述
溶解度
分子量 1543.84
化学式 C67H118N26O16
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protein Kinase C (19-31)           编码     [121545-65-1]
Figures Protein Kinase C (19-31)           编码     [121545-65-1]
Reference
C端
N端
化学桥

Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20108-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光     货号20108 货号 20108 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 3924
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞半胱天冬酶活性检测试剂盒基于半胱天冬酶的荧光抑制剂。这些抑制剂具有细胞渗透性和非细胞毒性。一旦进入细胞,半胱天冬酶抑制剂与活性半胱天冬酶共价结合。 Caspase-1主要参与促炎细胞因子的激活和细胞凋亡过程。已经证明胱天蛋白酶1对肽序列Tyr-Val-Ala-Asp(YVAD)具有底物选择性。该试剂盒使用FAM-YVAD-FMK作为半胱天冬酶1活性的荧光指示剂。 FAM-YVAD-FMK在凋亡细胞中不可逆地结合活化的半胱天冬酶1。一旦与半胱天冬酶1结合,荧光试剂保留在细胞内。结合抑制胱天蛋白酶1但不会阻止细胞凋亡的进行。

有多种参数可用于监测细胞凋亡。这种Cell Meter 活细胞半胱天冬酶1活性检测试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 1活化来检测细胞凋亡。它用于定量凋亡细胞中活化的半胱天冬酶1活性,或用于筛选半胱天冬酶1抑制剂。绿色标记试剂FAM-YVAD-FMK允许通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶1。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: FL1通道
发射: FL1通道
仪器规格: 用于碘化丙啶的FL2通道
荧光显微镜  
激发: FITC通道
发射: FITC通道
通道: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
通道: 黑色透明

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×105到2×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1:150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

 

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液(来自步骤1)以1:150的比例添加到细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1小时。

注1:对于FAM-YVAD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:FAM-YVAD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤6。

5.如果需要,用DNA染色标记细胞(如用于死细胞的碘化丙锭,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

6.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度(对于碘化丙锭,Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料,Ex / Em = 350 / 461纳米)。

6.1对于流式细胞仪,使用FL1通道监测荧光强度(FL2通道用于碘化丙锭染色)。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞(用于碘化丙啶染色的TRITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)。

6.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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产品名称 货号
Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20115
Cell Meter 活细胞Caspase 9结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20117
Cell Meter 活细胞Caspase 6结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20113

说明书
Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光 .pdf

球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388040

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球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388040

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欣维尔

产品简介本品系国外普遍使用的低压闪式层析柱,每个层析柱标配一个四氟节门塞。

技术参数:

球磨口具存储球闪式层析柱,欣维尔,C388040

材质 玻璃
规格(mm) 457
标准口 35/20
砂芯
活塞

多肽定制Protein Kinase C (19-31) 编码 [121545-65-1]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Protein Kinase C (19-31)
编码 [121545-65-1]
别名 Protein Kinase C (19-31)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) RFARKGALRQKNV-OH
序列(三字母缩写) Arg-Phe-Ala-Arg-Lys-Gly-Ala-Leu-Arg-Gln-Lys-Asn-Val
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Protein Kinase C (19-31)          编码     [121545-65-1]
Figures Protein Kinase C (19-31)          编码     [121545-65-1]
Reference
C端
N端
化学桥

Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20115-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光     货号20115 货号 20115 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 3924
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。 这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。 一旦进入细胞,胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。 该Cell Meter 活细胞caspase 8活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 8活化来检测细胞凋亡。 它用于定量凋亡细胞中激活的caspase 8活性,或用于筛选caspase 8抑制剂。 FAM-LETD-FMK,绿色标记试剂,可通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的胱天蛋白酶8。 该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 见表1
发射: 见表1
荧光显微镜  
激发: 见表1
发射: 见表1
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 见表1
发射: 见表1
通道: 黑色透明
读取模式: 底读模式

表1:参数信息

  FAM-LETD-FMK 碘化丙啶 hoechst 染料
流式细胞仪 FL1通道 FL2通道 FL1通道
荧光显微镜 FITC 通道 TRITC 通道 DAPI通道
荧光酶标仪 490/525nm 535/635nm 350/461nm

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×105到2×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1:150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

 

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液(来自步骤1)以1:150的比例添加到细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1小时。

注1:对于FAM-YVAD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:FAM-YVAD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤6。

5.如果需要,用DNA染色标记细胞(如用于死细胞的碘化丙锭,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

6.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度(对于碘化丙锭,Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料,Ex / Em = 350 / 461纳米)。

6.1对于流式细胞仪,使用FL1通道监测荧光强度(FL2通道用于碘化丙锭染色)。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞(用于碘化丙啶染色的TRITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)。

6.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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产品名称 货号
Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20108
Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20115
Cell Meter 活细胞Caspase 9结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20117

说明书
Cell Meter 活细胞Caspase 8结合检测试剂盒 绿色荧光 .pdf