概述

ECL超敏化学发光试剂盒用于检测辣根过氧化物酶（HRP）标记的蛋白检测。在过氧化氢的存在下，辣根过氧化物酶催化发光液中的底物氧化并发光，此光可经X光-胶片感光记录下来。

特点

• 操作方便，使用前将溶液A和溶液B混合即可。
• 灵敏度高。
• 稳定性好。

应用

Western Blot

使用说明

1. 进行Western Blotting实验，常规电泳、转膜、孵育一抗，HRP标记二抗，洗膜，以下操作可在室温下进行。 2. 新鲜配制发光工作液，将溶液A和溶液B按1000:3比例混合，例如1 ml溶液A与3 μl溶液B混合即成工作液。每1 cm2膜只需要0.05 ml发光工作液。 3. 将漂洗过的膜用吸水纸除去膜上多余的洗涤液，但不要使膜完全干燥，并将其转移至清洁的塑料小盒子中，蛋白面朝上，用枪头将配制好的发光工作液均匀的涂抹在膜的表面，室温孵育1~2分钟。 4. 孵育后用镊子将膜取出，用吸水纸除去膜上多余的发光液，切勿使膜完全干燥，随即将膜的两面完全包裹于洁净的保鲜膜内，避免产生气泡和褶皱，蛋白面朝上固定于X胶片暗盒中。 5. 暗房中进行曝光，可在暗房内放置红灯，先预曝光1 min，根据显影效果控制显影时间，定影1 min。根据预曝光效果确定曝光时间，以便得到较好的曝光图片。 6. 曝光后将定影的胶片取出，在自来水中轻轻漂洗，晾干后扫描图片，以便保存。

组份

溶液A，溶液B