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- 产品详情
Amplite 荧光法检测试剂盒
| 货号 | 13837 | 存储条件 | F/L |
| 规格 | 200 Tests | ||
| Ex (nm) | 571 | Em (nm) | 585 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 荧光法检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测甘油的试剂盒，。动物，真菌和植物使用G3P产生ATP。 它用于再生脑和骨骼肌细胞中的NAD +。 G3P与肥胖等脂质失衡疾病有关。 该试剂试剂盒提供了量化G3P灵敏的方法之一。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| 激发： | 540nm |
| 发射： | 590nm |
| cutoff： | 570nm |
| 推荐孔板： | 黑色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备G3P工作溶液（50 µL）
2.添加G3P标准品或测试样品（50 µL）
3.室温孵育10-30分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm时读取荧光强度
溶液配制
1.储存溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Amplite Red底物储备液（200X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中，制成200X储备液。 避免暴露在光线下。
1.2 G3P标准溶液（10 mM）：
将250 µL ddH2O加到G3P标准品（组分D）的小瓶中，制成10 mM G3P标准品溶液。
2.标准溶液配制
G3P标准
将10 µL的10 mM G3P标准储备溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM的标准溶液（CS7）。 然后执行1：3的系列稀释，以得到系列稀释的G3P标准品（CS6-CS1）。 注意：稀释的G3P标准溶液不稳定，应在4小时内使用。
3.工作溶液配制
3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到瓶酶混合液（组分B）中，并充分混合。
3.2 将25 µL Amplite Red底物储备液（200X）加入组分B和C的瓶子中，制成G3P工作溶液（组分A，B和C）。注意：请立即使用并远离光线。 注意：可以将组分B和组分C的未使用混合物分成单份使用，并保存在-20°C下。
样品操作及实验分析
表1.黑色96孔微孔板中G3P标准品和测试样品的布局。 CS = G3P标准（CS1-CS7，0.1至100 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| CS1 | CS1 | … | … |
| CS2 | CS2 | … | … |
| CS3 | CS3 | ||
| CS4 | CS4 | ||
| CS5 | CS5 | ||
| CS6 | CS6 | ||
| CS7 | CS7 |
表2.每个单元的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| CS1-CS7 | 50ul | 连续稀释（0.1至100 µM） |
| BL | 50ul | 分析缓冲液（组分C） |
| TS | 50ul | 样品 |
1.根据表1和表2提供的布局，将G3P标准品（CS），空白对照（BL）和测试样品（TS）准备到96孔黑色微孔板中。对于384孔板，请使用25 µL试剂 每孔而不是50 µL。
2.在G3P标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL G3P工作溶液，以使G3P测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。
3.在避光条件下，于室温下孵育反应10至30分钟。
4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm（在570 nm截止）处监测荧光的增加。
