Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测*

简要概述

Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列试剂盒，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测* 使用一种专属型染料，一旦进入活细胞中，其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物，可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物，产生具有强烈荧光的亲水性产物，并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系，因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用，包括细胞粘附性、趋化作用、 抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行200次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行800次检测。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备含测试化合物的细胞溶液
取出介质
加入CytoCalcein™NIR工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
在室温或37°C下孵育1小时
在Ex / Em = 635/670 nm（截止= 665 nm）时读取荧光强度（底部读取模式）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein™NIR储备溶液：
将20 µL DMSO（组分B）添加到CytoCalcein™NIR（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成CytoCalcein™NIR储备液。 注意：20 µL CytoCalcein™NIR储备液足以装满一块板。 避光。 为了存放，请将管子密封。

2.工作溶液配制

将20 µL CytoCalcein™NIR储备溶液添加到瓶中的测定缓冲液（10 mL，组分C）中并充分混合以制成CytoCalcein™NIR工作溶液。 注意：此CytoCalcein™NIR工作溶液适用于一块细胞板，在室温下至少可稳定2小时。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意：添加化合物之前不必洗涤细胞。但是，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔（96孔板）和25 µL /孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或抽吸后选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2.从细胞中除去培养基。注意：加载CytoCalcein™NIR工作溶液之前，必须除去培养基。

3.加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的CytoCalcein™NIR工作溶液。

4.在室温或37°C下避光放置1小时。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。对于非贴壁细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟，然后制动。

5.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 635/670 nm（截止= 665 nm）下监控荧光强度。