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Amplite 比色法葡萄糖-6-Phosphate检测试剂盒
货号 | 13805 | 存储条件 | f/l |
规格 | 200 Tests | ||
Ex (nm) | 575 | Em (nm) | |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 比色法葡萄糖-6-Phosphate检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测葡萄糖-6-Phosphate的试剂盒,Amplite 比色法葡萄糖-6-Phosphate检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于G6P是葡萄糖转运到细胞中的关键中间体。 AAT Bioquest的Amplite™比色葡萄糖-6-Phosphate检测试剂盒为检测生物样品(如血清,血浆,尿液)以及细胞培养样品中的G6P提供了一种简单,灵敏,快速的方法。 在偶联酶测定中,G6P浓度与NADPH成比例相关,NADPH由显色NADPH传感器特异性监测。 吸收信号可以通过吸收酶标仪在~575nm处读取。 使用Amplite™G6P检测试剂盒,我们能够在100μL反应体积中检测低至1μM的G6P。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 比色法葡萄糖-6-Phosphate检测试剂盒。
产品说明书
96孔板测定示例
概述
制备G6P测定混合物(50μL)
加入G6P标准品或测试样品(50μL)
在室温下孵育30分钟~2小时
监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加
注意:在开始实验之前,在室温下解冻试剂盒组分
操作方法
1.准备NADP储备溶液(100X):
向小瓶中加入100μLH2O(组分C)以制备100X NADP储备溶液。
2.准备G6P原液:
将100μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到G6P标准品(组分D)的小瓶中以制备100mM G6P标准溶液。
注意:未使用的G6P标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在冰箱中。
3.准备G6P标准品的系列稀释液(0至100μM):
3.1将10μLG6P储备溶液(来自步骤2)加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM G6P标准溶液。 然后将10μL的1mM G6P储备溶液加入990L 1x PBS缓冲液中以产生100μMG6P标准溶液。
注意:稀释的G6P标准溶液不稳定,应在4小时内使用。
3.2取200μL的1 mM G6P标准溶液进行1:3连续稀释,得到30,10,3,1,0.3,0.1和0μM的G6P标准品系列稀释液。
3.3如说明书中的表1和2中所述,将G6P标准品和含有G6P的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微孔板中。
4.准备G6P分析混合物:
4.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。
4.2将50μLNAP原液(100X,步骤1)加入到组分A的瓶子中(来自步骤4.1),并充分混合。
注意:这种G6P测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。
5.运行G6P检测:
5.1将50μLG6P测定混合物(来自步骤4.2)加入G6P标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤3.3),使总测定体积为100μL/孔。
注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL测定混合物。
5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。
5.3使用吸光度板读数器在A575nm / A605nm处检测吸光度比率的增加。