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Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒*蓝色荧光*
简要概述
Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的内质网染色试剂盒,内质网(ER)是真核生物细胞中的一种细胞器,其形成扁平的,膜封闭的囊或称为池状的管状结构的互连网络。 ER的膜与外核膜连续。 ER在大多数类型的真核细胞中发生,但在红细胞和精子中不存在。 此Cell Navigator 活细胞内质网(ER)染色试剂盒使用我们的ER Tracer Blue作为ER标记。 ER Tracer 蓝色染料是一种可透过细胞的荧光染料,对ER具有高度选择性。 该染色剂由蓝色荧光染料和ER粘合剂组成,它们在大多数细胞类型中选择性结合ER。 对于某些细胞,ER Tracer Blue可能无法选择性结合ER。 ER Tracer Blue具有类似于DAPI的光谱特性,这使得该套件可与DAPI滤光片组一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒。
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产品说明书
样本分析方案
简要概述
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在生长培养基中准备细胞
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将细胞与ER Blue 工作溶液在37℃下孵育15-30分钟
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使用DAPI滤光片组在荧光显微镜下分析
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
ER Blue 储备溶液(500X):将20 uL DMSO(组分C)添加到ER Blue (组分A)中,制成500X储备溶液。
2.工作溶液配制
ER Blue 工作溶液:将2 uL 500X储备溶液添加到1 mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,并充分混合。 工作溶液在室温下稳定至少2小时。 注意:20 uL的500 X ER Blue 储备溶液足以容纳一个96孔板。 如果未密封的ER Blue 500X储备溶液可以分装,并在≤-20℃的温度下保存两周。 避光并避免反复冻融循环。 有关细胞样品制备的指南,请点击查看。
操作步骤
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处理样品。注意:可以将工作溶液直接添加到细胞培养基中。或者,移出细胞培养基并用缓冲液洗涤。
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在微孔板中添加100 uL /孔(96孔板)或50 uL /孔(384孔板)的ER Blue 工作溶液。将细胞与工作液在37℃下孵育15-30分钟,避光保存。注意:ER探针的浓度取决于具体应用。浓度高于工作溶液可能对细胞有毒性。可以根据探针对特定的细胞类型和细胞/组织的渗透性来改变染色条件。
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除去每个孔中的工作溶液。用缓冲液洗涤细胞三遍。
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染色后固定细胞(可选)。用4%甲醛固定细胞5 -10分钟。缓冲液洗涤细胞三遍。
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使用带有DAPI滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。
图示
图1.使用带有DAPI滤光片组的荧光显微镜在96孔黑色透明板中培养的HeLa细胞内质网(ER)染色的荧光图像。 (A)将活细胞与ER选择性探针ER Blue(Cat#22634,蓝色)和nuclear Red LCS1(Cat#17542,红色)共染色。 (B)将活细胞与ER选择性探针ER Blue (Cat#22634,蓝色)和Nuclear Red LCS1(Cat#17542,红色)共染色,然后用4%甲醛固定。 |