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- 产品详情
Amplite 荧光法G6PD检测试剂盒
| 货号 | 13806 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 200 Tests | ||
| Ex (nm) | 571 | Em (nm) | 585 |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 荧光法G6PD检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测葡萄糖的试剂盒，G6PD催化葡萄糖-6 – lin酸转化为6 – phosphoglucono -δ-内酯，这是至关重要的代谢途径，它提供通过维持辅NADPH的水平降低了能量的细胞（如红细胞），以及用于生产戊糖。 NADPH的生产是非常重要的用于脂肪酸该NADPH还保持谷胱甘肽在这些细胞的水平，有助于保护红血细胞免受氧化损伤。G6PD缺乏易患个人非免疫性溶血性贫血。 AAT Bioquest的Amplite 荧光G6PD检测试剂盒提供了用于生物样品如血清，血浆，尿液，以及细胞培养样品中检测G6PD缺乏一种简单，灵敏，快速基于荧光的方法。在酶偶联测定法，比例是专门由一个荧光NADPH的传感器监测，以得到高的红色荧光产物的浓度。荧光信号可在EX/ EM = 540 nm/590 nm处读取荧光酶标仪。与G6PD检测试剂盒，我们能够探测到小至 1 mU/ml G6PD在100 μL的反应体积。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法G6PD检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备G6PD工作溶液（50 µL）
2.添加G6PD标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟-2小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm时的荧光增加
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NADP储备溶液（100X）：
在NADP小瓶（组分C）中加入100 µL H2O，制成100X NADP储备溶液。
1.2 G6PD标准溶液（100 U / mL）：
将100 µL H2O或1X PBS缓冲液加到G6PD Standard（组分D）的小瓶中，制成100 U / mL G6PD标准溶液。
2.标准溶液
G6PD标准
将10 µL G6PD标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成1000 mU / mL G6PD标准溶液。 将15 µL的1000 mU / mL G6PD标准溶液加入到485 uL的1X PBS缓冲液中以生成30 mU / mL的G6PD（G6PD7），然后进行1：3的系列稀释以获得G6PD标准品的系列稀释（G6PD6- G6PD1）。 注意：稀释的G6PD标准溶液不稳定，应在4小时内使用。
3.工作溶液
将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶探针（组分A）中。 将50 µL NADP储备溶液（100X）加入组分A的瓶子中，并充分混合。 注意：此G6PD分析工作溶液足以用于一个96孔板。
样品操作及实验分析
表1.黑色96孔微孔板中G6PD标准品和测试样品的布局。
| BL | BL | TS | TS |
| G6PD1 | G6PD1 | … | … |
| G6PD2 | G6PD2 | … | … |
| G6PD3 | G6PD3 | ||
| G6PD4 | G6PD4 | ||
| G6PD5 | G6PD5 | ||
| G6PD6 | G6PD6 | ||
| G6PD7 | G6PD7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| G6PD1-G6PD7 | 50ul | 连续稀释（0.04至30 mU / mL） |
| BL | 50ul | 稀释缓冲液（PBS） |
| TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和表2提供的布局，准备G6PD标准品（G6PD），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.向G6PD标准品，空白对照和测试样品的每个孔中添加50 µL G6PD工作溶液，以使总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。
3.避光保存，室温下孵育反应30分钟至2小时。
4.用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm处监测荧光增加，在570 nm处截止。
