Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒

简要概述

Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒，Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒提供了一种可靠的方法，可以用Tubulite Red对活细胞中的微管蛋白进行荧光成像。 该探针可透过活细胞，因此不需要固定细胞即可对微管蛋白进行成像。 它可以方便地用于跟踪活细胞中微管蛋白的聚合过程。 它的红色光谱波长和良好的细胞渗透性使该探针易于与其他颜色（如GFP表达的细胞）或核染料（如DAPI）一起使用。 中性的Tubulite Red容易穿过活细胞的质膜。 亲脂性封闭基团一旦进入细胞，就会被酯酶裂解，形成带负电荷的产物，并充分保留在细胞内部。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用5×10⁵至1×10⁶细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
2.准备Tubulite Red工作溶液并将其添加到细胞中
3.在37℃下孵育30至60分钟
4.使用Cy5滤光片组读取荧光强度

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
Tubulite Red储备液（500X）：
将25 µL（Cat＃23170）或75 µL（Cat＃23171）DMSO（组分D）添加到Tubulite Red（组分A）小瓶中，并充分混合。 注意：分装并在-20℃下存储未使用的Tubulite Red储备液。 避免重复冷冻/融化循环。

2.工作溶液配制

Tubulite Red工作溶液（1X）：
将2.5 µL Tubulite Red储备液储备溶液和100 µL 25 mM ReadiUse 丙磺舒（组分D）加入1 mL的测定缓冲液（组分B）或您选择的缓冲液中，并充分混合。 注意：我们建议为每次使用都使Tubulite Red工作溶液新鲜。 工作溶液可以稳定几个小时。

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样品示例及操作

1.根据需要准备细胞样品。

2.除去细胞生长培养基，并用PBS（未提供）或您选择的任何其他缓冲液洗涤细胞。（可选的）。

3.加入100 µL TubuliteTM Red工作溶液，并在37oC培养箱中孵育30至60分钟。 注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.除去工作溶液，并用PBS或您选择的其他任何缓冲液（2.5毫安的丙磺舒（从组分C稀释））洗涤细胞两次。

5.用含2.5 mM丙磺舒的测定缓冲液（从组分C稀释）覆盖细胞，并使用Cy5滤光片组在荧光显微镜下监控荧光强度。

图1.活HeLa细胞中微管蛋白的成像。 将HeLa细胞与Tubulite Red和DAPI（Cat＃17507）在37℃，5％CO2培养箱中共同标记60分钟。 用荧光显微镜（Cy5滤光片组）拍摄荧光图像。