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产品详情
Product details
Transfectamine 5000转染试剂
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备细胞进行转染
2.准备Transfectamine 5000-DNA混合物
3.将Transfectamine 5000-DNA混合物添加到细胞培养物中
4.过夜培养
5.用适当的方法分析转染效率
溶液制备
1.工作溶液配制
1.1将2.5ug DNA与200uL无血清培养基混合。
1.2在步骤1中添加7.5 uL Transfectamine 5000。
1.3充分混合并在室温下孵育20分钟。 注意：Transfectamine 5000和DNA的比例需要针对不同的细胞系进行优化，通常：Transfectamine 5000转染试剂（uL）与DNA（ug）的比例= 3-5 uL至1ug
6孔板与10cm板样品方案
| 组成 | 6孔板（每孔） | 10厘米板 |
| 新鲜培养基 | 2ml | 6ml |
| 质粒 | ~2.5ug | 7.5-10ug |
| 无血清培养基 | 200ul | 600ul |
| Transfectamine 5000转染试剂 | 7.5ul | ~22.5ul |
样品示例及操作
1.细胞培养准备
1.1转染时将细胞培养至约90％融合。
1.2转染前用新鲜的生长培养基替换。 例如，对于6孔板，每孔用2 mL培养基替换，对于10 cm板，用6 mL培养基替换。
2.转染方案
将Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培养板并培养过夜。 注意：重组蛋白 早可在转染后16小时开始检测。转染后72〜96小时可观察到 表达水平。
| 图1.使用Transfectamine 5000，Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂在HeLa细胞中的转染效率比较。 每种试剂用于以96孔格式转染HeLa细胞，转染后24小时分析GFP表达。 与Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂相比，Transfectamine 5000转染试剂可提供更高的GFP转染效率。 |