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MycoLight Red JJ94核酸染料
简要概述
MycoLight Red JJ94核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,绿色荧光蛋白(GFP)衍生物广泛用作荧光试剂,在细胞和分子水平上研究生物过程,包括标记细菌等。然而,基于绿色荧光蛋白的细菌标记是单一的,而且一些重要的生物体仍然难以被修饰并表达。SYTO-9被开发广泛用于以更方便的方式标记细菌,即通过简单的培养。但,据报道SYTO-9能抑制一些细菌的生长。AAT Bioquest开发了与SYTO-9性能相似的Myoclight JJ94 红色染料,而且它对细菌生长抑制非常低。另外,MycoLight JJ94 红色染料可用于细菌的多色检测,它的激发和发射波长分别为637和651nm。这与大多数荧光显微镜和流式细胞仪中常用的氦激光激发和Cy5滤光片完全匹配。MycoLight JJ94 红色染料是一种远红色荧光DNA结合染料,用于直接的活细菌细胞标记,它自身荧光较低,但与DNA结合后,其荧光强度急剧增加。MycoLight JJ94 红色染料在不影响微生物生长的情况下,很容易染上活细菌。在相同的条件下,SYTO-9抑制细菌生长,而MycoLight JJ94 红色染料与正常细菌在液体或固体培养基上生长完全一致。将细菌转移到无染料培养基中后,MycoLight Red JJ94进行的细菌荧光标记可在数小时内保持稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight Red JJ94核酸染料。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
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在不影响正常微生物生长的情况下染色活细菌
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使用Cy5滤光片组和He激光激发,可在大多数流式细胞仪和荧光显微镜中广泛使用
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可用于细菌中的多色检测
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稳定标记数个小时
操作步骤
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使用自备缓冲液稀释MycoLight Red JJ94。MycoLight Red JJ94可以直接添加到细菌培养基中, 终浓度为2.5 µM。
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涡旋混合样品,然后孵育至少10分钟。
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通过荧光显微镜或带有Cy5滤波器的流式细胞仪检测样品的荧光信号。
注意1: 以上方案可适用于大多数细菌菌株。这些条件需要针对每个菌株和实验系统进行调整。生长培养基,细胞密度,其他生物的存在和因素可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色。注意2: 稀释MycoLight Red JJ94时请使用塑料管,因为稀释的污渍会粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中可获得结果。 注意3: 可以使用不同的细菌菌株优化染料浓度以获得结果。 注意4: MycoLight Red JJ94与细菌的生长完全兼容,可以将活细菌与MycoLight Red JJ94长时间孵育。
图示
图1. 随时间推移补充了1%DMSO(对照),MycoLight Red JJ94和Syto-9 的大肠杆菌 LB培养物的光密度(OD600 nm)对比。Syto-9 基本上抑制细菌生长,而MycoLight Red JJ94与正常细菌生长完全相容。 |
图2.用2.5μM MycoLight Red JJ94将庆笙红球菌染色20分钟。 用具有Cy5滤光片组的Keyence荧光显微镜拍摄图像。 |