Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发

简要概述

细胞周期具有四个连续阶段：G0 / G1，S，G2和M。在细胞通过细胞周期的过程中，其DNA在S（合成）阶段复制，并在M（有丝分裂）阶段在两个子细胞之间平均分配。这两个阶段由两个间隙阶段分开：G0 / G1和G2。这两个间隙相为细胞提供了生长时间，并使它们的蛋白质和细胞器的质量增加了一倍。在进入下一阶段的细胞周期之前，细胞还将它们用于检测内部和外部条件。细胞通过细胞周期的传递受到许多不同调节蛋白的控制。该特定试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的Nuclear Violet 检测细胞周期的进程和增殖。可以通过流式细胞术确定给定样品中处于G0 / G1，S和G2 / M期的细胞以及亚G1期处于凋亡之前的细胞的百分比。可以用流式细胞仪（PacificBlue®通道）检测用Nuclear Violet 染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 用5×10⁵至1×10⁶细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

2. 在0.5 mL细胞溶液中加入1 µL 500X Nuclear Violet

3. 在室温下孵育30-60分钟

4. 使用405nm紫色光激发流式细胞仪进行分析

实验步骤

1.对于每个样品，请在0.5 mL的温暖培养基或自备缓冲液中以5×10⁵至1×10⁶细胞/ mL的密度制备细胞。注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞，以诱导凋亡或其他细胞周期功能。

3.向含有生长培养基的细胞中加入1µL 500X Nuclear Violet （组分A），并在37°C，5％CO₂的培养箱中孵育细胞30至60分钟。注意：对于贴壁细胞，用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用Nuclear Violet 孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意：DNA染色前无需固定细胞，因为Nuclear Violet 具有细胞渗透性。

4.可选：以1000 rpm离心细胞4分钟，然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液（组分B）或自备缓冲液中。

5.使用405 nm紫色激光（Ex / Em = 405/445 nm）通过流式细胞仪检测荧光强度。