iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物

iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物

	货号	25595	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1 mg	价格	1200
	Ex (nm)	656	Em (nm)	670
	分子量	N/A	溶剂	Water
	产品详细介绍

简要概述

刀豆蛋白A（ConA）是一种凝集素，它与各种糖、糖蛋白和糖脂中的某些结构特异结合。Con A是一种著名的T细胞有丝分裂原，它能激活免疫系统，募集淋巴细胞并诱导细胞因子的产生。除了有丝分裂活性外，ConA还可以通过线粒体介导的细胞凋亡和自噬诱导细胞程序性死亡。ConA还被报道激活NFAT（活化T细胞的核因子），NFAT是一个转录因子家族，在免疫系统的发育和功能中起重要作用，包括T细胞受体（TCR）的参与。ConA广泛应用于生物学和生物化学中，用来表征细胞表面的糖蛋白和其他含糖物质。还可用于凝集素亲和层析纯化糖基化大分子，以及研究各种免疫细胞的免疫调节作用。ConA在B-聚糖分支结构的末端位置特异性地结合α-D-甘露糖基和α-D-葡萄糖基残基（仅在碳2上的醇中不同的两个己糖）。它有4个结合位点，对应于4个亚单位。刀豆蛋白A（conA）是细胞生物学中应用最广泛的凝集素之一。iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物选择性地结合到A-甘露吡喃糖基和A-葡萄糖吡喃糖基残基上，发出明亮的红色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物。

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产品说明书

样品实验方案

储备溶液配制

iFluor 647-刀豆蛋白 A 原液（200X）

在产品瓶中加入 500 μL 的 ddH2O，制成 2 mg/mL 原液

注：重构的偶联物溶液可在 2-8 °C 下短期保存或在 -20 °C 下长期保存

 

工作溶液配制

iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液（1X）

将 5 μL 的 200X 储备液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中

注：不同细胞系的优化染色浓度可能不同。推荐的活细胞起始浓度为 5-10 μg/mL

 

操作步骤

活细胞染色

1.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2.添加 100 µL iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液。

3.用刀豆蛋白 A 结合物工作溶液在 37 °C 下孵育细胞 10-30 分钟。

4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5.使用 Cy5 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

固定细胞染色

1.在 PBS 中用 4% 甲醛固定细胞。

注：对于固定细胞膜染色，建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后的透化步骤会导致细胞内隔室染色，例如高尔基体和内质网 (ER) 结构。

2.添加 100 µL iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液。

3.将细胞与刀豆蛋白 A 工作溶液在室温下孵育 10-30 分钟。

4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5.使用 Cy5 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

参考文献