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Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪
货号 | 22860 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
规格 | 100 tests | 价格 | 3924 | |
Ex (nm) | 542 | Em (nm) | 580 | |
分子量 | 溶剂 | |||
产品详细介绍 |
简要概述
细胞周期具有四个连续阶段:G0 / G1,S,G2和M。在细胞通过细胞周期的过程中,其DNA在S(合成)阶段复制,并在M(有丝分裂)阶段在两个子细胞之间平均分配。这两个阶段由两个间隙阶段分开:G0 / G1和G2。这两个间隙阶段为细胞提供了生长时间,并使它们的蛋白质和细胞器的质量增加了一倍。在进入下一阶段的细胞周期之前,细胞还可以使用它们来检测内部和外部条件。细胞通过细胞周期的传递受到许多不同调节蛋白的控制。该检测试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的Nuclear Red CCS2检测细胞周期进程和增殖。可以通过流式细胞术确定给定样品中处于G0 / G1,S和G2 / M期的细胞以及亚G1期处于凋亡之前的细胞的百分比。可以用流式细胞仪(PE-Texas Red通道)检测用Nuclear Red CCS2染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒。
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适用仪器
流式细胞仪 | |
激发: | 488nm激光 |
发射: | 610/20nm滤波片 |
通道: | PE-Texas Red滤波片 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
- 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
- 将1 µL 500X Nuclear Red CCS2添加到0.5 mL细胞溶液中
- 在37°C,5%CO2下孵育10-30分钟
- 使用带有PE-Texas Red通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 488 nm / 615 nm)
实验步骤
1.对于每个样品,以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL温暖的培养基或自备缓冲液中制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定最佳细胞密度。
2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,细胞周期停滞或其他细胞周期功能。
3.在含有生长培养基的细胞中加入1 µL 500X Nuclear Red CCS2(组分A)。
4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育10至30分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用Nuclear Red CCS2孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。染色前无需固定细胞,因为Nuclear Red CCS2具有细胞渗透性。
5.可选:将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL的测定缓冲液(组分B)或自备的缓冲液中。
6.使用带有PE-Texas Red通道(Ex / Em = 488/615 nm)的流式细胞仪检测荧光强度。
参考文献
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