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Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒
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货号 | 10070 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 200 Tests | 价格 | 4584 | |
| Ex (nm) | 695 | Em (nm) | ||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的天然副产物，被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上，MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸（TBA）的反应，得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的，也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒，这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了快速，方便的MDA测量方法，无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物，用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异，几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收： | 695nm |
| 推荐孔板： | 透明底板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品（50μL）
2.添加MDA Blue 原液（10μL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液（40μL）
5.监测OD增加至695nm
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液（100 mM）：
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶（组分C）中以制备100mM MDA储备溶液。
2.标准溶液
2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液（组分B）中，得到400μMMDA溶液（MDA7）。 然后在稀释缓冲液中进行1：2连续稀释，得到连续稀释的MDA标准品（MDA6-MDA1）。
样品分析
表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| MDA1 | MDA1 | … | … |
| MDA2 | MDA2 | … | … |
| MDA3 | MDA3 | ||
| MDA4 | MDA4 | ||
| MDA5 | MDA5 | ||
| MDA6 | MDA6 | ||
| MDA7 | MDA7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| MDA1-MDA7 | 50ul | 连续稀释（6.25至400μM） |
| BL | 50ul | 稀释缓冲液（组分B） |
| TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品（MDA），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。
2.将10μLMDABlue （组分A）溶液加入MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板，每孔使用5μLMDABlue 溶液。
3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。
4.加入40μL反应溶液（组分D），使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，使用20μL反应溶液，总测定体积为50μL/孔。
5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。
6.用吸光度板读数器监测吸光度增加，在OD为695~700nm时进行路径校正校正。
参考文献
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