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钙离子荧光探针Fura-8, AM
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货号 | 21055 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 1 mg | 价格 | 1272 | |
| Ex (nm) | 354 | Em (nm) | 524 | |
| 分子量 | 951.90 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
钙离子荧光探针Fura-8, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针，虽然Fura-2已被广泛用作优选的激发比率钙指示剂，但它具有某些局限性，例如与单波长钙染料如Fluo-8®和Cal-520®相比灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8 以进一步改善Fura-2的钙响应。Fura-8的发射转换为更长的可见波长，与普通滤波器组兼容。它具有相当的钙亲和力（对Fura-2）。Fura-8 AM比Fura-2 AM对钙更敏感，信号/背景比高于Fura-2 AM。我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量，即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。
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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| 激发： | Fura 2滤波片 |
| 发射： | Fura 2滤波片 |
| 推荐孔板： | 黑色透明 |
| 荧光酶标仪 | |
| 激发： | 355，415nm |
| 发射： | 530nm |
| cutoff: | 475nm |
| 推荐孔板： | 黑色透明 |
| 读取模式： | 底读模式 |
产品说明书
操作说明
1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura-8 ，AM原液。
2.1使用量的Fura-8 ，AM：1 mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fura-8 TM，AM与525.27μL无水DMSO混合。
3.使用10μMFura-8 ，AM 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终孔内浓度为Fura-8 ，AM：5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度：0.04％
3.3最终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFura-8 ，AM，25.6μL10％Pluronic F-127和256μL25mM丙磺舒。下一个，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Fura-8™的最终浓度，AM为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的最终浓度调节至以下：5μMFura-8 TM，AM，0.04％Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 354/525 nm运行实验。
参考文献
Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263
Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187
Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649
Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown