O157显色培养基

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O157显色培养基

英文名称: O157 chromogenic medium
产品货号: JP7006
产品规格: 1000ml
保质期: 二年
产品用途: 用于O157菌的显色培养,O157菌显亮红色、淡红色或红色
备  注: 需添加CT添加剂

产品介绍:

  大肠杆菌O157:H7显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、病人粪便样品中O157:H7菌的快速检测。O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈,大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色。本培养基的特异性高,可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份(g/L)
特殊营养物质  68.4
混合显色剂   2.6
琼脂  15.0
pH7.0±0.1  25℃ 

CT添加剂  1ml/支*5(已配套,无需另购
 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法

 称取本品 17.2g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 2 分钟左右。冷却至 45-50℃ 时,加入一支CT添加剂混匀,倾入无菌平皿。

 注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时。

 培养基的加热灭菌操作视频:

原理
  利用大肠杆菌O157 自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色,以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色因子使菌落显示定颜色。

操作步骤
  1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
  2、取 25 克样品液加入 225ml  mEC肉汤或mTSB肉汤中,36℃ 增菌培养 18-24 小时;
  3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到O157菌显色培养基上,做 2 个平板;
  4、36℃ 培养 18-24h,O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;
  5、对典型菌落可做O157:H7菌血清学试验和全套生化试验。
  注:必须在 36℃ 培养 24 小时内判读结果,以免菌落颜色发生变化。
质量控制
  1、外观
  此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈灰白色。制备好的平板呈蓝色固体培养基。
  2、微生物试验
  在 36℃ 培养 18-24h 小时:

 质控菌株

 ATCC 

 生长情况

 菌落颜色

 大肠杆菌O157

 35150

 +++

 亮红色

 金黄色葡萄球菌

 25923

 -/+

 黄色或无色

 大肠杆菌

 25922

 +/-

 暗蓝色,菌落周围有蓝色晕圈

 沙门氏菌

 14028

 +++

 蓝色

 奇异变形杆菌

 12453

 +/-

 无色

 肺炎克雷伯氏菌

 10031

 +/-

 蓝色,菌落周围有蓝色晕圈

 弗氏柠檬酸盐杆菌

 43864

 +/-

 蓝色菌落有紫色中心,菌落周围有蓝色晕圈

 坂崎杆菌

 29004

 ++

 紫色至蓝色

方法的局限性
  本培养基上的典型大肠杆菌O157:H7必须做血清学试验或生化试验。
典型特征
  典型大肠杆菌O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;大肠杆菌和大肠菌群显蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈;其它细菌显蓝色、黄色或无色;

   

O157显色培养基

大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC35150

O157显色培养基

大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC43888



贮存

  制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
  干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
  此培养基仅供实验室使用。
参考文献
    1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
    2、 U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD. 

 
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显色平板菌落特征
O157显色培养基的微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。


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