巨噬细胞去除实验

 去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。巨噬细胞可吞噬clodronate Liposome，在溶酶体的作用下，clodronate可释放出来，当其达到一定浓度时，可引起巨噬细胞的凋亡，从而去除巨噬细胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞，如肺、膝关节、肿瘤局部和脑等；也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞，如肝脏和脾脏中的巨噬细胞。

1.       脂质体的准备

美国的FormuMax Scientific可以提供多种clodronate Liposome 具体产品可以上http://www.liposomeexpert.com查询，他们中国代理商是上海金畔生物科技有限公司

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2.       脂质体的体内注射

隔日尾静脉注射200ul clodronate liposome，根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞的去除效率。

尾静脉注射方法：

1.       将小鼠放在倒扣的饭盒内，从孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉，2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面，3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉；

2.       将纱布浸泡于约70度的温水中，拿出后包裹尾巴，以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的；

3.       行尾部静脉注射时，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出约2cm一段，使皮肤紧张，静脉更为充盈，右手持1ml针头注射器，使针头与静脉平行（小于30°角），从尾巴的下1/4处进针，开始注入药物时应缓慢，仔细观察，如果无阻力，无白色皮丘出现，说明已刺入血管，可注入药物。

有的实验需连日反复尾静脉注射给药，注射部位应尽可能从尾端开始，按次序向尾根部移动，更换血管位置注射给药。拔出针头后，用棉球按住注射部位轻压1-2min，止血。