Enzymatics P7050L 说明书
货号：P7050L
品名：DNA Polymerase I（DNA聚合酶I）
产品描述：
DNA聚合酶I是一种嗜温性DNA聚合酶，除3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性外，还具有5'-3'DNA合成。DNA合成和5'→3'核酸酶特征的组合使DNA合成期间的缺口翻译成为可能。
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规格： |
5,000 U |
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浓度： |
10,000 U/ml |
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纯度（SDS-PAGE） |
> 99％ |
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活性： |
6,850 U/mg |
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SS核酸外切酶 |
实用 |
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DS核酸外切酶 |
实用 |
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DS内切核酸酶 |
200 U = no conversion |
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大肠杆菌 DNA污染 |
200 U <10 copies |
蛋白质来源
重组大肠杆菌菌株携带的POLA基因。
提供：
25 mM Tris-HCl
0.1 mM EDTA
1.0 mM DTT
50% glycerol
pH 7.4 @ 25°C
随附：
pB0110 (10X Blue Buffer)
10X Blue Buffer (B0110)：
500 mM NaCl
100 mM Tris-HCl
100 mM MgCl2
10 mM DTT
pH 7.9 @ 25°C
单位定义
1单位定义为在37℃30分钟内将10nmol dNTPs转化为酸不溶性物质所需的聚合酶量。
质量控制分析
单位表征测定
单位活性使用2倍系列稀释法测量。在1X Blue反应缓冲液中制备酶的稀释液，并加入含有小牛胸腺DNA，1X蓝色反应缓冲液，3H-dTTP和100μMdNTP的50μL反应物中。将反应在37℃孵育10分钟，在冰上沉降，并使用TCA沉淀法分析。
蛋白质浓度（OD 280）测量使用使用2.0mg / ml BSA样品（Pierce Cat＃23209）标准化的Nanodrop ND-1000分光光度计
在OD 280处分析2.0μL酶样品并用产品储存溶液冲切。使用80,790的消光系数和103,118道尔顿的分子量将观察到的3个重复样品的平均测量值转换成mg / mL。
SDS-Page（物理纯度评估）
将2.0μL浓缩的酶溶液加载到变性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝胶上，该凝胶侧翼为宽范围的MW标记和2.0μL的样品的1:100稀释物。电泳后，将凝胶染色并比较样品以确定物理纯度。该测试的验收标准要求浓缩样品中污染带的总量不超过稀释样品中目的蛋白质条带的质量，确认浓缩样品的纯度大于99％。
污染测试
单链核酸外切酶活性
将含有10,000cpm放射性标记的单链DNA底物和10μL酶溶液的50μL反应物在37℃下孵育4小时，导致TCA可溶性计数的释放超过80％。
双链核酸外切酶活性将含有5,000cpm放射性标记的双链DNA底物的50μL反应液和10μL在37℃下孵育4小时的酶溶液导致超过50％的TCA可溶性计数的释放。
双链核酸内切酶活性将含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反应物在37℃下温育4小时，结果通过琼脂糖凝胶电泳确定没有肉眼可察觉地转化为带切口的环状DNA。
大肠杆菌 16S rDNA污染测试
重复5μL酶溶液样品变性，并在TaqMan qPCR测定中筛选污染性 大肠杆菌 基因组DNA，使用对应于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。测试的验收标准是由3个重复的无模板对照样品的平均值产生的阈值循环计数（C t）。基于无模板对照 Ct 值与标准曲线数据之间的相关性，该测定的检测限为<10拷贝基因组/样品。
部分产品信息：
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货号 |
品名 |
规格 |
浓度 |
品牌 |
|---|---|---|---|---|
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N2070-10-L |
ATP Solution |
50 µmol |
10 mM |
Enzymatics |
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N2050-10-L |
10 mM dNTP Solution Mix |
100 µmol |
10 mM |
Enzymatics |
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N2010L |
100 mM 75µmol dNTP Solution Set |
75 µmol |
100 mM |
Enzymatics |
|
N2010-A-L |
100 mM dATP Solution |
75 µmol |
100 mM |
Enzymatics |
|
N2050L |
100µmol dNTP Solution Mix |
100 µmol |
25 mM |
Enzymatics |
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Y9180L |
10x Uracil Cleavage System |
750 Reactions |
N/A |
Enzymatics |
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P7670 |
2x HiFi PCR Master Mix |
1 rxn |
2x |
Enzymatics |
|
Y9420L |
5x ER/A-Tailing Enzyme Mix |
24 reactions |
N/A |
Enzymatics |
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Y9380L |
E. coli Pyrophosphatase |
50 U |
100 U/mL |
Enzymatics |
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Y9030L |
E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein |
1.5 mg |
2.75 mg/ml |
Enzymatics |
|
Y9140-HC-L |
End-Repair Mix (High Concentration) |
75 Reactions |
1 Rxn/µL |
Enzymatics |
|
Y9140-LC-L |
End-Repair Mix (Low Concentration) |
200 Reactions |
1 Rxn/µL |
Enzymatics |
|
Y9080L |
Endonuclease VIII |
10,000 U |
10,000 U/ml |
Enzymatics |
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P7600L |
EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) |
10,000 U |
200,000 U/mL |
Enzymatics |
|
X8010L |
Exonuclease I |
30,000 U |
20,000 U/ml |
Enzymatics |
|
X8020L |
Exonuclease III |
50,000 U |
100,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7010-HC-L |
Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) |
10,000 U |
50,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7010-LC-L |
Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) |
10,000 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7060L |
Klenow Fragment |
2,500 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
X8030L |
Lambda Exonuclease |
10,000 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7040L |
M-MuLV Reverse Transcriptase |
100,000 U |
200,000 U/ml |
Enzymatics |
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P7090L |
Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) |
3,000 U |
30,000 U/ml |
Enzymatics |
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P7140-HC-L |
Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) |
100,000 U |
400,000 U/ml |
Enzymatics |
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P7140-LC-L |
Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) |
100,000 U |
40,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7610L |
NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions |
250 Reactions |
2X |
Enzymatics |
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P7590L |
Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase |
500 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7460L |
Poly(A) Polymerase |
1,000 U |
5,000 U/mL |
Enzymatics |
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Y9260L |
RecA |
1.5 mg |
2.0 mg/mL |
Enzymatics |
|
Y9220L |
RNAse H |
5,000 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
Y9240L |
RNAse Inhibitor |
20,000 U |
40,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6010L |
T3 DNA Ligase |
900,000 U |
3,000,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6030-LC-L |
T4 DNA Ligase |
150,000 U |
120,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6030-HC-L |
T4 DNA Ligase (Rapid) |
240,000 U |
600,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7080L |
T4 DNA Polymerase |
2,000 U |
3,000 U/ml |
Enzymatics |
|
Y9130L |
T4 Gene 32 Protein |
1.0 mg |
10 mg/mL |
Enzymatics |
|
Y9040L |
T4 Polynucleotide Kinase |
10,000 U |
10,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6050L |
T4 RNA Ligase 1 |
10,000 U |
20,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6080L |
T4 RNA Ligase 2 |
4,500 U |
30,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6070L |
T4 RNA Ligase 2 Truncated |
500 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6020L |
T7 DNA Ligase |
900,000 U |
3,000,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7260L |
T7 DNA Polymerase |
3,500 U |
10,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7180L |
T7 RNA Polymerase |
50,000 U |
50,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6060L |
Taq DNA Ligase |
20,000 U |
40,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7110L |
Taq DSC 2.0 DNA Polymerase |
1,250 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7250L |
Taq-B DNA Polymerase |
10,000 U |
5,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7620L |
TaqIT |
5,000 U |
50,000 U/mL |
Enzymatics |
|
P7070L |
Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) |
6,000 U |
20,000 U/ml |
Enzymatics |
|
G5020L |
Thermolabile UDG |
500 U |
1,000 U/ml |
Enzymatics |
|
Y9370L |
Thermostable Pyrophosphatase |
1,250 U |
2,000 U/ml |
Enzymatics |
|
G5010L |
Uracil DNA Glycosylase |
10,000 U |
2,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7511L |
VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase |
500 U |
2,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7520L |
VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase |
500 U |
2,000 U/ml |
Enzymatics |
|
L6030-W-L |
WGS Ligase |
24 Reactions |
N/A |
Enzymatics |
|
P7640L |
ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit |
1000 Reactions |
N/A |
Enzymatics |
|
P7020-HC-L |
φ29 DNA Polymerase (High Concentration) |
2,000 U |
100,000 U/ml |
Enzymatics |
|
P7020-LC-L |
φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) |
2,000 U |
10,000 U/ml |
Enzymatics |
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