qa-bio KE-EFX3说明书

qa-bio KE-EFX3说明书

Endo F多功能套件

Endo F Multi-Kit将在天然和变性条件下将N-连接的聚糖脱糖基化。每种酶对于N-连接的聚糖释放具有不同的特异性。可以选择组合使用这三种酶以*去除糖蛋白或肽上存在的所有N-连接的聚糖，或独立使用每种酶，从而确定存在的N-聚糖的类型。

零件编号：KE-EFX3

推荐使用Endo F Multi-kit来对在非变性条件下由于PN酶F裂解在蛋白质的三维结构中具有抗性的天然蛋白质进行去糖基化处理，因为已知这些酶对蛋白质构象的敏感性较低。

每一种酶的具有不同的N-连接的聚糖的特异性：
内切糖苷酶F1断裂这样的高甘露糖和某些杂合型N-聚糖
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖（以40X减小的速率）
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖

应用：
–抗PNGase F裂解的天然蛋白质的去糖基化– 
聚糖类型的测定（高甘露糖，双触角，三/四臂触角）
–脱糖基化时通常沉淀的去糖基化蛋白
– X射线晶体学

这三种酶在寡糖的核心中的两个GlcNAc残基之间切割天冬酰胺连接的（N-连接的）寡糖，产生截短的糖分子，其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上。

剩余的单糖会带电荷，从而增加蛋白质的溶解度。相反，PNGase F可以完整清除寡糖。

使用说明

1.在Eppendorf管中加入多达200μg糖蛋白。用去离子水将终体积调整为34μl。
2.加入10μlEndo F2 / F3 5x反应缓冲液，250 mM乙酸钠pH 4.5。如果单独使用Endo F1酶，请使用Endo F1缓冲液，250 mM磷酸钠pH 5.5。
4.将2.0μl每种酶添加到反应中。在37°C下孵育3小时。
通过SDS-PAGE监控切割。

推荐使用Endo F Multi-kit来对在非变性条件下由于PN酶F裂解在蛋白质的三维结构中具有抗性的天然蛋白质进行去糖基化处理，因为已知这些酶对蛋白质构象的敏感性较低。

每一种酶的具有不同的N-连接的聚糖的特异性：
内切糖苷酶F1断裂这样的高甘露糖和某些杂合型N-聚糖
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖（以40X减小的速率）
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖

应用：
–抗PNGase F裂解的天然蛋白质的去糖基化– 
聚糖类型的测定（高甘露糖，双触角，三/四臂触角）
–脱糖基化时通常沉淀的去糖基化蛋白
– X射线晶体学

这三种酶在寡糖的核心中的两个GlcNAc残基之间切割天冬酰胺连接的（N-连接的）寡糖，产生截短的糖分子，其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上。

剩余的单糖会带电荷，从而增加蛋白质的溶解度。相反，PNGase F可以完整清除寡糖。

使用说明

1.在Eppendorf管中加入多达200μg糖蛋白。用去离子水将终体积调整为34μl。
2.加入10μlEndo F2 / F3 5x反应缓冲液，250 mM乙酸钠pH 4.5。如果单独使用Endo F1酶，请使用Endo F1缓冲液，250 mM磷酸钠pH 5.5。
4.将2.0μl每种酶添加到反应中。在37°C下孵育3小时。
通过SDS-PAGE监控切割。