haemtech活化蛋白C说明书

haemtech活化蛋白C说明书

Activated Protein C

活化蛋白C

活化蛋白C（APC）使因子Va失活
代表了APC对因子Va的蛋白水解失活，其中：PS =蛋白S，PCPS =磷脂囊泡（或细胞表面），Ca ++ =钙离子。因子Va失活形成因子Vai的原因是APC在三个特定位点对因子Va重链（94K）进行了蛋白水解（实心箭头）（1,2）。这些切割位点在因子Va重链中的位置如下：(人：R306，R506和R679）和（牛：R306，R505和R662）。辅因子分子的*灭活需要在精氨酸306位裂解。活化蛋白C在精氨酸306上的切割仅在存在膜的情况下发生，并且需要事先在精氨酸505上切割重链。APC对因子Va轻链进行的蛋白水解仅在牛分子中发生，并且对于灭活不是必需的（虚线箭头）。

•  HCAPC-0080 人类激活的蛋白C

• 尺寸	50微克
  公式	50％（vol / vol）甘油/ H 2 O

  存储	-20°摄氏度
  纯度	通过SDS-PAGE，> 95％

  活性测定	显色测定
  保质期（正确存放）	12个月

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• HCAPC-DEGR 人类激活蛋白C-DEGR（激活位点被封锁）

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  尺寸	50微克
  公式	20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4

  存储	-80°摄氏度
  纯度	通过SDS-PAGE，> 95％

  活性测定	显色测定
  保质期（正确存放）	12个月

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• BCAPC-1080 牛活化蛋白C

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  尺寸	50微克
  公式	50％（vol / vol）甘油/ H 2 O

  存储	-20°摄氏度
  纯度	通过SDS-PAGE，> 95％

  活性测定	显色测定
  保质期（正确存放）	12个月

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• BCAPC-DEGR 牛激活蛋白C-DEGR（阻止活性位点） 

• 尺寸	50微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存储	-80°摄氏度
  纯度	通过SDS-PAGE，> 95％

  活性测定	显色测定
  保质期（正确存放）	12个月

活化蛋白C（APC）是一种抗凝血丝氨酸蛋白酶，来源于两条链，依赖于维生素K的酶原，蛋白C（3-7）。α-凝血酶和血栓调节蛋白之间的复合物催化蛋白C重链中Arg-12（牛中的Arg-14）的单裂，从而产生活化的C蛋白。几种非生理相关的蛋白酶，例如RVV-X激活剂，胰蛋白酶和PROTAC也能够激活C蛋白。

APC用作抗凝血剂，可催化辅因子Va和VIIIa因子的蛋白水解失活，从而导致凝血酶原酶和Xase因子复合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活都是Ca2 +和磷脂依赖性的。维生素K依赖的辅因子蛋白S通过与APC形成1：1的复合物（Kd = 6×10-9M）适度提高了失活率（8）。

有几个因素减弱了APC的抗凝活性。Xa因子通过竞争因子Va上相似的结合位点来保护因子Va免于APC的蛋白水解作用。凝血酶也已被提出通过蛋白S的蛋白水解失活作为APC的调节剂。此外，APC还受循环肝素依赖性蛋白的调节C抑制剂（PAI-3），肝素非依赖性循环蛋白C抑制剂，血小板衍生的蛋白C抑制剂和PAI-1。据报道，在APC和两种PAI类型之间形成的复合物可说明在输注APC或体内产生APC时观察到的纤维蛋白溶解增加。

除了我们的标准APC制剂外，还可以使用含有Dansyl-EGR-氯甲基甲酮的活性位点封闭形式。

活化的蛋白C是由纯化的蛋白C通过凝血酶激活，然后进行离子交换色谱法制得的（4）。APC以50％（体积/体积）甘油/水的形式提供，应储存在-20oC下。通过SDS-PAGE分析确定纯度，并使用生色底物测定法测量活性。还按照APC耐药性分析的要求测试了所有生产批次的APC延长正常人血浆aPTT的能力（10,11）。该测试的结果以aPTT（+/- APC）比（10nM APC）的形式提供给每个批次。