proaxsis PA004-1操作指南

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NEATstik®（10盒）

PA004-1（单个试剂盒）和PA004-10（10个试剂盒）

NEATstik®是一项快速的即时护理测试，可以监测痰液样本中活性中性粒细胞弹性蛋白酶的水平。

NEATstik®通常以10个测试盒的形式提供。如果需要，可以提供单项测试，费用为£28英镑，另加运费和增值税（如果有）

 

  1. 预期用途

NEATstik®是一种一次性体外诊断试剂，用于定性检测痰液样本中的活性中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)。本产品仅供医疗保健专业人士使用。

 

  1. 背景

中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是一种丝氨酸蛋白酶，储存在中性粒细胞中直至活化和释放。NE有三种形式：作为活性酶、无活性酶原或抑制剂结合酶。活性NE是一种降解酶，在正常生理情况下，参与

在炎症和消除微生物感染中1。然而，在肺部疾病中，当发现高浓度的活性NE时，这种降解能力引起过度的组织降解，损伤气道壁有助于破坏性和恶性的炎症周期2。

痰中的活性NE是感染和炎症的已确定生物标志物，与炎性肺病的感染严重程度相关，包括但不限于囊性纤维化(CF)、慢性阻塞性

肺部疾病(COPD)和支气管扩张症3-5。持续监测痰液中这种临床上有用的生物标志物可能有助于这些肺部疾病的管理。

  1. 试验原理

NEATstik®利用ProteaseTag®技术特异性检测痰液样本中的活性NE。

NEATstik®由封装在塑料盒内的侧流试纸组成。试纸条由膜和垫组成，置于固体载体上，应用结合物和两条反应线：供试(T)线和对照线

(C)线。结合物是ProteaseTag®（旨在与活性NE特异性相互作用）和有色金颗粒的混合物。供试(T)细胞系由可检测NE的抗体和对照(C)细胞系可检测结合物组成。

样品稀释后，向NEATstik®的样品端口加入小体积，开始检测过程。稀释样本沿试纸移动，并与结合物相互作用。结合物中的ProteaseTag®将与样本中存在的活性NE结合，沿试纸上行并与供试品结合

(T)线。过量结合物将与对照(C)线结合。

检测线的外观确认了样品中存在的活性NE高于预先设定的阈值。

质控线的外观证实检测正确进行。

  1. 试剂盒组分

每个复合包装盒包含10个套件。

每个试剂盒包含：

密封箔袋中的1×NEATstik®侧流检测

1 xNEATstik®样本稀释缓冲液(20 mL)1 x痰液稀释罐

1 x双球吸管1 x刻度吸管1 x说明书

 

需要但未提供的材料

痰液收集罐称量秤或天平秒表/计时器

  1. 试验程序

收集样品

采集样本进行检测时，要求患者将痰液（不是唾液）咳入痰液采集壶（未提供）。建议立即检测样品。

样品制备

加入NEATstik®前，必须稀释痰液样本。

  1. 将痰液稀释罐的底部放在称量天平上。称量天平去皮重（零）。
  1. 将痰液稀释罐保持在称量天平上，使用抹刀（连接在痰液稀释罐的盖子上）将1-2 g痰液从痰液收集罐中转移到痰液稀释罐中。
  2. 记录转移痰液的重量(g)。痰液稀释罐应保持在称量天平上。
  3. 使用以下计算公式计算NEATstik®样品稀释缓冲液产生10倍稀释所需的量：

痰液重量 = g

x 9

= g NEATstik®

样品稀释缓冲液

  1. 称量天平去皮重（零）。
  2. 使用刻度移液管，将NEATstik®样本稀释缓冲液转移至痰液稀释罐中，直至计算重量。
  3. 将盖子放在痰液稀释罐上，并确保其拧紧。
  4. 倒置痰液稀释槽，使痰液与缓冲液混合

10次。

  1. 检测方法（续）

执行测试

  1. 从铝箔包装中取出NEATstik®，置于水平面上，观察窗朝上。
  2. 取下痰液稀释罐的盖子。
  3. 使用双球吸管吸取稀释痰液样本。尽量确保

读取结果和质量控制

如果检测成功完成，对照(C)线将以红线显示（颜色强度可能不同）。如果质控(C)线不可见，则结果无效，应使用新样本和新的检测试剂盒重复检测。

如果TEST(T)线可见，则确认痰液样本中存在大于预设阈值的活性NE。

  1. 性能特征

使用58份冷冻痰液样本评估NEATstik®检测的性能。使用ProteaseTag®Active NE免疫测定法(ProAxsis Ltd)定量测定活性NE。

  • 42份样本有痰液NE浓度

< 8µg/mL = 阴性

  • 16份样本有痰液NE浓度

> 8µg/mL = 阳性

该检测对16份NE定量高于8µg/mL的痰液样本中的16份给出了阳性结果（100%灵敏度），对42份NE定量低于8µg/mL的痰液样本中的36份给出了阴性结果（86%特异性）。

 

  1. 使用限制

仅用于稀释痰液样本

为获得准确结果，请遵循提供的说明

NEATstik®结果必须结合其他临床和患者进行评价

  1. 处置

痰液样本和使用的检测组分具有潜在生物危害性。根据当地临床废物指南适当处置使用过的检测试剂盒和痰液样本。

 

  1. 参考文献
  1. Pham,C.(2008)International Journal of Biochemistry&Cell Biology,40(6-7),1317-1333.
  2. Sandhaus,R.&Turino,G.(2013)COPD,10(S1):60-63.
  3. Sagel,S. et al(2012)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,186(9):857-865
  4. Mayer-Hamblett,N. et al(2007)美国呼吸与重症医学杂志，175:822-828
  5. Chalmers,J.D. et al(2016)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine 195:1384–1393.


 

仅溶液-无痰液“结块”。

医疗保健专业人员可获得的数据。

NEATstik®不能定量痰液样本中的活性NE。


 

 

  1. 定量活性中性粒细胞弹性蛋白酶
  1. 将样品应用于NEATstik®上的椭圆形样品端口。

 

  1. 读取结果前，等待10 min（使用定时器）。

 

如果TEST(T)线不可见，痰液样本中存在的任何活性NE均不超过预设阈值。

 

  1. 故障排除

未出现对照(C)线

试验无效。使用新套件重复。

 

  1. 警告和注意事项

请勿使用超过有效期的组件

请勿混合不同试剂盒批次的组分

本检测仅供一次性使用。请勿重复使用

处理痰液样本和进行检测时，应穿戴合适的防护。

 

  1. 储存

在室温下储存试剂盒。

如果在推荐的储存条件下，每个检测试剂盒仍保存在原始包装中，则可使用至标签上打印的失效日期。

从密封袋中取出后，应立即使用NEATstik®侧流试验。

NEATstik®样本稀释缓冲液应在开瓶后立即使用。