• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

帕斯夸尔，G.，等。(2018)。“通过细胞间酶标记监测体内 T 细胞-树突细胞相互作用。” 自然 553(7689)：496-500。

不同细胞类型之间的相互作用对于多种生物过程至关重要，包括免疫、胚胎发育和神经元信号传导。尽管可以通过活体显微镜在体内监测细胞间相互作用的动态，但这种方法不能提供有关受体和配体的任何信息，也不能分离相互作用的细胞以进行下游分析。在这里，我们描述了一种互补方法，该方法使用细菌分选酶 A 介导的跨免疫细胞突触的细胞标记来识别活体小鼠细胞之间的受体-配体相互作用，方法是产生随后可以通过流式细胞术在体外检测到的信号。我们将这种用于标记免疫细胞之间“亲吻和奔跑”相互作用的方法称为“通过 SorTagging 细胞间接触标记免疫伙伴关系”（LIPSTIC）。使用 LIPSTIC，我们表明在体内 T 细胞启动期间树突状细胞和 CD4(+) T 细胞之间的相互作用以两种不同的方式发生：早期的同源阶段，在此期间，CD40-CD40L 相互作用特异性地发生在 T 细胞和抗原之间。加载树突状细胞；以及后来的非同源阶段，在此期间，这些相互作用不再需要 T 细胞受体的事先参与。因此，LIPSTIC 能够直接测量体外和体内的动态细胞间相互作用。鉴于其与不同受体-配体对和一系列可检测标记一起使用的灵活性，

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

敬畏，O.，等。(2015)。“T 滤泡辅助细胞中的 PU.1 表达限制了 CD40L 依赖性生发中心 B 细胞的发育。” J免疫学。

PU.1 是一种 ETS 家族转录因子，对多种造血细胞谱系的发育很重要。以前的工作证明了 PU.1 在促进 Th9 发育和限制 Th2 细胞因子产生方面的关键作用。PU.1 在其他 Th 谱系中是否具有功能尚不清楚。在这项研究中，我们检查了 PU.1 在 CD4+ T 细胞中异位表达的影响，并观察到与 T 滤泡辅助 (Tfh) 细胞功能相关的基因表达降低，包括 Il21 和 Tnfsf5（编码 CD40L）。来自在 T 细胞中缺乏 PU.1 表达的条件性突变小鼠的 T 细胞 (Sfpi1lck-/-) 证明体外 CD40L 和 IL-21 的产生增加。在佐剂依赖性或佐剂非依赖性免疫后，我们观察到 Sfpi1lck-/- 小鼠的 Tfh 细胞数量增加，生发中心 B 细胞（GCB 细胞）增加，体内抗体产量增加。与对照小鼠相比，这与来自 Sfpi1lck-/- 小鼠的 Tfh 细胞中 IL-21 和 CD40L 的表达增加相关。最后，虽然阻断 IL-21 不会影响 Sfpi1lck-/- 小鼠中的 GCB 细胞，但免疫 Sfpi1lck-/- 小鼠的抗 CD40L 治疗降低了 GCB 细胞数量和 Ag 特异性 Ig 浓度。总之，这些数据表明 PU.1 在 Tfh 细胞、生发中心和 Tfh 依赖性体液免疫的功能中具有抑制作用。免疫的 Sfpi1lck-/- 小鼠的抗 CD40L 治疗降低了 GCB 细胞数量和 Ag 特异性 Ig 浓度。总之，这些数据表明 PU.1 在 Tfh 细胞、生发中心和 Tfh 依赖性体液免疫的功能中具有抑制作用。免疫的 Sfpi1lck-/- 小鼠的抗 CD40L 治疗降低了 GCB 细胞数量和 Ag 特异性 Ig 浓度。总之，这些数据表明 PU.1 在 Tfh 细胞、生发中心和 Tfh 依赖性体液免疫的功能中具有抑制作用。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

布拉塞特，J.，等。(2015)。“在可逆性结肠炎的新小鼠模型中，疾病的发展和维持都需要 CD4 T 细胞。” 粘膜免疫学。doi：10.1038/mi.2015.93。

目前治疗炎症性肠病的疗法疗效有限，副作用显着，并且通常会随着时间的推移而减弱。关于在结肠炎粘膜愈合过程中起作用的细胞和分子机制知之甚少。为了研究此类事件，我们开发了一种新的可逆性结肠炎模型，其中将 CD4+CD45RBhi T 细胞过继转移到伤寒杆菌定植的淋巴细胞减少小鼠中，导致结肠炎症的快速发作，而这种炎症可通过消耗致结肠炎 T 细胞来逆转。缓解与临床和组织病理学评分的改善、肠粘膜免疫细胞浸润减少、肠道基因表达谱改变、结肠粘液层再生以及上皮屏障完整性的恢复有关。尤其，致结肠炎 T 细胞不仅对结肠炎的诱导至关重要，而且对疾病的维持也很重要。致结肠炎 T 细胞的消耗导致肿瘤坏死因子 α (TNFα) 水平迅速下降，这与炎症免疫细胞对炎症部位的浸润减少有关。虽然中和 TNFalpha 阻止了结肠炎的发作，但对患有已确定疾病的小鼠进行抗 TNFalpha 治疗未能解决结肠炎症。总的来说，这种可逆性结肠炎的新模型为研究慢性肠道缓解-复发性疾病的粘膜愈合动力学提供了重要的研究工具。致结肠炎 T 细胞的消耗导致肿瘤坏死因子 α (TNFα) 水平迅速下降，这与炎症免疫细胞对炎症部位的浸润减少有关。虽然中和 TNFalpha 阻止了结肠炎的发作，但对患有已确定疾病的小鼠进行抗 TNFalpha 治疗未能解决结肠炎症。总的来说，这种可逆性结肠炎的新模型为研究慢性肠道缓解-复发性疾病的粘膜愈合动力学提供了重要的研究工具。致结肠炎 T 细胞的消耗导致肿瘤坏死因子 α (TNFα) 水平迅速下降，这与炎症免疫细胞对炎症部位的浸润减少有关。虽然中和 TNFalpha 阻止了结肠炎的发作，但对患有已确定疾病的小鼠进行抗 TNFalpha 治疗未能解决结肠炎症。总的来说，这种可逆性结肠炎的新模型为研究慢性肠道缓解-复发性疾病的粘膜愈合动力学提供了重要的研究工具。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

康德，P.，等。(2015)。“DC-SIGN(+) 巨噬细胞控制移植耐受的诱导。” 豁免权 42(6)：1143-1158。 

单核细胞谱系的组织效应细胞可以根据其环境分化为具有特定细胞功能的不同细胞类型。介导移植耐受诱导的免疫保护性巨噬细胞的表型、发育要求和功能机制仍然难以捉摸。在这里，我们证明共刺激有利于抑制 CD8(+) T 细胞免疫并促进 CD4(+) Foxp3(+) Treg 细胞扩增的表达 DC-SIGN 的巨噬细胞的积累。从机制上讲，岩藻糖基化配体和 TLR4 信号传导的同时 DC-SIGN 参与是产生与延长同种异体移植物存活相关的免疫调节 IL-10 所必需的。在体内删除表达 DC-SIGN 的巨噬细胞，干扰其 CSF1 依赖性发育，或阻止 DC-SIGN 信号通路消除耐受性。总之，这些结果为共刺激阻断的致耐受效应提供了新的见解，并将 DC-SIGN(+) 抑制性巨噬细胞鉴定为免疫耐受的关键介质，并伴随临床治疗意义。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

米勒，ML 等。(2015)。“急性排斥后移植耐受性的自发恢复。” 国家通讯社 6：7566。

移植是治疗终末期器官衰竭的一种方法，但在没有药物免疫抑制的情况下，同种异体器官会被急性排斥。这种排斥总是导致同种异体致敏和二级供体匹配移植物的加速排斥。可以在动物和一部分人类中诱导移植耐受性，并且可以长期接受同种异体移植物而无需维持免疫抑制。然而，移植排斥可能在获得移植耐受状态很久之后发生。当这种同种异体移植物被拒绝时，假定同种异体致敏规则适用于非耐受宿主，并且免疫耐受性丧失。我们使用心脏移植的小鼠模型表明，当单核细胞增生李斯特菌感染导致急性排斥反应时，因此废除移植耐受性，供体特异性耐受状态重新出现，允许自发接受供体匹配的第二次移植。这些数据表明，同种异体移植耐受的记忆胜过移植排斥的记忆。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

Ballesteros-Tato, A. 等。(2014)。“通过抗原呈递到流感特异性 CD8(+) T 细胞的不同持续时间对记忆编程的表位特异性调节。” 豁免 41(1)：127-140。

记忆 CD8(+) T 细胞在初级反应期间被编程，以获得稳健的次级反应。在这里，我们显示 CD8(+) T 细胞对流感病毒的不同表位作出反应，在初级反应期间收到了质上不同的信号，从而改变了它们的次级反应性。核蛋白 (NP) 特异性 CD8(+) T 细胞在初级反应的后期遇到 CD40 许可、CD70 表达、CD103(-)CD11b(hi) 树突状细胞 (DC) 上的抗原。因此，它们维持 CD25 表达并对白细胞介素 2 (IL-2) 和 CD27 做出反应，这两者共同编程了它们强大的二次增殖能力和干扰素-γ (IFN-γ) 产生能力。相比之下，聚合酶 (PA) 特异性 CD8(+) T 细胞在初级反应的后期没有遇到携带抗原的、CD40 激活的 DC，没有接受 CD27 和 CD25 信号，也没有被编程为具有强大增殖和细胞因子产生能力的记忆 CD8(+) T 细胞。因此，CD8(+) T 细胞响应丰富的抗原，如 NP，主导了二次反应。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

• CD40/CD40L 信号的体外阻断

Krummey, SM, 等。(2014)。“与 Th1 细胞相比，念珠菌引起的鼠 Th17 细胞表达高 Ctla-4，并且对共刺激阻断具有抗性。” J Immunol 192(5): 2495-2504。

效应和记忆 T 细胞可能与同种异体 Ag 发生交叉反应以介导移植排斥。尽管对 Th1 细胞的共刺激特性进行了充分研究，但对微生物引发的 Th17 细胞的共刺激要求知之甚少。共刺激阻滞剂 CTLA-4 Ig 在治疗几种 Th17 驱动的自身免疫性疾病方面无效，并且与肾移植后的严重急性排斥有关，导致我们研究 Th17 细胞是否在 CD28/CTLA-4 阻滞抵抗中起作用异体反应。我们建立了一个 Ag 特异性模型，其中 Th1 和 Th17 细胞分别通过结核分枝杆菌和白色念珠菌免疫引起。C。白色念珠菌免疫引起更高频率的 Th17 细胞，并赋予移植后对共刺激阻断的抗性。与结核分枝杆菌组相比，白色念珠菌诱导的 Th17 细胞含有较高频率的 IL-17(+)IFN-γ(+) 生产者和较低频率的 IL-10(+) 和 IL-10(+) )IL-17(+) 细胞。重要的是，Th17 细胞差异调节 CD28/CTLA-4 通路，与 Th1 细胞相比，表达同样高的 CD28，但 CTLA-4 的量显着增加。离体阻断实验表明 Th17 细胞对 CTLA-4 共抑制更敏感，因此对 CTLA-4 Ig 不太敏感。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

马歇尔，D.，等。(2014)。“胸腺调节性 T 细胞分叉发育期间对 IL-2 和 IL-15 的不同需求。” 免疫学杂志 193(11)：5525-5533。

尚未*了解胸腺中调节性 T 细胞 (T(reg)) 生成的发育途径。在这项研究中，我们用四环素诱导的 Zap70 转基因重组了 Zap70 缺陷胸腺细胞的胸腺发育，以允许 T(reg) 发育的时间解剖。我们发现 T(reg) 以*的动力学发展，首先出现在 CD4 单阳性 (SP) 胸腺细胞中的第 4 天。CD25(+)Foxp3(+) T(reg) 选择的*模型建议通过 CD25(+)Foxp3(-) CD4 SP 前体进行开发。相比之下，我们的动力学分析显示存在丰富的 CD25(-)Foxp3(+) 细胞，这些细胞在响应 IL-2 时非常有效地成熟为 CD25(+)Foxp3(+) 细胞。CD25(-)Foxp3(+) 细胞在发展动力学和自身肽MHC 的亲和力方面更接近成熟的T(reg)。这些群体在发育过程中也表现出对细胞因子的不同需求。CD25(-)Foxp3(+) 细胞依赖于 IL-15，而 CD25(+)Foxp3(+) 的产生则特别需要 IL-2。最后，我们发现 IL-2 和 IL-15 来自体内不同的来源。IL-15 是基质来源的，而 IL-2 仅来自依赖完整 CD4 谱系发育的造血细胞，而不是经历 Ag 的细胞或 NKT 细胞。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

Baumjohann, D. 等。(2013)。“持久性抗原和生发中心 B 细胞维持 T 滤泡辅助细胞反应和表型。” 免疫 38(3)：596-605。

T 滤泡辅助 (Tfh) 细胞为 B 细胞提供帮助，对于生发中心 (GC) 反应的建立至关重要，包括产生高亲和力抗体和记忆 B 细胞和长寿浆细胞。在这里，我们报告 Tfh 细胞反应的大小由抗原量决定，并与 GC B 细胞反应的大小直接相关。此外，维持 Tfh 细胞表型需要 GC B 细胞持续的抗原刺激。在淋巴细胞减少的情况下，强烈且持续的 Tfh 细胞反应导致旁观者 B 细胞激活、高丙种球蛋白血症以及多反应性抗体和自身反应性抗体的产生。这些数据表明抗原剂量决定了 Tfh 细胞反应和 GC 反应的大小和持续时间，

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

Hofstetter，AR 等。(2012)。“MHC Ib 类限制性 CD8 T 细胞在小鼠多瘤病毒感染过程中依赖于 CD4 T 细胞帮助和 CD28 共刺激而有所不同。” 免疫学杂志 188(7)：3071-3079。

我们最近发现了一种保护性 MHC Ib 类限制性 CD8 T 细胞对小鼠多瘤病毒感染的反应。这些 CD8 T 细胞识别来自 VP2 病毒衣壳蛋白的 aa 139-147 的肽，该肽与非多态性 H-2Q9 分子结合，该分子是与β(2)m 相关的 MHC Ib 类分子的 Qa-2 家族的成员。Q9：VP2.139 特异性 CD8 T 细胞表现出不寻常的通货膨胀反应，其特征是在 3 个月内逐渐扩张，然后是稳定的维持阶段。我们之前已经证明 Q9:VP2.139 特异性 CD8 T 细胞依赖于 Ag 进行扩增，但不依赖于长期维持。在这项研究中，我们检验了 Q9:VP2.139 特异性 T 细胞反应的扩增和维持成分不同地依赖于 CD4 T 细胞帮助和 CD28 共刺激的假设。CD4(+) 细胞和 CD28/CD40L 消耗削弱了 Q9:VP2.139 特定 CD8 T 细胞的扩张，并且内在的 CD28 信号足以进行扩张。相比之下，CD4 T 细胞不足，而不是 CD28/CD40L 阻断，导致 Q9:VP2.139 特异性 CD8 T 细胞在维持阶段的频率下降。这些结果表明 Q9:VP2.139 特异性 CD8 T 细胞对小鼠多瘤病毒感染的反应依赖于 CD4 T 细胞帮助和 CD28 共刺激以促进膨胀，但仅依赖于 CD4 T 细胞帮助维持。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

泰勒、JJ 等人。(2012)。“一种不依赖生发中心的途径在初级反应的早期产生未转换的记忆 B 细胞。” J Exp Med 209(3): 597-606。

记忆 B 细胞可以从经典的生发中心 (GC) 途径或不太了解的 GC 独立途径产生。我们使用基于抗原的细胞富集来评估这些途径对多克隆记忆 B 细胞库的相对贡献。我们确定了一个 CD38(+) GL7(+) B 细胞前体群体，它以响应强 CD40 刺激的 GC 独立方式直接分化为 IgM(+) 或同种型转换 (sw) Ig(+) 记忆 B 细胞。或者，CD38(+) GL7(+) B 细胞前体有可能成为 Bcl-6(+) GC 细胞，然后主要生成 swIg(+) 记忆 B 细胞。这些结果表明早期 IgM(+) 和 swIg(+) 记忆 B 细胞是独立于 GC 的途径的产物，而后来切换的 Ig(+) 记忆 B 细胞是 GC 细胞的产物。

• CD40/CD40L 信号传导的体内阻断

西、EE 等。(2011)。“记忆 CD8(+) T 细胞的严格调节限制了它们在持续高病毒载量期间的有效性。” 豁免 35(2)：285-298。 

要设计成功的慢性病疫苗，了解记忆 CD8(+) T 细胞对持久性抗原再刺激的反应至关重要。然而，大多数比较记忆和初始细胞反应的研究仅在快速清除的急性感染中进行。在此，通过比较记忆和幼稚 CD8(+) T 细胞对急性和慢性淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒感染的反应，我们表明记忆细胞在幼稚细胞上占主导地位，并且在存在足够数量时具有保护作用，可以快速减少感染。相反，当感染没有迅速减少时，由于高抗原负荷或持续存在，记忆细胞会迅速丢失，这与幼稚细胞不同。这种记忆细胞的丧失是由于抑制细胞增殖、抑制性受体 2B4 的选择性调节、并增加对 CD4(+) T 细胞帮助的依赖。因此，强调设计能引发有效 CD4(+) T 细胞帮助和快速控制感染的疫苗的重要性。