fabgennix IGY-1910说明书

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)

鸡 IgY 纯化试剂盒

Product no.: IGY-1910

IgY 纯化试剂盒 – 如何从蛋黄中纯化 IgY 抗体

IGY 的分离和纯化步骤简单且在室温下进行。

新鲜鸡蛋被打碎并使用蛋黄分离器分离蛋黄。蛋黄被刺破释放蛋黄内容物，可以使用牙签轻松去除膜。
对于新鲜蛋黄，在不断搅拌下加入 5 倍体积的试剂 A 的蛋黄重量。注意：如果蛋黄超过 3 天且未冷冻，建议使用 6 倍体积的试剂 A。不建议使用此试剂盒使用冷冻蛋黄。
加入所有试剂后，会形成浓稠的黄色沉淀。继续搅拌 10 分钟，并将内容物在 4 ° C下孵育过夜。沉淀会在 1-2 小时内沉淀下来，上清液会变清。
内容物在冷摇摆斗式离心机中以 3500-4000Xg 在 4 ° C 下离心 30 分钟。
在预冷烧杯中倒出澄清的上清液，并在不断搅拌下缓慢加入等体积的试剂 B。继续搅拌 10 分钟，并将混合物在 4 ° C 下保持 2-4 小时至过夜。1-2 小时内会在底部沉淀出清澈的白色沉淀。
将内容物在 4°C 下以 4000xg 离心 20 分钟以收集白色沉淀。
小心地去除所有液体，并使用以下公式在抗体重组缓冲液中重组白色沉淀。对于 10 克蛋黄，添加 2 至 2.5 毫升抗体重组缓冲液。
通过在 280 处测量 1:20 稀释的 OD，按内容定量 IgY。
总 IgY 可储存在 1:1 比例的抗体稳定缓冲液中，以便在 -40°C 或更低温度下长期储存。

储藏条件

所有试剂在 4oC 下可稳定保存长达 1 年。

一般建议

鸡蛋可在 4°C 下长期保存，但建议在使用本试剂盒前将其新鲜裂解以分离 IgY。分离后的蛋黄可在 4°C 下在 0.05% 叠氮化纳中储存数天，而不会显着降低 IgY 的回收率。蛋黄不应冷冻储存以用于该试剂盒。
蛋黄中的脂质含量变化很大，有时损坏步骤不会产生清晰的上清液。在这种情况下，可以再添加一倍体积的试剂 A 以*破坏蛋黄。

本产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。