上海金畔生物genelink 26-4300-02说明书
Oligo d(T) 5’ Cy3 Labeled
规格:25微克
运输条件:室温
储存温度-20摄氏度
描述
分别合成和纯化不同大小的染料标记的寡核苷酸d(T)引物。染料标记的低聚d(T)12-18以等摩尔比混合。Oligo dT主要用于通过逆转录酶启动合成
使用mRNA作为模板的第一链cDNA,用于微阵列杂交协议。
标记为oligo dT的染料经过凝胶纯化,在-20℃下重新组合储存后,作为冻干粉末提供。
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳测定低聚物纯度大于98%。
重建
建议在无核糖核酸酶的DEPC处理水中以50µM(50 pmol/µl)的浓度或10mM Tris pH 8.0进行重组。储备溶液可根据需要进一步稀释至适当的工作浓度。
为了制备50μM的底漆溶液,使用冻干低聚物的“nmol/25μg”值乘以20,以确定要添加的稀释液体积(微升)。
公式:
“总nmol”x 20=要添加的稀释剂μl。
-短时间旋转试管,将运输过程中可能卡在瓶盖中的试管内容物卸下。
颗粒可能非常小,不可见。
-直接向试管中加入适量的无核糖核酸酶水或10mM Tris pH 8.0。旋涡。
-上述溶液为50µM。这相当于50 pmol/µl。
荧光标记探针应避光,以避免光漂白。
在零下20点储存
重建后C或以下。
推荐用法
在20µl反应体积中,使用2µl含有1µg聚(A)+RNA的50µM溶液作为模板。
详见反应条件。
质量控制数据
该产品被证明能以聚(A)+RNA为模板引发第一链cDNA合成反应。
功能分析条件
下面给出的条件已经过测试,以产生第一链cDNA合成,并给出了一个例子。
使用该产品的其他实验室已经使用了各种变体和其他方案,以产生出色的第一链合成。研究人员可以替代他们自己的反应条件。
RNA的质量对逆转录反应非常重要。必须有完整的全长RNA作为模板材料,不含微量RNA酶和污染性化学物质。
低质量的RNA模板通常是导致cDNA产物截短和不完整的原因。
按照下面给出的顺序添加组件。反应体积可以放大。