上海金畔生物bioron 108725说明书

1、BIORON的一步WGA试剂盒由BIORON GmbH开发和生产，是DOP（退化寡核苷酸PCR）的改进版，具有优化的引物序列和BIORON*的SD聚合酶。这种酶结合了链置换能力和高达92°C的热稳定性。由于这些特点，可以将这种酶用于两种扩增无需额外移液或及时动手的步骤。该试剂盒包含从单细胞或低拷贝模板扩增人类基因组DNA所需的一切。每个试剂盒包含一个2.5x MM（不含酶的主混合物）；10 U/µl SD聚合酶；人类基因组DNA作为阳性对照和PCR级水。
该扩增基于多重置换反应，结合专门设计的针对人类基因组DNA优化的简并引物。BIORON SD聚合酶能够在合成新链的过程中替换先前的链。结合高达92°C的温度稳定性，全基因组扩增分析中的两个常见反应步骤不需要额外的手动时间。这将污染和处理错误的风险降低。
该试剂盒用于低拷贝数基因组DNA的可重复扩增，在约2小时内产生2-10µg产品。

2、在解冻和处理阳性对照品（PC、人类基因组DNA）和样本时避免剪切力。
所需的额外材料
•PCR循环器
•适用于所用PCR循环器的低结合PCR管
•适用于PCR管的密封件或盖子
•带气溶胶屏障的一次性低结合移液管头
•可变容量单通道移液管
•安全层流箱
•符合当地要求的安全设备

3.一步WGA套件的申请
•单细胞DNA分析
•下一代测序（NGS）
•SNP基因分型
•基于qPCR和PCR的突变检测
•STR和RFLP分析
•阵列技术（比较基因组杂交）

4.储存条件和稳定性
试剂盒必须在-20°C下储存，并在有效期前保持稳定。
使用前将2.5x MM（主混合料）、阳性对照品和水解冻。将其保持在4°C，将SD聚合酶保持在-20°C，直到需要，并在冷却架中运输。
请避免2.5x MM反应缓冲液的额外冻融循环。如果需要少量反应，2.5x MM的等分就足够了。只有在遵守存储条件的情况下，本手册中规定的套件*性能保证才有效。

5.质量控制
BIORON一步WGA试剂盒的性能在批次间进行常规监测。

6.反应设置协议
开始前的重要注意事项：
该试剂盒用于扩增已经分离的人类基因组DNA。没有包括提取系统。
样本要求：
•来自1-100个细胞的基因组DNA（例如来自人类细胞的10-1000 pg DNA）
•分类染色体
•来自动物、植物或细菌的完整或片段化单链或双链DNA
来源
•最大样品体积14µl
•细胞染色产生的DNA可能会对试剂盒性能产生负面影响
•必须避免福尔马林固定样本中的DNA，以获得最佳结果