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- 产品货号：
- BN10048
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- 中文名称：
- Sulfo-Cy3-E-dUTP
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- 英文名称：
- Sulfo-Cy3-E-dUTP
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- 品牌：
- Biorigin
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货号
产品规格
售价
备注
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BN10048-25nmole
25nmole
¥3160.00
染色剂/指示剂
产品描述
应用范围：荧光标记染料
产品参数
Ex/Em: 548/565 nm
分子量：～766
贮存条件：-20℃避光保存, 可以储存 6 个月，可以采用 pH7.4 的 10mM Tris 溶解后，分装保存，避免反复冻融。
使用方法
DNA 标记
1、试剂（自备）
（1） Taq DNA 聚合酶
（2）10× Taq reaction buffer
（3）25 mM MgCl2
（4）dATP, dTTP, dCTP, dGTP (单独溶液), 1 mM each
（5）DNA 模板
（6）正向、反向引物，10 μM each
（7）PCR 清洁试剂盒
2、PCR 反应
2.1 按照表 1 反应体系配制 PCR 反应混合液：
2.2 每个反应管加 1μL 1mM Sulfo-Cy3-E-dUTP 注：阴性对照管，加 1 μL 1mM dTTP 代替 Sulfo-Cy3-E-dUTP
2.3 按照表 2 程序运行 PCR 反应
注：
1）热变性时间依据不同的 Taq 酶进行调整
2）退火温度设置：Tm – 5℃
3）延伸时间根据扩增片段大小而定，一般 200-300 bp 片段设为 1 min 即可
2.4 可选步骤用 PCR 清洁试剂盒去除未掺入的单核苷酸
表 1 PCR 反应体系
表 2 PCR 反应条件
2.5 取 10%的 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳（凝胶不加入DNA 染料），检测 PCR 反应的效率和特异性，通过紫外凝胶成像仪或激光凝胶扫描仪观察。
注：凝胶染色前先观察染料的荧光，以免与下一步的凝胶染料发生荧光淬灭。
2.6 采用后染法，使用 DNA 凝胶染料对凝胶进行染色，观察总的 PCR 产物或阴性对照组的 PCR 扩增产物。
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