POLYSCIENCES 21759-1说明书

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POLYSCIENCES 21759-1说明书

 

美国POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生产和经营LIFE SCIENCES生命科学（胶体金,不含甲醛的甲醇等），病理学和显镜学 微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上较大较全的多聚化合物供应商,同时是的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.

  POLYSCIENCES   21759-1现货

Nylon Wool Fiber T细胞分离尼龙毛柱

产品简介】

　尼龙毛柱是免疫学中一种用于分离T细胞的分离柱。忧郁在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。

描述

尼龙羊毛纤维可用于从外周血中分离白细胞并从B细胞中分离T细胞。粒细胞和B细胞粘附在纤维上，而T细胞和其他细胞则不粘。

准备使用，在10cc注射器中使用500mg预包装尼龙羊毛纤维。

10cc预装注射器Gamma处理25.0 – 40.0 kGy。

危害： 

无害使用正常预防措施

处理： 

运动正常护理

存储： 

在室温下储存

【详细说明】

 

尼龙毛柱

 

　　尼龙毛柱是免疫学中一种用于分离T细胞的分离柱。忧郁在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。而市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。该方法不像流式和磁珠费用昂贵，而且操作简便，所需要的条件也不高，是一种非常实用的方法。

 

　　操作方法：

 

　　1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃容器或注射器内，填料的体积控制在15毫升左右。因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率，所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。

 

　　2. 加入大量的PBS平衡柱子后，用铝箔包裹，并置于适当的容器内，高压灭菌15分钟。

 

　　（商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略，经过PBS平衡后可以直接进行下列步骤。）

 

　　3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内，顶部以铝箔覆盖，避免污染。

 

　　4. 注射器下端，橡皮管，弹簧夹用*消毒。打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。

 

　　5.首先，加入3-4倍柱体的无血培养基平衡，之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡（上述培养基都要预热），zui后等培养基液面接近柱填料液面时，关闭弹簧夹。

 

　　6. 样本细胞悬浮液浓度控制在约5×108cells/ml，上样量一般是1/3-1/5柱体积。样品加入之后，再加入少量培养液，然后关闭弹簧夹。

 

　　7.覆盖铝箔，垂直固定，置于消毒过的容器中，于培养箱内37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。

 

　　8. 从培养箱中拿出柱子，置于超净台内，除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管，加入适当体积经37℃预热的培养基，打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min，流出约5ml之后，流出的培养液基变得不透明，此时其中含有T细胞，收集这一部分培养基。

 

　　9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度，实际上，收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集，因为即使收集更多的量，回收率几乎不会增加。

 

　　10.上述操作后，细胞的

 

　　回收率为： 15~20 ％

 

　　T细胞含量： 85~95 ％

 

　　B细胞污染率： 1 5 ％

 

　　多数细胞被确定为T细胞。

 

（注）收集粘附于尼龙毛上的细胞时，将T细胞收集完毕后的尼龙毛再无菌操作的状态下取出，转移到适当的容器中，用镊子小心的将尼龙毛松开，粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射器芯插入注射器内，通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。

 

订货信息

货号

品名

包装

品牌

18369-50

尼龙毛

50g

POLYSCIENCES

18369-10

尼龙毛

10g

POLYSCIENCES

21759-1

尼龙毛柱 预装好

10支

POLYSCIENCES

 

 

 

 

 

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