DNA污染去除酶说明书

DNA污染去除酶说明书

英文名称：HL-dsDNase

中文名称：热敏双链特异性核酸酶

产地：挪威

品牌：ArcticZymes

应用：去除RNA样品中的基因组DNA污染

储存和运输：-20度存储 干冰运输

有效期：-20度3年

单位定义：1单位指在25℃标准反应条件下，每分钟OD260增加0.001（约每分钟消化1pmol核酸底物）所需的酶量。

简介：制备RNA时基因组DNA污染将会干扰下游PCR或Northern Blot实验。用RNase-free的DNase消化DNA也会导致RNA降解。热敏双链DNA特异性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease，又名ezDNase或HL dsDNase)，为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链DNA，对单链DNA或RNA几乎无活性，其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外，该双链DNA特异性核酸酶降解双链DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍，因此特别适用于去除RNA样品中的基因组DNA污染。该热敏型双链DNA核酸酶可将DNA降解为2~8bp的产物，且55℃ 5min可使该酶不可逆失活，同时又能保持RNA和ssDNA的稳定性，因此产物无需再纯化，可直接用于后续反应。同时该酶与M-MLV和AMV的反应Buffer都是兼容的，可应用于反转录反应中去除样本中基因组DNA的污染，提高反转录效率。

注意事项：

（1）1×dsDNase Buffer：20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。该酶需要1~3mM MgCl2。
（2）该酶对DTT敏感，任何反应体系中不得包含DTT。
（3）通常在RT反应中的用量为0.1~0.5U/20 μl体系。
（4）任何浓度的SDS、盐酸胍、β-mercaptoethanol或高盐离子（>300mM）均抑制该酶活性。
（5）该酶的宜反应温度为25~37℃，42℃ 30min后活性损失70%。

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